Cultura do Segmento Ocular Anterior: Um Método para Cultura de Córnea com Segmento Anterior do Olho Suíno

Abstract

Fonte: Boice, E. N., Snider, E. J. Plataforma de Cultura de Órgãos do Segmento Anterior para Rastreamento de Lesões do Globo Aberto e Desempenho Terapêutico. J. Vis. Exp. (2021).

Neste vídeo, demonstramos o método de cultura de um segmento ocular anterior com córnea de um olho suíno. Este sistema de cultura serve como um modelo experimental para estudar lesões oculares.

Protocol

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.

1. Configurando segmentos anteriores em placas de cultura de órgãos

1. Coloque um único segmento anterior (AS) em uma placa de Petri com AS invertido (copo para cima). Usando um cotonete, molhe a mídia e passe suavemente no centro da córnea para remover qualquer pigmento. Usando uma pinça para segurar o olho e o mesmo cotonete, limpe o cotonete ao redor da esclera para remover o pigmento extra.
2. Inverta o AS e coloque em cima da parte inferior do prato sobre ....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
10-32 Plugue reto de policarbonato, conector de tubo com rosca macho	McMaster-Carr	51525K431
10-32 Parafuso de cabeça cilíndrica, 1/2"	McMaster-Carr	Rolamento 92196A269
Seringa de 10 mL	Bd	302995
Seringa de 20 mL	Bd	Rolamento 302830
Anti-Anti	Gibco	15240-096
Tecla L da extremidade esférica	McMaster-Carr	5020A25
Tubulação BD Intramedic PE 160	Fisher Científico	14-170-12E
Cotonetes	puritano	25-8061WC
Mídia DMEM	ATCC	30-2002
FBS	ATCC	30-2020
Pinça fina	Instrumentos de precisão mundiais	Rolamento 15914
Glutamamax	Gibco	Rolamento 35050-061
O-ring de silicone de alta temperatura, 2 mm de largura, 4 mm de diâmetro interno	McMaster-Carr	Rolamento 5233T47
Prego (objeto de perfuração)	McMaster-Carr	Rolamento 97808A503
Filtros de seringa de nylon	pescador	09-719C
Pbs	Gibco	10010-023
Policarbonato, de três vias, torneira com trava luer macho	pescador	NC9593742
Agulha dispensadora de ângulo de 90 graus de aço inoxidável 18 G	McMaster-Carr	Rolamento 75165A81
Agulha dispensadora de aço inoxidável 18 G reta de 1/2 ''	McMaster-Carr	Rolamento 75165A675