Coloração Safranin-O: Um Método para Visualizar a Integridade Estrutural e a Celularidade da Cartilagem

Abstract

Fonte: Zhao, Y., et al. Estabelecimento de um modelo induzido cirurgicamente em camundongos para investigar o papel protetor da progranulina na osteoartrite. J. Vis. Exp. (2014).

Neste vídeo, demonstramos um procedimento de coloração para cartilagem usando laranja de safranina. Este método ajuda a visualizar a cartilagem e detectar qualquer dano.

Protocol

1. Coloração de Safranina O

1. Comece com as lâminas de vidro contendo seções sagitais seriadas abrangendo uma região do centro do côndilo lateral até o centro do côndilo medial de um modelo de camundongo eutanasiado com o menisco medial desestabilizado.
2. Em seguida, desparafinize as lâminas em oxileno e hidrate-as em um gradiente de etanol para água destilada. Em seguida, as lâminas são coradas com solução de hematoxilina de ferro Weigert, solução Fast Green (FCF) a 0,05%, solução de ácido acético a 1% e solução de Safranina O a 0,1%. Monte as lâminas usando meio resinoso.
3. Pontue as lâminas coradas com Safranin O com base na perda de proteoglicano (cor vermelha) na cartilagem e na porcentagem de destruição na estrutura da cartilagem, faça a análise estatística para o escore histológico.