Summary
नैदानिक प्रासंगिक intracerebral नकसीर (आईसीएच) के पशु मॉडल रक्तस्रावी स्ट्रोक के अपने ज्ञान का विस्तार करने के लिए और उपन्यास चिकित्सात्मक रणनीतियों की जांच की जरूरत है. इस अध्ययन में, हम का वर्णन है और दो आईसीएच मॉडल है कि चूहों के बेसल ganglia रेखित पिण्ड में या तो ऑटोलॉगस पूरे रक्त या बैक्टीरियल कोलैजिनेज की एकतरफा इंजेक्शन को लागू करने का मूल्यांकन.
Abstract
सहज intracerebral नकसीर (आईसीएच) एक संभावित जीवन धमकी स्नायविक रोग है कि सभी स्ट्रोक से संबंधित hospitalizations के 10-15% के लिए है और जिसके लिए कोई प्रभावी उपचार के लिए 1,2 उपलब्ध हैं खातों को परिभाषित करता है. क्योंकि मानव में आईसीएच की विविधता के कारण, विभिन्न preclinical मॉडल को अच्छी तरह से भावी चिकित्सीय रणनीतियों 3 का पता लगाने की जरूरत है. प्रायोगिक आईसीएच सामान्यतः या तो ऑटोलॉगस रक्त या बैक्टीरियल 4 कोलैजिनेज intraparenchymal इंजेक्शन द्वारा कृन्तकों में प्रेरित किया. उपयुक्त मॉडल नकसीर प्रेरण और चोट की प्रगति के pathophysiology के आधार पर चुना जाता है. रक्त इंजेक्शन मॉडल एक तेजी से प्रगति नकसीर mimics. वैकल्पिक रूप से, बैक्टीरियल कोलैजिनेज enzymatically मस्तिष्क capillaries के बेसल लामिना बाधित, एक सक्रिय खून बहाना है कि आम तौर पर कई घंटे से अधिक 5 विकसित हो सकता है. परिणामी perihematomal edema और neurofunctional घाटे fro मात्रा निर्धारित किया जा सकता हैमीटर दोनों मॉडल. इस अध्ययन में, हम वर्णित है और ऑटोलॉगस पूरे 6 खून की एक संशोधित डबल इंजेक्शन मॉडल के रूप में के रूप में अच्छी तरह से बैक्टीरियल 7 कोलैजिनेज की एक आईसीएच इंजेक्शन मॉडल, जो दोनों लक्ष्य के पुरुष सीडी-1 चूहों के बेसल ganglia रेखित पिण्ड का मूल्यांकन हम आईसीएच अधिष्ठापन के बाद 24 पर neurofunctional घाटे और मस्तिष्क edema और 72 घंटे का आकलन किया. ऑटोलॉगस (30 μl) रक्त या बैक्टीरियल कोलैजिनेज (0.075U) के Intrastriatal इंजेक्शन चूहों में प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य neurofunctional घाटा और 24 में काफी वृद्धि हुई मस्तिष्क edema और सर्जरी के बाद 72 घंटा (<0.05 पी) के कारण होता है. अंत में, दोनों मॉडलों के अनुरूप रक्तस्रावी दौरे उपज और preclinical आईसीएच अनुसंधान के लिए बुनियादी तरीकों का प्रतिनिधित्व करते हैं.
Protocol
NIH गाइड के साथ सभी प्रक्रियाओं के अनुपालन में आयोजित किए गए और प्रयोगशाला पशु की देखभाल और उपयोग के लिए पशु की देखभाल और लोमा लिंडा विश्वविद्यालय में उपयोग समिति द्वारा मंजूरी दे दी है.
1. Presurgical तैयारी
सड़न रोकनेवाला तकनीक सभी सर्जिकल प्रक्रियाओं के लिए सिफारिश कर रहे हैं. Stereotactic तंत्र कीटाणुरहित और बाँझ सर्जिकल उपकरणों सर्जरी से पहले तैयार. सभी पशु से निपटने के दौरान व्यक्तिगत सुरक्षा उपकरण (पीपीई) पहनें. सर्जरी के दौरान पशु की शारीरिक शरीर का तापमान बनाए रखने के लिए एक हीटिंग पैड का उपयोग करने के लिए.
