Um modelo experimental de isquemia periférica: um procedimento para gerar isquemia periférica por ligadura da artéria femoral em um coelho

Resumo

Fonte: Sligar, A. D., et al. Modelo pré-clínico de isquemia de membros posteriores em coelhos diabéticos. J. Vis. Exp. (2019).

Neste vídeo, demonstramos um procedimento cirúrgico para induzir isquemia periférica via ligadura da artéria femoral em um coelho. Este método fornece um modelo experimental eficaz para a pesquisa de doenças vasculares periféricas.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.

1. Isolamento da artéria femoral

1. Anestesiar um coelho da Nova Zelândia (4 a 6 meses de idade) com diabetes pré-induzido e hiperlipidemia, usando 20 a 40 mg / kg de cetamina e 2 mg / kg de midazolam por injeção subcutânea. Coloque o coelho em isoflurano a 1,5% a 3% (normalmente 2%) durante a sedação inicial usando uma máscara.
2. Faça uma incisão longitudinal na pele sobre a artéria femoral direita usando um bisturi (lâmina #15). Certifique-se de que a incisão se estenda inferiormente a partir do ligamento inguinal terminando na área imediatamente proximal à patela (aproximadamente 6 cm).
3. Use dissecção romba com tesoura curva de Metzenbaum ou um hemostático de mosquito curvo para expor a artéria femoral.
4. Use afastadores Weitlaner para manter a incisão aberta.
5. Adicione 0,5 mL de lidocaína a 1% localmente para reduzir a irritação nervosa e promover a vasodilatação.
6. Continue a dissecção romba dos tecidos para liberar todo o comprimento da artéria femoral junto com todos os ramos da artéria femoral, incluindo as artérias epigástrica inferior, femoral profunda, circunflexa lateral e epigástrica superficial (Figura 1A).
7. Dissecar ainda mais ao longo das artérias poplítea e safena, bem como da artéria ilíaca externa (Figura 1A). Umedeça periodicamente a área com solução salina para proteger contra danos aos tecidos. Se a dissecção romba for realizada ao longo do sulco femoral (entre os músculos), não há necessidade de cortar o músculo.
8. Separe cuidadosamente a artéria da veia e do nervo, conforme mostrado na Figura 1B, C. Ligue as artérias indicadas pelo diagrama com suturas de seda 4.0, colocando dois laços com espaço suficiente entre eles para cortar a artéria. Esses laços são realizados com um nó de cirurgião seguido de quatro nós quadrados.
9. Corte entre os dois laços nas artérias ligadas usando a pequena tesoura Metzenbaum. Extirpar a artéria femoral de sua origem proximal como um ramo da artéria ilíaca externa até o ponto distalmente onde ela se bifurca para formar as artérias safena e poplítea.

Resultados

Figura 1: Indução de isquemia de membros posteriores em coelhos através da ligadura e excisão da artéria femoral. (A) Ilustração da anatomia vascular do membro posterior do coelho. Coloque laços em todos os pontos marcados para ligar as artérias. (B) Campo cirúrgico mostrando o corte até a artéria femoral antes da ligadura. (C) Artérias femorais com ligaduras no local para induzir isquemia de membros...

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
0,9% de cloreto de sódio	Henry Schein Médico	1537468 / 1531434	Saco de 250 mL / 1000 mL de irrigação btl
Seringa de 10 mL	VWR	BD309695
Agulha 27G	VWR	89219-288
Acepromazina	Patterson Veterinário	VEDC207
Alfaxsozinho	Patterson Veterinário	07-891-6051
Buprenorfina SR	ZooPharm
Máquina de cortar cabelo	amazona	B000CQZI3Q	Lâmina Oster #40
Almofada de aquecimento	Cincinnati Subzero	273
Bomba de almofada de aquecimento	Gaymar		Gaymar T / Bomba
hemostato	Ferramentas de Belas Ciências	13009-12	Hemostático de mosquito curvo
Isoflurano	Henry Schein Médico	1100734
Cetamina	Patterson Veterinário	856440301
lidocaína	McKesson Médico-Cirúrgica	239936
Lidocaína/Creme de Prilocaína	McKesson Médico-Cirúrgica	Rolamento 761240
Tesoura Metzenbaum	Ferramentas de Belas Ciências	Rolamento 14019-13
Midazolam	Henry Schein Médico	1215470
bisturi	Ferramentas de Belas Ciências	10003-12
Lâmina de bisturi	Ferramentas de Belas Ciências	Rolamento 10015-00	Lâmina #15
Suturas de seda	Ethicon-Johnson & Johnson	A183H	4-0 gravatas de seda 18 "
Campos cirúrgicos	Gepco	8204S
Afastador Weitlaner	Ferramentas de Belas Ciências	17012-13