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Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.
1. Acessos intravasculares
NOTA: Os acessos intravasculares devem ser estabelecidos na veia jugular externa direita, veia jugular externa esquerda, artéria carótida esquerda, artéria femoral esquerda e veia femoral direita. No porco, a veia jugular externa é muito maior que a veia jugular interna e, portanto, mais fácil de acessar. Todos os materiais necessários para esta seção são mostrados na Figura 1A.
- Raspe o animal nos locais de punção para acessos intravasculares.
- Desinfete a pele com clorexidina (ou iodopovidona) e limpe com álcool isopropílico. Repita por mais dois ciclos.
- Coloque uma cortina estéril na área desinfetada com um orifício localizado centralmente na tampa.
- Use um dispositivo de ultrassom com uma sonda linear. Cubra a sonda com uma capa estéril e use gel estéril para exame vascular.
- Use um cateter venoso estéril 17 G para perfurar a pele e guiar a agulha para o posicionamento intravascular por ultrassom (Figura 1B, C).
- Substitua a agulha por um fio-guia usando a técnica de Seldinger. Remova o cateter venoso deixando apenas o fio-guia no lúmen intravascular. Em seguida, faça uma pequena incisão na pele (~5 mm) aderente ao fio-guia para facilitar a inserção da bainha.
- Coloque uma bainha de 8 French (F) sobre o fio-guia e no recipiente de sua escolha (a técnica de Seldinger). Escolha uma bainha 8F na veia jugular externa direita (para o cateterismo cardíaco direito) e na artéria carótida esquerda (para cateter de alça LV PV). É necessário lúmen suficiente para evitar danos aos cateteres.
- Coloque uma bainha 7F na veia jugular externa esquerda.
- Coloque uma bainha 7F na artéria femoral esquerda. O acesso é para medição invasiva da pressão arterial e amostragem de gases sanguíneos.
- Coloque uma bainha 12F (ou 14F, se disponível) na veia femoral direita para a inserção do balão da veia cava inferior (VCI). Considere o uso de um dilatador em uma abordagem de duas etapas para as bainhas maiores.
- Confirme e controle o posicionamento de todas as bainhas coletando sangue (venoso ou arterial, respectivamente) e lavando facilmente com solução salina isotônica. As bainhas estão posicionadas corretamente dentro de um vaso sanguíneo se for possível tirar sangue sem resistência.
- Fixe todas as bainhas com uma sutura de pele (tamanho 3.0) para evitar qualquer remoção acidental de uma bainha. As suturas da pele serão removidas após a conclusão do protocolo, juntamente com a remoção das bainhas.
- Conecte o acesso arterial femoral ao transdutor de pressão e calibre para a pressão atmosférica. Certifique-se de que esta configuração gere a forma correta da curva de pressão arterial.
- Retire uma amostra de sangue arterial de uma bainha arterial e analise-a em um dispositivo amostrador de sangue arterial para avaliar o pH, a pressão parcial arterial de dióxido de carbono (PaCO2) e oxigênio (PaO2, dependendo da FiO2 escolhida), bem como hemoglobina, eletrólitos, glicose no sangue e níveis de lactato.
- Corrigir eletrólitos e glicose no sangue, se necessário, para os valores-padrão por infusão do produto necessário. Especialmente, considere a correção dos níveis de potássio, pois os distúrbios do potássio podem aumentar o risco de arritmogênese desencadeada pela instrumentação.
- Se o porco estava em jejum antes do experimento, considere a infusão em bolus de solução salina isotônica (10 mL / kg infundidos por 30-60 min) ou cristalóide semelhante para neutralizar a hipovolemia.
- Considere uma infusão contínua de solução salina isotônica de 4 mL/kg/h para neutralizar a transpiração durante todo o protocolo.
NOTA: O experimento pode ser pausado nesta etapa.
2. Cateterismo cardíaco direito
- Lave um cateter de Swan Ganz com solução salina e certifique-se de que o balão esteja inflando corretamente.
- Conecte as portas do cateter Swan Ganz aos transdutores de pressão. Redefina a pressão para a pressão atmosférica mantendo as duas portas de pressão (para pressão arterial pulmonar e venosa central, respectivamente) no nível axilar médio do porco.
- Insira o cateter de Swan Ganz através da bainha 8F na veia jugular direita.
CUIDADO: Aventais de chumbo ou proteção semelhante devem ser usados sempre que usar fluoroscopia.
- Observe na fluoroscopia quando a parte distal do cateter de Swan Ganz está fora da bainha. Encha o balão com a seringa associada.
NOTA: A inflação do balão Swan Ganz dentro da bainha danificará o balão. A incidência ântero-posterior da fluoroscopia é suficiente para todos os procedimentos descritos.
- Avance o cateter de Swan Ganz lentamente seguindo seus movimentos na fluoroscopia. Avanços mais lentos permitirão que o fluxo sanguíneo guie o cateter.
- Observe alterações no sinal de pressão da porta distal ao entrar no VD e logo após a artéria pulmonar (Figura 2). Certifique-se de que o cateter avance sem qualquer resistência.
- Certifique-se de que a pressão mude de 5-8 mmHg na circulação venosa central para 20-30 mmHg na sístole e 0-5 mmHg na diástole no VD. Após a passagem das válvulas pulmonares, a pressão diastólica será de 10-15 mmHg (ver Figura 2 para mudanças nas formas do sinal de pressão).
NOTA: Pressões sistólicas no VD e na artéria pulmonar acima de 40 (ou pressão arterial pulmonar média acima de 25) podem ser um sinal de hipertensão pulmonar devido a infecção pneumônica no animal. Lembre-se de que a ventilação mecânica com pressão positiva também pode aumentar a pressão arterial pulmonar.
- Esvazie o balão e certifique-se de que a porta de pressão distal ainda esteja na artéria pulmonar principal. Use a fluoroscopia e o sinal de pressão para esta verificação.
