Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.
1. Colheita da veia jugular
NOTA: Anestésicos locais (como lidocaína) devem ser usados antes de fazer a incisão na pele.
- Antes da incisão na pele, administrar enrofloxacina profilática (5 mg/kg) por via subcutânea. Para analgesia, administrar 0,05 mg/kg de buprenorfina por via subcutânea duas vezes ao dia por 3 dias.
nota: Para evitar uma queda na temperatura corporal, uma esfrega cirúrgica do local da incisão pode ser usada em vez de borrifar o corpo do animal com etanol a 70%.
- Incisar 50–60 mm da região cervical com bisturi cirúrgico longitudinalmente. Dissecar sem corte os tecidos subcutâneos e a fáscia para expor um segmento de 20 a 30 mm da veia jugular. Ligue todos os ramos da veia exposta com suturas de seda 4-0.
- Coloque uma sutura de seda 2-0 ao redor das veias jugulares internas e externas para realizar a ligadura imediatamente após a incisão da veia jugular na próxima etapa.
- Incisar a parede venosa (aproximadamente 1 mm) do lado distal da veia. Insira um cateter de balão 2-French do corte em direção ao lado proximal da veia. Ligue a sutura de seda 2-0 nos locais distais das veias jugulares.
- Encha o balão com 0,2 mL de ar. Desnude a íntima da veia usando três passagens do cateter para esfoliação endotelial.
nota: Esse procedimento é considerado equivalente à distensão de um enxerto de veia safena em cirurgias de revascularização humana, o que causa esfoliação endotelial.
- Ligue a extremidade proximal da veia. Corte a veia para colher.
nota: Distinga cuidadosamente a extremidade distal e proximal da veia colhida, pois a anastomose à artéria deve ser realizada de forma invertida (ou seja, a extremidade distal da veia deve ser anastomosada à extremidade proximal da artéria). Por exemplo, a inserção de um cateter intravenoso de um determinado lado funcionaria como um marcador.