Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.
O estudo foi realizado em seis suínos machos e fêmeas de três meses de idade (raça Landrace Alemã) pesando aproximadamente 40 kg. Os animais foram levados para as instalações de cuidados com animais pelo menos 7 dias antes dos experimentos e foram alojados de acordo com as recomendações de bem-estar animal. Os animais receberam comida e água ad libitum, e seu estado de saúde foi avaliado regularmente pelo veterinário responsável. Um tempo de jejum de 12 h foi mantido antes dos experimentos. Todo o procedimento experimental e manejo dos animais foi supervisionado pelo médico veterinário responsável.
1. Indução anestésica e manutenção da anestesia
- Para indução anestésica e manutenção da anestesia, pré-medicar os animais e sedá-los profundamente usando uma injeção intramuscular seguida de injeções intravenosas, se necessário, para realizar a intubação endotraqueal. Depois disso, induza e mantenha a anestesia usando uma combinação de um agente anestésico volátil com uma aplicação contínua de opioides complementada com uma injeção adicional de bolus opioide.
- Realize injeções intramusculares de cetamina 20 mg · kg-1, azaperona 4 mg · kg-1 e midazolam 0,1 mg · kg-1 para pré-medicação e sedação.
2. Posicionamento da sonda
- Coloque o animal na posição lateral correta e flexione as costas do animal para ampliar o espaço entre as vértebras.
- Para a colocação percutânea de drenagem do líquido cefalorraquidiano para medir e controlar a pressão cefalorraquidiana, identifique o nível de L 4/5 ou L 5/6, perfure a pele e o espaço subcutâneo com a agulha introdutora e remova a agulha embutida.
- Coloque uma seringa cheia de solução salina na agulha e introduza cuidadosamente a agulha com pressão constante na seringa cheia de líquido.
- Uma vez que uma perda de resistência seja sentida como evidência da posição epidural, reintroduza a agulha de embutimento e introduza a agulha 2-3 mm mais para perfurar a dura-máter e remover a agulha de embutimento.
- Verifique a posição intratecal por gotejamento rápido de licor claro. Introduza a drenagem até 20 cm de profundidade, coloque o adaptador Luer-lock e verifique a posição por aspiração cuidadosa de licor.
- Fixe cuidadosamente a drenagem com suturas e conecte-a ao sistema de drenagem do líquido cefalorraquidiano.