- 8-12 सप्ताह पुरानी एक ट्रिपल बीम पशु पैमाने का उपयोग माउस वजन.
- सह इंजेक्षन ketamine (100 मिलीग्राम / किग्रा) और (10 मिग्रा / किग्रा) xylazine intraperitoneally तो संज्ञाहरण के लिए 7-10 मिनट प्रभाव लेने के लिए अनुमति (एक पर्याप्त बेहोश करने की क्रिया के लिए निगरानी).
- एक थर्मल कंबल पर माउस प्लेस और खोपड़ी दाढ़ी.
- दोनों आंखों के लिए नेत्र मरहम लागू.
- सुरक्षितairway, धीरे जीभ laterally चलती है, और ध्यान stereotactic तंत्र पर माउस सिर सुरक्षित. नोट: सिर स्तेरेओतक्तिक फ्रेम के आधार क्षैतिज सुरक्षित करना चाहिए.
- Betadine साथ शल्य चिकित्सा के क्षेत्र कीटाणुरहित, और 70% इथेनॉल से कुल्ला. तीन बार के एक कुल के लिए Betadine और 70% इथेनॉल के आवेदन बारी दोहराएँ. कपास इत्तला दे दी applicators इस उद्देश्य के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.
2. रक्त इंजेक्शन मॉडल
- एक 1 एक स्केलपेल ब्लेड # 10 के साथ सेमी लंबी खोपड़ी के midline चीरा बनाओ.
- कपास इत्तला दे दी applicators का उपयोग करने के लिए दूर नरम ऊतक को कवर खोपड़ी स्पष्ट क्रम में राज्याभिषेक और बाण के समान सीवन (शीर्षस्थान) का सीधा प्रतिच्छेदन बिंदु को बेनकाब.
- इंजेक्शन पंप पर माउंट हैमिल्टन सिरिंज (250 μl), और stereotaxically शीर्षस्थान से अधिक सुई (26 गेज) प्रत्यक्ष.
- आगे, stereotactic मैनिप्युलेटर हथियार को समायोजित करने के लिए सुई 0.2 मिमी स्थिति पूर्वकाल और 2laterally सही मिमी. इन निर्देशांक एक छोटे से कपाल गड़गड़ाहट छेद, एक 1 मिमी ड्रिल बिट के साथ एक चर गति ड्रिल का उपयोग कर.
- जानवर की पूंछ सस्पेंड और 70% इथेनॉल के साथ अपने निचले सतह कीटाणुरहित.
- बीच में रोकना एक बाँझ सुई (जैसे 26 गेज) के साथ केंद्रीय पूंछ धमनी और एक unheparinized केशिका ट्यूब में धमनी रक्त एकत्र.
- रक्त हैमिल्टन सिरिंज के कांच बैरल में केशिका ट्यूब से जल्दी स्थानांतरण, तो सवार डालें.
- अब 30 या धमनी इंजेक्शन पंप पर हैमिल्टन सिरिंज युक्त रक्त की μl अधिक पुनः अनुलग्न और गड़गड़ाहट छेद के माध्यम से सुई (अपनी beveled बढ़त के साथ बाण के समान सीवन का सामना करना पड़) सम्मिलित अभी तक अपनी बेवल अब और नहीं दिख रहा है.
- इस बिंदु अग्रिम से सुई औदरीयता 3 मिमी और 2 μl / मिनट की दर पर ऑटोलॉगस रक्त के 5 μl इंजेक्षन.
- 1 इंजेक्शन अग्रिम सुई 0.7 गहराई में आगे मिमी के पूरा होने के बाद.
- के लिए रुको5 मिनट तो सही striatum में रक्त के 25 μl इंजेक्षन.
- दूसरा इंजेक्शन के पूरा होने पर, यह 1 मिमी / मिनट की दर पर वापस जाने से पहले अतिरिक्त 10 मिनट के लिए स्थिति में सुई छोड़ दें.
