É necessária uma assinatura do JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou inicie seu teste gratuito.

Artigo de método

Uma técnica simplificada para a produção de um modelo de ferida isquêmica

17.5K visualizações

⸱

DOI:

10.3791/3341

⸱

2 de maio de 2012

 , 

Neste artigo

Resumo

Nós desenvolvemos uma técnica minimamente invasiva para criar um modelo de ferida de coelho isquémica orelha dividindo a artéria central e do nervo e do feixe neurovascular craniana. Um túnel subcutâneo, em seguida, corta todos os tecidos subcutâneos. Este procedimento causa um transtorno pele mínimo e pode ser utilizado com segurança em animais diabéticos.

Resumo

Um obstáculo importante na investigação da ferida corrente diabética é a falta de um modelo de ferida isquémico que podem ser utilizados com segurança em animais diabéticos. As drogas que funcionam bem em não-isquêmicas feridas podem não funcionar em feridas diabéticas humanos porque vasculopatia é um importante fator que dificulta a cura dessas feridas. Nós publicamos um artigo em 2007 descrevendo uma orelha de coelho modelo ferida isquêmica criado por uma técnica cirúrgica minimamente invasiva. Desde então, têm ainda mais simplificado o procedimento para facilitar a operação. Em uma orelha, três pequenas incisões na pele foram feitas nos pedículos vasculares, 1-2 cm da base da orelha. A artéria central foi ligado e corte ao longo com o nervo. O pacote inteiro craniana foi cortado e ligado, deixando apenas o ramo caudal intacta. Um túnel subcutâneo circunferencial foi feita através das incisões, para cortar tecidos subcutâneos, músculos, nervos e vasos pequenos. A outra orelha foi utilizado como um controlo não-isquémica. Quatro feridas foram feitas na parte ventral of cada orelha. Esta técnica produz 4 feridas isquêmicas e 4 não-isquêmicas feridas em um animal para comparações pareadas. Após a cirurgia, a orelha isquêmica foi legal e cianótica, e mostrou o movimento reduzido e falta de pulso na artéria da orelha. A temperatura da pele da orelha isquémica foi 1-10 ° C mais baixa do que na orelha normal e esta diferença foi mantida por mais de um mês. Ear tecido conteúdo fosfatos de alta energia foram menores na orelha isquémica do que a orelha de controlo. Vezes da cicatrização de feridas eram mais longos na orelha isquémica do que no ouvido não-isquémica, quando o mesmo tratamento foi usado. A técnica foi agora utilizado em mais de 80 coelhos em que 23 eram diabéticos (tempo diabetes variando de 2 semanas a 2 anos). No coelho única desenvolveu complicações cirúrgicas, tais como hemorragia, infecção ou ruptura nas incisões na pele. O modelo tem muitas vantagens, tais como perturbação de pele pouco, tempo de isquemia, e maior taxa de sucesso, quando em comparação com muitos outros modelos. É can ser utilizado com segurança em animais com resistência reduzida, e também pode ser modificado para satisfazer os requisitos de testes diferentes.

Protocolo

1. Base anatômica

A orelha de coelho tem sido um material de estudo privilegiado para o tratamento de feridas desde o século 20. O ouvido é fornecida por três feixes vasculares (central, cranial e caudal), o feixe central é o maior, enquanto os navios nos pacotes cranial e caudal variam em tamanho. Ocasionalmente, a artéria caudal pode estar ausente. 1 Todos estes vasos são facilmente identificadas no lado dorsal após a orelha é raspada (Fig. 1). No lado ventral, a pele distai não recebe fornecimento de sangue a partir dos vasos proximais. Os três feixes de vasos na orelha dorsal têm numerosos ramos qu....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Discussão

Diabetes afeta 23,6 milhões de pessoas em os EUA, 2,3 e 15-20% desses pacientes desenvolvem úlceras nos pés em sua vida, 4,5, a um custo anual de tratamento de mais de US $ 25 bilhões. 3,6 No entanto, mesmo o melhor disponível tratamentos alcançar somente uma taxa de cura de 50% e esta é geralmente temporária, 7, com taxas de recorrência tão altos quanto 66% em diabéticos 3,6. Quando ocorrer úlceras em pacientes diabéticos, as principais complicações, como infecção .......

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Divulgações

Não há conflito de interesse financeiro envolvido neste estudo.

Agradecimentos

Este estudo foi financiado em parte pelo NIH concede 1RO1DK74566 e 1RO1AM52984. Os autores gostariam de agradecer a Sra. Jacqueline McCarty em RRC por sua ajuda durante a cirurgia, os drs. Jianpu Wang e Harshini Sarojini por sua ajuda na cirurgia e no pós-operatório de cuidados de alguns coelhos, Dr. Wan Rong por seu trabalho, histologia e Sra. Ming Li para medições de seus HPLC de fosfatos de alta energia.

....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Materiais

Para o monitoramento durante a cirurgia

  1. A almofada de aquecimento para manter a temperatura normal.
  2. Um monitor de oxigênio.
  3. Um monitor de temperatura.

Para a cirurgia

  1. Uma faca # 3 com # lâmina 15.
  2. Dois pares de pinças (uma para a pele e outro para outros tecidos moles).
  3. 2-3 pares de pinças de pequenas dimensões.
  4. Um ou dois pares de tesoura micro (para o corte de tecido).
  5. Um par de tesouras pequenas (para cortar suturas).
  6. Um porta-agulha.
  7. Alguns golpes de aço inoxidável (para fazer feridas).

Referências

  1. Ninomiya, H. The vascular bed in the rabbit ear: microangiography and scanning electron microscopy of vascular corrosion casts. Anat. Histol. Embryol. 29, 301-305 (2000).
  2. American Diabetes Association: Diabetes statistics. , American Diabetes Association. Available from: http://www.diabetes.org/diabetes-basic....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Reimpressões e permissões

Explorar mais artigos

Isquemia da Orelha de CoelhoLigação do Pedículo VascularCriação de Túnel SubcutâneoCirurgia Minimamente InvasivaPesquisa de Feridas DiabéticasMedição da Temperatura CutâneaMonitoramento de Oxigênio TranscutâneoAvaliação do Tempo de Cicatrização de FeridasAnálise de Fosfato de Alta Energia