Extração de tecido bronquiolar de porco: um procedimento para dissecar seções de tecido bronquiolar de pulmões suínos

Resumo

Fonte: Harrington, N. E. et al. Teste de eficácia de antibióticos em um modelo ex vivo de biofilmes de Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus aureus no pulmão de fibrose cística. J. Vis. Exp. (2021)

Neste vídeo, descrevemos um procedimento cirúrgico para extrair tecidos bronquiolares de um pulmão de porco colhido. O tecido bronquiolar ex vivo pode ser usado para desenvolver modelos de infecção para o estudo de infecções pulmonares crônicas.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.

1. Dissecção de tecido pulmonar de porco ex vivo (EVPL)

1. Obtenha os pulmões da fonte designada o mais rápido possível após o abate, garantindo que sejam mantidos frios transportando-os para o laboratório em uma caixa térmica doméstica.
   nota: Os pulmões mais próximos do dia do abate apresentam menos hematomas devido ao armazenamento, mas o tecido mantido em armazenamento refrigerado por até 4 dias após o abate também pode ser usado. Como a cai....

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Etanol a 70% ou similar para esterilização de superfície e equipamento de dissecação de flamina gof
Folha de alumínio - pré-esterilizada por autoclave - para cobrir a tábua de cortar na qual você dissecará os pulmões
bico de Bunsen
Tábua de cortar - recomendamos uma tábua de plástico para permitir uma fácil descontaminação com álcool.
Caixa térmica para transportar pulmões para o laboratório
Tesouras de dissecção em diferentes tamanhos
Meio Eagle modificado de Dulbecco (DMEM)
Tubos reforçados de 2 mL da marca Fisher	Thermo Fisher	15545809
Faca de palete grande
Lâminas de barbear montadas
Tábua de cortar de plástico e folha de alumínio para criar uma superfície de dissecação estéril e lavável
Instituto Memorial de Roswell Park (RPMI) 1640 médio
Seleção de pinças (pontas rombas recomendadas)
Recipientes adequados para descarte de perfurocortantes e tecidos suínos contaminados, de acordo com as políticas de saúde e segurança da sua instituição.