Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.
1. Preparação do modelo
- Alojar o porco macho adulto de 50 kg em uma unidade de cuidados com animais por 1 semana antes da cirurgia para aclimatar o animal às condições de alojamento e aos manipuladores. Jejue o modelo por um mínimo de 6 h antes do início da anestesia.
- Anestesiar o modelo com injeção intramuscular de cetamina (33 mg/kg), atropina (0,04 mg/kg) e buprenorfina (0,05 mg/kg), além de isoflurano inalatório (5%)9.
- Mova o modelo para a posição supina e borrife as cordas vocais com lidocaína (1%) para evitar laringoespasmo. Realize a intubação endotraqueal direta usando um tubo endotraqueal com balonete de 6.5 Fr. Confirme a posição correta do tubo endotraqueal usando capnografia.
- Insira um IV de 18G na veia marginal da orelha e inicie uma infusão de lactato de Ringer a uma taxa de 200 mL / h. Aplique uma pomada suave nos olhos da modelo para evitar o ressecamento durante a anestesia geral.
- Monitore a frequência cardíaca e a saturação de oxigênio do modelo usando um oxímetro de pulso aplicado na cauda do modelo. Ventile o modelo entre 14 - 16 respirações/min usando um ventilador mecânico e um volume corrente de 5 - 10 mL/kg. Mantenha uma anestesia adequada, visando uma concentração alveolar mínima (CAM) de isoflurano entre 2 e 2,5.
- Antes do início da cirurgia, confirme a profundidade adequada da anestesia testando os reflexos da dor com uma pinça do dedo do pé da perna traseira. Reavalie os reflexos da dor em intervalos regulares durante a cirurgia.
2. Preparação do dispositivo
- Prepare a radiofrequência salina/bipolar inflamada (SBRF; Figura 1) de acordo com as especificações do fabricante.
- Abra a peça de mão (ponta de vedação bipolar 6.0) e conecte-a ao gerador.
- Defina a configuração da taxa de fluxo salino como Baixa. Use solução salina a 0,9% para uma condução máxima de energia.
- Defina a configuração de potência de radiofrequência para 160 W.
3. Cirurgia: Laparotomia
- Realize uma incisão longa e aberta de laparotomia na linha média usando um bisturi # 10 que se estende do xifisterno ao púbis e passa por todas as camadas da parede abdominal.
- Estabeleça uma exposição adequada dos órgãos sólidos de interesse (por exemplo, fígado, baço, rim), mobilize outras estruturas e insira um afastador conforme necessário.
nota: Para simplificar, o fígado será referido como o órgão sólido de interesse pelo restante deste protocolo. Este protocolo também incluirá a criação de lesões de grau semelhante no rim e no baço.
4. Cirurgia: Lesão Simulada de Órgãos Sólidos
NOTA: As lesões descritas abaixo representam uma piora na hierarquia de lesões. As lesões são criadas por um cirurgião especialista em trauma e a hemostasia será obtida por outro cirurgião.
- Usando uma lâmina de bisturi # 10, aplique uma força abrasiva (para frente e para trás) na cápsula hepática para induzir o sangramento capsular. A lesão deve ser superficial (ou seja, 1 - 2 mm) e 2 cm2 de tamanho. O tamanho da lesão pode então ser aumentado em incrementos de 1 cm2 a critério do operador.
- Crie lacerações de órgãos sólidos de gravidade crescente usando a aplicação direta de um bisturi. O comprimento da laceração pode se estender de 5 cm a todo o comprimento do órgão. A profundidade da laceração deve ser de 1 cm e depois aumentada em incrementos de 1 cm a critério do operador.
- Crie lesões penetrantes com um dispositivo contundente, como uma braçadeira Kelly, usando um movimento de esfaqueamento. Estes podem ser de espessura parcial (ou seja, 50% do órgão) ou de espessura total (ou seja, passando completamente pelo órgão).
5. Hemostasia
- Pressione o botão da peça de mão, iniciando o fluxo simultâneo de solução salina e a entrega de energia de radiofrequência bipolar. A solução salina ferverá no local da aplicação.
- Aplique a ponta do dispositivo diretamente na superfície crua do fígado, em áreas superficiais de sangramento ou em defeitos no próprio fígado. Não esfaqueie o órgão com o efetor final.
- Aplique a sucção simultânea de um sugador cirúrgico padrão, conforme necessário, para fornecer a solução salina aquecida e a energia diretamente nas áreas de hemorragia contínua. Isso também ajuda a visualizar a localização precisa da hemorragia em andamento.
- Aquecer os tecidos a cerca de 100 °C (coagulação térmica sem carbonização significativa) com um movimento suave para a frente e para trás. Um 'pop' auditivo ocorrerá após 3 a 5 s e significa que a queima está completa. O usuário pode então mover o instrumento de maneira organizada para o próximo local de destino.
- Se necessário, aplique eletrocautério de alta tensão direcionado com precisão em conjunto com a aplicação do SBRF e dispositivos de sucção para obter hemostasia. Isso pode ser necessário para a hemorragia maior e mais vigorosa.
6. Selagem de ductos biliares pequenos a médios
- Usando o mesmo método descrito acima, aplique a ponta do instrumento na borda cortada/lesionada do parênquima hepático para selar os ductos biliares pequenos a médios.