- हड्डी मोम के साथ गड़गड़ाहट छेद सील और त्वचा को सिवनी.
- 0.05 पश्चात analgesia लिए buprenorphine मिलीग्राम / किलो subcutaneously इंजेक्षन पूर्व गर्म तरल पदार्थ (सामान्य नमक) में.
3. Collagenase इंजेक्शन मॉडल
- Presurgical तैयारियाँ बाद, दोहराने 1-4 कदम के रूप में रक्त इंजेक्शन मॉडल के लिए वर्णित है.
- हैमिल्टन सिरिंज (10 μl) 0.075U जीवाणु (clostridial) सातवीं-S कोलैजिनेज खारा के 0.5 μl में भंग के साथ भरें. हवा के बुलबुले के गठन से बचें.
- पुनः अनुलग्न इंजेक्शन पंप पर हैमिल्टन सिरिंज और सुई (26 गेज) सम्मिलित, गड़गड़ाहट छेद के माध्यम से अभी तक अपनी बेवल अब और नहीं दिख रहा है.
- मैं सुई 3.7 मिमी औदरीयता अग्रिम और Collagenase के 0.075U इंजेक्षनNto 2 μl / मिनट की दर पर सही स्ट्रिएटम.
- इंजेक्शन के पूरा होने पर, यह 1 मिमी / मिनट की दर पर वापस जाने से पहले अतिरिक्त 10 मिनट के लिए स्थिति में सुई छोड़ दें.
- हड्डी मोम के साथ गड़गड़ाहट छेद सील और त्वचा को सिवनी.
- 0.05 मिलीग्राम / किलो buprenorphine के पूर्व गर्म तरल पदार्थ में पोस्ट ऑपरेटिव इंजेक्षन subcutaneously.
4. शाम ऑपरेशन
- Presurgical तैयारियाँ बाद, दोहराने 1-4 कदम के रूप में रक्त इंजेक्शन मॉडल के लिए वर्णित है.
- सम्मिलित करें सुई (26 गेज) 3.7 मिमी औदरीयता गड़गड़ाहट छेद के माध्यम से. सुई की स्थिति में 10 मिनट के लिए किया जा रहा है 1 मिमी / मिनट की दर पर वापस ले लिया से पहले रहना चाहिए.
- हड्डी मोम के साथ गड़गड़ाहट छेद सील और त्वचा को सिवनी.
- 0.05 मिलीग्राम / किलो buprenorphine के पूर्व गर्म तरल पदार्थ में पोस्ट ऑपरेटिव इंजेक्षन subcutaneously.
5. प्रतिनिधि परिणाम
प्रायोगिक intrastriatal नकसीर morphological उदाहरण भी देते हैंकृन्तकों में के रूप में अच्छी तरह से व्यवहार में बदलाव. इन परिवर्तनों के लिए प्रक्रिया के एक पर्याप्त निष्पादन सुनिश्चित करने के लिए, या संभावित उपचार के प्रभाव की जांच करने के लिए मूल्यांकन किया जा सकता है. एक लक्षित मस्तिष्क क्षेत्र (बेसल गैन्ग्लिया जैसे) में खून बहाना जनरेटिंग सबसे योग्य दृष्टिकोण के लिए आवश्यक है, और सकल या histologically दाग मस्तिष्क वर्गों (1-2 चित्रा) पर सत्यापित किया जा सकता है. ज्ञानेन्द्रिय घाटा, जो विभिन्न व्यवहार आकलन के माध्यम से मात्रा निर्धारित किया जा सकता है में बेसल ganglia परिणाम को चोट. कोने बारी परीक्षण के परिणाम से पता चला है कि प्रयोगात्मक सही तरफा आईसीएच के बाद, चूहों काफी अधिक बार ipsilaterally और दूर बिगड़ा contralateral (बाएं) की ओर से दिया की तुलना में 24 और 72 घंटे में नकली सर्जरी के बाद पशुओं संचालित (3 एक आंकड़ा). इसके अलावा, पर्याप्त रूप से एक सतह पर बिगड़ा forelimb (बाएं) दृढ़रोम उत्तेजना के बाद, जगह करने की क्षमता, forelimb रखने परीक्षण के माध्यम से मूल्यांकन किया गया था. सर्जरी के बाद 