Transplante de intestino delgado tornou-se uma opção de tratamento aceitável para os pacientes com falência intestinal irreversível. Nosso modelo experimental de transplante intestinal ortotópico pequena em ratos serve como uma ferramenta confiável para enfrentar imunológico subjacente e os processos inflamatórios que complicam o transplante intestinal.
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Artigo de método
Transplante de intestino delgado de ratos ortotópico
* These authors contributed equally
Neste artigo
Resumo
Resumo
Transplante de intestino delgado, tornou-se uma opção clínico aceite para doentes com síndrome do intestino curto e insuficiência de nutrição parentérica (insuficiência intestinal irreversível). Em centros especializados melhorou operatório e estratégias de gestão levaram a paciente a curto e médio prazo e excelente sobrevida do enxerto, proporcionando alta qualidade de vida 1,3. Ao contrário do transplante mais comum de outros órgãos sólidos (coração, fígado ou seja,) muitos mecanismos subjacentes da função do enxerto e alterações imunológicas induzidas por transplante intestinal não são totalmente conhecidos 6,7. Episódios de rejeição aguda, septicemia e insuficiência crônica do enxerto são os principais obstáculos ainda contribuem para menos favorável resultado a longo prazo e dificultando um emprego mais amplo do procedimento, apesar de um número crescente de pacientes em nutrição parenteral domiciliar que potencialmente podem beneficiar de um transplante de tal. O intestino delgado contémum grande número de leucócitos passageiros comumente referida como parte do intestino associada sistema linfóide (GALT), esta sendo parte da razão para a alta immunogenity do enxerto intestinal. A presença ea proximidade de muitos comensais e patogénicos no intestino explica a gravidade dos episódios de sépsis, uma vez a integridade da mucosa do enxerto for comprometida (por exemplo, rejeição). Para avançar no campo de dados de múltiplos órgãos intestinais e transplante mais gerados a partir de modelos animais confiáveis e viáveis é necessário. O modelo aqui fornecida combina confiabilidade e viabilidade uma vez estabelecido de forma padronizada e pode fornecer informações valiosas nas subjacentes complexos moleculares, os mecanismos celulares e funcionais que são acionados por transplante intestinal. Nós temos utilizado com sucesso e refinado o procedimento descrito ao longo de mais de 5 anos no nosso laboratório 8-11. O formato de vídeo baseado JoVE é especialmente útil para demonstrar o procedimento complexoDure e evitar as armadilhas iniciais para grupos de planejamento para estabelecer um modelo de roedor ortotópico investigando o transplante intestinal.
Protocolo
1. Operação doador
- O rato dador devem ser mantidos em jejum durante 24 horas (acesso livre à água / solução de glicose).
- Para induzir a anestesia inalatória de isoflurano, comece com 2% sobre atomizador padrão, e em seguida, reduzir para 1% após a realização de laparotomia. Realize uma pitada de igual para verificar sedação.
- Raspar o abdômen e limpe com preparação da pele 3 vezes (Kodan). Em seguida, executar uma incisão mediana, após a administração subcutânea do analgésico.
- Após o enxerto ser envolta em gaze embebida salina, separam-se as aderências fisiológicas entre o pâncreas e do cólon ascendente cuidadosamente com um Q-....
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Resultados
Evolução pós-operatória normal
Os animais transplantados deve se recuperar rapidamente do procedimento sob uma lâmpada de calor por cerca de 1 hora. A hipotermia é uma das principais causas de mortalidade no pós-operatório e devem ser evitados intra e pós-operatório. As perdas de fluido intra-operatória deve ser substituído por injeção subcutânea de 2,5 ml de solução salina normal mais 2,5 ml de glicose 5% a cada 8 horas para a primeira hora 24. Os ratos também devem ter livre acesso à solução .......
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Discussão
Embora os modelos de transplante de intestino de ratos têm sido descritos, o mais cedo no 5 1970ies a maioria dos modelos recentemente utilizados envolvem transplante heterotópico intestinal utilizando diferentes técnicas 13. Enquanto os procedimentos heterotópico em geral, têm a vantagem de técnicas de microcirurgia mais fáceis e mais fácil acessibilidade do enxerto para a avaliação, o transplante heterotópico intestinal tem a grande desvantagem de não levar em conta as múltiplas interações do int.......
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Divulgações
Não há conflitos de interesse declarados.
Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Nome do reagente | Companhia | Número de catálogo | Comentários (opcional) |
| Universidade de Wisconsin (UW) solução (ViaSpan) | Bristol-Myers Squibb | ||
| Uro-Nebacetin solução N | Nycomed | 6967855 | |
| Ampicilina | Ratiopharm | ||
| Carprofeno (Rimadyl) | Pfizer | ||
| Prolene sutura 10-0 unresorbable | Ethicon | ||
| Monocryl sutura reabsorvível 6-0 | Ethicon | ||
| Fio de vicryl 3-0 reabsorvível | Ethicon | ||
| Cateter iv G 20 milímetros 1.1x33 | Braun | ||
| Cateter iv G 22 0.9x25 milímetro | Braun | ||
| Kodan pele Prep | Schülke | ||
| Solução de NaCl a 0,9% Infusão | Braun | ||
| Fórceps curvos pequena | FineScienceTools | 11009-13 | |
| Fórceps micro curvo | AESCULAP | BD 333 | |
| Fórceps micro curvo | AESCULAP | FD281R | |
| Micro pinça reta 1 | WPI | 5 | |
| Micro pinça reta 2 | WPI | 2 | |
| Suporte da agulha micro | WPI | 14081 | |
| Micro tesoura | FineScienceTools | 15006-09 | |
| Micro bisturi | MANI | Faca oftálmica | |
| Grampos Micro | AESCULAP | FB329R |
Referências
- Abu-Elmagd, K. M., et al. Five Hundred Intestinal and Multivisceral Transplantations at a Single Center: Major Advances With New Challenges. Ann. Surg. 250 (4), 567-56 (2009).
- Berney, T., et al.
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Reimpressões e permissões
