Monitoramento multissistêmico em modelo de coelho: um método para avaliar parâmetros neurocardíacos e respiratórios para estudar os gatilhos induzidos por drogas orais para arritmia e convulsões

Resumo

Fonte: Bosinski, C., et al. Monitoramento multissistema para identificação de convulsões, arritmias e apneia em coelhos contidos conscientes. J. Vis. Exp. (2021).

Neste vídeo, descrevemos a gravação simultânea de vídeo, EEG, ECG e pistas respiratórias em um modelo de coelho em resposta ao medicamento administrado por via oral para entender a sequência de eventos que levam à convulsão. O modelo pode ser usado para testar medicamentos potenciais para sua segurança neurocardíaca.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.

1. Administração oral de medicamentos

1. Como muitos medicamentos são tomados por via oral, prepare compostos orais misturando com molho de maçã de qualidade alimentar. Misture 0,3 mg/kg de E-4031 em 3 mL de molho de maçã e coloque em uma seringa oral/irrigação de 3 mL sem agulha.
   nota: Vários medicamentos podem ser administrados dessa maneira, incluindo compostos de teste, medicamentos que são conhecidos por alterar a duração do intervalo QT (moxifloxacina ou E-4031) e um controle ou veículo negativo. Alguns medicamentos não estão disponíveis em uma formulação intravenosa. Além disso, muitos medicamentos são prescritos em uma formulação oral e, portanto, uma administração intravenosa pode ter menos relevância clínica.
2. Levante os lábios superiores e deslize a ponta da seringa oral na lateral da boca do coelho, que não é obstruída pelos dentes do coelho, e injete todo o medicamento e molho de maçã na boca do coelho.
3. Continue a gravação de vídeo-EEG-ECG por 2 h e, em seguida, retorne o animal à sua gaiola de origem para cuidados de rotina.
4. Nos dias experimentais 2 e 3, conecte o coelho ao vídeo-EEG-ECG, registre 10-20 min da linha de base, injete o mesmo medicamento e registre por 2 h.
5. Após 1 semana de washout, realize 10-20 min de linha de base e, em seguida, dê a cada coelho uma dose única de placebo por 3 dias consecutivos e registre por 2 h.
   nota: A administração de medicamentos orais pode ser projetada como um estudo cruzado, no qual o placebo é administrado durante a semana 1 e o medicamento na semana 2.

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Molho de maçã	Kirkland	897971	Veículo para medicamentos orais
computador	vale	Optiplex 5040	Computador de aquisição
E-4031	Tocris	1808	Agente conhecido por prolongar o intervalo QT
Eletrodo de ECG	RhythmLink	RLSND116-2,5	Eletrodos de pino subdérmico dobrados em 35 graus (0,4 mm de diâmetro) de 13 mm
Eletrodo de EEG	RhythmLink	RLSP513	Eletrodos de pino subdérmico retos de 13 mm de 5 torções (0,4 mm de diâmetro)
EEGLAB (2020)	Centro Swartz de Neurociência Computacional	Acesso aberto	Pode realizar análise espectral de EEG
Adaptador Ethernet para Ethernet	Linksys	USB3G16	Adaptador para conectar a câmera ao computador
LabChart Pro (2019, versão 8.1.16)	ADInstruments	N/A	Análise de ECG
MATLAB (R2019b, Atualização 5)	Obras de Matemática	N/A	Necessário para executar o EEGLAB
microfone	Estéreo Sony	ECM-D570P	Registro de manifestações audíveis de convulsões
Natus NeuroWorks	Natus	LC101-8	Software de aquisição e revisão
Organizador / empacotador de fios em material plástico	12Vwire.com	LM-12-100-BLK	Enrole os fios para reduzir o ruído
Tubo de PVC	genérico	N/A	Evita que coelhos pequenos chutem as patas traseiras e causem lesões na coluna vertebral
Amplificador quântico	Natus	Rolamento 13926	Amplificador / digitalizador
Amplificador Quantum HeadBox	Natus	Rolamento 22134	Caixa de fuga de 64 pinos
Restritor de coelho	Plas-Labs	501-TC	Vários tamanhos de restrições para coelhos estão disponíveis. 6 "x 18" x 6 "neste estudo.
Almofada de borracha (booster)	genérico	N/A	Levanta coelhos pequenos na contenção para evitar a compressão do pescoço
Grampo de orelha SpO2	NONIN	61000	PureSAT/SpO2
Adaptador de sensor de SpO2	NONIN	Rolamento 13931	XPOD PureSAT/SpO2
Câmera PTZ SRG-X120 1080p com saída HDMI, IP e 3G-SDI	Sony	SRG-X120	Câmera Impela