24 और 72 घंटा, चूहों, उपसही तरफा आईसीएच को खारिज कर दिया दिखावा संचालित जानवरों की तुलना में काफी कम प्लेसमेंट दिखाया. मस्तिष्क edema के मापन अक्सर प्रयोगात्मक आईसीएच के बाद मस्तिष्क की चोट की हद यों के लिए कार्यरत है. ऑटोलॉगस (30 μl) रक्त या बैक्टीरियल कोलैजिनेज की intracerebral इंजेक्शन (0.075 यू) मस्तिष्क पानी की सामग्री के ipsilateral और 24 में बेसल ganglia प्रांतस्था में एक महत्वपूर्ण वृद्धि (4 एक आंकड़ा) और सर्जरी के बाद 72 घंटे (4 चित्रा बी) नेतृत्व ( दिखावा करने के लिए) की तुलना में. व्यवहार परीक्षण (3 चित्रा) और मस्तिष्क edema (चित्रा 4) की हद तक के परिणाम दिए गए मात्रा में रक्त और कोलैजिनेज इंजेक्शन मॉडल के बीच कोई अंतर नहीं दिखाया.
चित्रा 1. चूहों में मॉडलिंग आईसीएच (ए) योजनाबद्ध एक राज्याभिषेक पर्वबिन्दु मस्तिष्क अनुभाग 0.2 पूर्वकाल मिमी का एक सरलीकृत जनसंपर्क दिखाता है.ऑटोलॉगस रक्त या कोलैजिनेज इंजेक्शन के स्थान oposed. पार्श्व वेंट्रिकल एल.वी. के रूप में चिह्नित है. सीपीयू पूंछवाला पुटामेन, स्ट्रिएटम के एक भाग के लिए खड़ा है, और जीपी ग्लोबस पैलिडस को पहचानती है. दोनों, के रूप में के रूप में अच्छी तरह से ग्लोबस पैलिडस स्ट्रिएटम उप cortical नाभिक, बेसल ganglia के रूप में भी जाना जाता है के एक समूह से संबंधित है. (बी) एक राज्याभिषेक शीर्षस्थान के मस्तिष्क अनुभाग 0.2mm पूर्वकाल, ऑटोलॉगस पूरे रक्त की intrastriatal इंजेक्शन के बाद 24 घंटे में प्राप्त की प्रतिनिधि photomicrograph.
चित्रा 2. रक्तगुल्म के histological अभिव्यक्ति प्रतिनिधि hematoxylin और लाल भामसान रंग (एच एंड ई) एक माउस मस्तिष्क के दाग राज्याभिषेक cryosection (10 मीटर), बैक्टीरियल Collagenase के intrastriatal इंजेक्शन (0.075 यू) के बाद 24 घंटे में रक्तगुल्म आकार illustrating. एलएच = बाएँ गोलार्द्ध, आरएच = दाएँ गोलार्द्ध.
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चित्रा 3. ऑटोलॉगस (30 μl) रक्त या बैक्टीरियल कोलैजिनेज चूहों में प्रयोगात्मक आईसीएच के बाद Neurofunctional आकलन. Intrastriatal इंजेक्शन (0.075 यू) प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य neurofunctional घाटे के कारण होता है. (ए) प्रयोगात्मक आईसीएच के बाद चूहे सर्जरी के बाद 24 और 72 घंटे में दिखावा संचालित जानवरों की तुलना में काफी अधिक सही बदल जाता है दिखाया. आईसीएच के बाद 24 और 72 घंटे में सर्जरी के बाद बाईं अंग के (बी) Forepaw रखने क्षमता ख़राब था. मान मतलब ± SEM के रूप में व्यक्त किया गया है और Kruskal वालिस रैंक पर विचरण का एक रास्ता यह विश्लेषण बाद, विधि छात्र न्यूमैन - Keuls द्वारा के साथ विश्लेषण किया. 0.05 <एपी मूल्य सांख्यिकीय महत्वपूर्ण माना जाता था, n = 6-12 प्रति समूह, * पी <दिखावा की तुलना में 0.05. बड़ा आंकड़ा देखने के लिए यहां क्लिक करें .
