Remoção da glândula lacrimal superior: uma técnica cirúrgica para remover as partes palpebral e orbital da glândula lacrimal superior do modelo de coelho

Resumo

Fonte: Honkanen, R. A. et al., Estabelecimento de um modelo de olho seco grave usando dacrioadenectomia completa em coelhos. J. Vis. Exp. (2020).

Este vídeo descreve o procedimento cirúrgico para remover as duas partes: palpebral e orbital da glândula lacrimal superior de um coelho para criar um modelo de doença do olho seco. Este modelo de coelho é adequado para estudos de homeostase da superfície ocular, fisiopatologia e terapêutica ocular.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.

Use coelhos brancos da Nova Zelândia (NZW) pesando 2−3 kg Animais levemente sedados colocados em uma bolsa de contenção com acepromazina subcutânea como acima (1 mg/kg). Remova todo o pelo da face e da superfície dorsal do crânio para visualizar os pontos cirúrgicos. Apare o pêlo com uma tesoura de corte, deixando o pêlo fino residual com cerca de 1 mm de comprimento. Remova todo o pelo residual usando creme depilatório suave seguindo as instruções do fabricante.

1. Remoção do OSLG

1. Infiltrar os locais de incisão (linhas de caneta de marcação cirúrgica e pálpebra posterior superior) com uma mistura 50:50 de lidocaína a 2% com epinefrina 1:100.000 e bupivacaína a 0,5% usando uma seringa de 5 cc com uma agulha 30 G (Figura 1A).
   nota: O tamanho da seringa e da agulha não é crítico.
2. Use uma agulha Colorado conectada a uma unidade eletrocirúrgica para fazer as incisões na pele ao longo das marcações cirúrgicas. As configurações podem variar de acordo com a resposta clínica e geralmente estão entre 10 a 15 unidades para corte e coagulação (Figura 1B).
3. Aplique tensão oposta na incisão da pele para separar os tecidos e expor as fibras musculares frontocutulares subjacentes.
4. Aplique pressão medial no globo ocular para ajudar na visualização do OSLG, visto como tecido protuberante localizado apenas medial ou profundamente às fibras musculares frontoscutulares. Se necessário, mova essas fibras musculares para o lado a fim de expor a incisura subjacente.
5. Com pinça dentada (0,3) e tesoura de capsulotomia, retraia suavemente e corte a cápsula fibrosa que cobre o OSLG. O OSLG normalmente tem uma cor bronzeada pálida (Figura 1C).
6. Usando pinças dentadas ou não dentadas, segure o tecido da glândula OSLG e puxe-o suavemente através da incisura superior usando uma técnica de "mão sobre mão". Corte pequenas faixas fibrosas usando uma tesoura de capsulotomia para liberar a glândula de sua posição na órbita (Figura 1D).
   nota: À medida que o tecido da glândula OSLG é removido, ele começará a coalescer em uma grande estrutura semelhante a um tubo (ducto excretor principal).
7. Quando a glândula tiver sido removida o mais completamente possível, use cautério generoso com a agulha Colorado para criar carbonização de tecido, truncando a glândula dentro da incisura o mais profundamente possível. Mais tarde, isso servirá como um marco confirmatório durante a remoção do PSLG.

2. Remoção do PSLG.

1. Inverta a pálpebra superior usando um aplicador com ponta de algodão. A extremidade bulbosa do PSLG geralmente é facilmente visível.
   nota: Em algumas dissecções anatômicas, pode ser possível visualizar o ducto excretor principal como uma estrutura linear pálida com cerca de 1 ou 2 mm de largura.
2. Engate o PSLG com uma pinça dentada (0.3) e retraia-o da superfície palpebral enquanto usa uma tesoura de capsulotomia para cortar ao redor de sua base, separando-o do tarso subjacente (Figura 2A).
3. Controle o sangramento moderado com o cautério monopolar.
4. Aplique tração contínua no tecido separado para manter um plano de tecido para dissecção. Isso permitirá que o ducto excretor principal do GLS também seja removido (Figura 2B).
   nota: À medida que a dissecção é realizada, ela normalmente avança para a borda orbital superior, onde é possível ver as marcas de cautério deixadas para trás pela remoção do OSLG mais superior e medialmente localizado.

Resultados

Figura 1: Remoção do OSLG.(A) Os sítios cirúrgicos são infiltrados com anestésico usando uma combinação 50:50 de lidocaína a 2% com epinefrina 1:100.000 e bupivacaína a 0,5%, que é injetada na pálpebra superior e ao longo das linhas de incisão para minimizar o desconforto durante o procedimento. (B) Uma agulha de microdissecção Colorado é usada para incisar a pele e ...

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
acepromazina, Aceproinj	Henry Schein Saúde Animal, Dublin, OH	NDC11695-0079-8	0,1 ml/kg injeção subcutânea para sedação de coelho
saco de contenção de animais	Henry Schein Saúde Animal, Dublin, OH	Jorvet J0170	Use uma bolsa de tamanho apropriado.
bupivacaína, 0,5%	Hospira Inc, Lake Forest IL	NDC: 0409-1162-02	Misto 50:50 com lidocaína a 2% com epinefrina 1:100.000 para infiltração de locais de incisão.
Agulha do Colorado	Stryker Craniomaxilofacial, Kalamazoo, MI	N103A	Use com unidade eletrocirúrgica para fazer incisões
bisturi elétrico com placa de cauterização monopolar	Valleylab, Boulder, CO	Força FXc	Use com unidade eletrocirúrgica para fazer incisões
fórceps, Bispo Harmon	Bausch e Lomb (Storz), Bridgewater	NJ E1500-C	Use pinça dentada para dacrioadenectomia
de agulha, calibre 30	BD, Lagos Franklin, NJ	REF 305106	Para infiltração de locais de incisão; o tamanho da seringa e da agulha não é crítico
coelho, Nova Zelândia Branco	Laboratórios Charles River, Waltham, MA	(NZW) 2-3 kg	Animais de pesquisa
tesoura, Vannas McKesson	Médico-Cirúrgico, São Francisco, CA	Miltex 2-130	Tesoura de capsulotomia para dacrioadenectomia
seringa, 5 cc	BD, Lagos Franklin, NJ	REF 309603	Para infiltração de locais de incisão; o tamanho da seringa e da agulha não é crítico