Modelagem da Oclusão Traqueal Fetal Transuterina em Modelo Murino: Um Procedimento Cirúrgico para Ligadura da Traqueia Fetal em um Camundongo Grávida

Resumo

Fonte: Aydın, E. et al. Modelo de oclusão traqueal fetal transuterina em camundongos. J. Vis. Exp. (2021)

Este vídeo demonstra o procedimento de oclusão traqueal transuterina de um feto de camundongo em um camundongo prenhe. Este modelo pode ser usado para estudar o impacto da traqueia ocluída no desenvolvimento pulmonar.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.

1. Laparotomia

1. Limpe a superfície abdominal com álcool e iodopovidona. Mantenha as condições estéreis durante toda a operação.
2. Faça uma incisão vertical para a laparotomia de mães grávidas. Corte todas as camadas separadamente.
3. Identifique os chifres uterinos de cada lado.
4. Determine os fetos candidatos para a cirurgia.
   nota: Não opere os fetos mais próximos da vagina.
5. Opere dois fetos em cada corno uterino se houver um número par de fetos de cada lado (4 na maioria das vezes) e em 1 feto em cada corno uterino se houver um número ímpar do útero (3 na maioria das vezes).

2. Oclusão traqueal (TO)

1. Use óculos de ampliação de 2,5x para visualização.
2. Posicione o corno uterino de forma transversal.
3. Pegue os filhotes, voltados para cima, entre dois dedos usando os olhos dos filhotes e a cauda como guia para posicionar o feto.
4. Aplique uma leve pressão na cabeça do filhote para permitir a extensão da cabeça e, portanto, a visualização do pescoço.
5. Utilizar sutura de polipropileno 6.0 com agulha atraumática para realizar OT (Figura 1). Mantenha a placenta na lateral e longe dos pontos de entrada e saída da agulha.
6. Insira a agulha transversalmente através do lado do útero longe da placenta através do 1/3^{da parte} anterior do pescoço.
7. Mova a agulha suavemente até a linha média do pescoço e direcione-a para a parte anterior, depois saia do pescoço entre a traqueia e em frente à bainha carotídea e ao útero.
8. Dê um nó na sutura, tendo o cuidado de manter a integridade das membranas e da parede uterina, e mantenha o cordão umbilical seguro durante o nó.

3. Fechamento da parede abdominal

1. Substitua o corno uterino no abdômen.
2. Injete 2 mL de solução salina estéril quente na cavidade peritoneal antes do fechamento.
3. Coloque uma sutura de poliglactina 5/0 para fechar a parede abdominal e feche a pele com uma sutura de seda que não escorre.
4. Aplicar 0,1 mg/kg de buprenorfina por via intraperitoneal para analgesia e permitir a recuperação da mãe em uma incubadora quente.

Resultados

Figura 1. Oclusão traqueal. (A) A sutura transuterina que passa pelo pescoço. (B) Representação esquemática das estruturas após a passagem da sutura e antes do nó. Abreviaturas: C = Artéria carótida; J = Veia jugular; T = Traqueia; E = Esôfago; V = Vértebra.

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Buprenorfina	Par Farmacêutica	NDC 42023-179-05	Para anestesia regional
Óculos de aumento	EUA Médico-Cirúrgico	SLR-250LBLK	Pelo menos 2,5x
Sutura de seda	Ética	VCP682G	4-0, 24 mm, de corte
Isoflurano	Halocarbon Ciências da Vida NDC	Nº 66794-017-25	Para anestesia regional
Sutura em polipropileno	Ética	Y432H	6-0, 13 mm 1/2c Taperpoint