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चित्रा 4. मस्तिष्क पानी चूहों में प्रयोगात्मक आईसीएच के बाद सामग्री का मूल्यांकन. ऑटोलॉगस रक्त की intracerebral इंजेक्शन (30 μl) या बैक्टीरिया (0.075 यू) कोलैजिनेज ipsilateral और 24 (ए) में बेसल ganglia प्रांतस्था में मस्तिष्क पानी की सामग्री के महत्वपूर्ण वृद्धि हुई है और 72 घंटा के लिए नेतृत्व (बी) आईसीएच अधिष्ठापन के बाद. मान ± SEM मतलब के रूप में व्यक्त किया गया है और विचरण का एक रास्ता यह विश्लेषण, Tukey पोस्ट हॉक परीक्षण द्वारा पीछा के साथ विश्लेषण किया. 0.05 <एपी मूल्य सांख्यिकीय महत्वपूर्ण माना जाता था, n = 6-10, समूह प्रति * पी <दिखावा की तुलना में 0.05. बड़ा आंकड़ा देखने के लिए यहां क्लिक करें .
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Discussion
Intracerebral नकसीर (आईसीएच) के पशु मॉडल रोग pathophysiology के एक उन्नत समझ के लिए बहुत योगदान है, और आमतौर पर करने के लिए विकसित और एक preclinical सेटिंग में उपन्यास चिकित्सात्मक रणनीतियों का मूल्यांकन करने के लिए प्रयोग किया जाता है. ऑटोलॉगस रक्त या बैक्टीरियल कोलैजिनेज Intraparenchymal इंजेक्शन कृन्तकों में आईसीएच उत्पन्न करने के लिए अच्छी तरह से स्थापित तरीके हैं. दोनों तरीकों शुरू चूहे में विकसित किया गया है, लेकिन, ट्रांसजेनिक और पीटा उपभेदों की तेजी से बढ़ती उपलब्धता के कारण, चूहों के लिए आगे रक्तस्रावी मस्तिष्क 8 चोट के तंत्र को स्पष्ट करने के लिए अपरिहार्य हो गया है.
मनुष्यों में बेसल ganglia नकसीर सभी रक्तस्रावी स्ट्रोक का लगभग 50% के लिए खातों, और प्रारंभिक घटना जीवित रोगियों अक्सर हानिकारक neurofunctional घाटे 1 विकसित. तदनुसार, कृन्तकों में प्रयोगात्मक आईसीएच, बेसल ganglia शामिल पशु contralateral extremities में ज्ञानेन्द्रिय घाटे उदाहरण भी देते हैं. सेतारीख, कई व्यवहार आकलन करने के लिए विकसित किया गया है कि चूहों और चूहों 9,10 में उन impairments विशेषताएँ.
वर्तमान अध्ययन में, हम वर्णित और ऑटोलॉगस पूरे 6 खून की एक संशोधित डबल इंजेक्शन मॉडल के रूप में के रूप में अच्छी तरह से बैक्टीरियल 7 कोलैजिनेज की एक आईसीएच इंजेक्शन मॉडल का मूल्यांकन, दोनों चूहों में बेसल ganglia रेखित पिण्ड को लक्षित है. हम कोने बारी और forelimb 9,11 परीक्षण रखने के माध्यम से व्यवहार घाटे का मूल्यांकन किया और दोनों मॉडलों में सर्जरी के बाद 24 और 72 घंटे (3 चित्रा) में वृद्धि हुई ज्ञानेन्द्रिय impairments मनाया. इन समय अंक आईसीएच समूहों के बीच कोई महत्वपूर्ण अंतर पाया गया है, तथापि, पिछले अध्ययनों कोलैजिनेज इंजेक्शन के बाद एक लंबे समय तक चोट की प्रगति का सुझाव दिया है, यह लंबी अवधि के परिणाम 5 के अध्ययन के लिए एक अधिक उपयुक्त मॉडल बना रही है. मस्तिष्क edema (मस्तिष्क पानी की सामग्री) wet-weight/dry-weight विधि का उपयोग कर के रूप में पहले से सूचना दी 12,13 मापा गया था.हमारे परिणाम में 24 एक perihematomal मस्तिष्क edema में उल्लेखनीय वृद्धि और आईसीएच अधिष्ठापन के बाद 72 घंटे (4 चित्रा) से पता चला. बलिदान के दिन तक (मृत्यु दर = 0%) सभी प्रयोगात्मक आईसीएच या दिखावा सर्जरी अधीन चूहों बच गया.
दो वर्णित आईसीएच मॉडल एक stereotactically की मदद से सर्जरी करने के लिए या तो लक्षित मस्तिष्क क्षेत्र में रक्त कोलैजिनेज की सटीक और प्रतिलिपि प्रस्तुत इंजेक्शन सुनिश्चित रोजगार. इस उद्देश्य के लिए एक छोटा सा craniotomy (1 मिमी गड़गड़ाहट छेद) की जरूरत है. ड्यूरा की ड्रिल बिट द्वारा वेध बचने के लिए आवश्यक है, क्योंकि इस अशुद्धि इंजेक्शन के दौरान चोट और खून या कोलैजिनेज की backflow में परिणाम बढ़ जाएगा.
प्रारंभ में, रक्त इंजेक्शन मॉडल एक एकल intracerebral 14 इंजेक्शन के रूप में विकसित किया गया था, लेकिन यह अक्सर असंगत सुई 15 पथ के साथ खून की backflow के कारण परिणामों का उत्पादन किया. इस जटिलता को कम करने के लिए, एक डबल इंजेक्शन विधि विकसित किया गया था, जिसमें खून की एक छोटी राशि लक्षित मस्तिष्क क्षेत्र के ऊपर सही इंजेक्शन है, बेसल ganglia 6 में रक्त की 2 इंजेक्शन द्वारा पीछा. 1 इंजेक्शन के coagulated रक्त, सुई पथ साथ backflow रोकता है. यह मॉडल एक तेजी से विकसित रक्तगुल्म लुभाती है, लेकिन मस्तिष्क रक्त वाहिकाओं के वास्तविक टूटना प्रेरित नहीं है. ऑटोलॉगस रक्त इंजेक्शन मॉडल का एक बड़ा फायदा यह है कि exogenous प्रोटीन जैसे कारकों, आईसीएच को प्रेरित किया जाता है. वैकल्पिक रूप से, बैक्टीरियल कोलैजिनेज मॉडल एक सहज intracerebral खून बहाना है कि कई घंटे, के रूप में सभी आईसीएच 5 रोगियों के लगभग 30% में प्रदर्शित पर विकसित mimics. बैक्टीरियल कोलैजिनेज एक protease है कि मस्तिष्क capillaries के आसपास कोशिकी मैट्रिक्स lyses और उन्हें कमजोर है, वाहिका टूटना और फलस्वरूप रक्त 16 परिस्त्राव के कारण है. इस मॉडल को आम तौर पर रक्तगुल्म बढ़ने के तंत्र की जांच के रूप में के रूप में अच्छी तरह से की संभावना को विकसित करने के लिए उपयोग किया जाता हैive उपचार है कि homeostasis को प्रभावित. हालांकि, बैक्टीरियल कोलैजिनेज, भड़काऊ प्रतिक्रिया बढ़ाना और उच्च तीन खुराक में neurotoxic प्रभाव मौजूद हो सकता है. मानव विकृति एक ischemic मस्तिष्क चोट आईसीएच के विपरीत इसके अलावा, intracerebral कोलैजिनेज इंजेक्शन के बाद व्यापक bleeds का उत्पादन हो सकता है.
दिलचस्प है, पुरुष 8 जानवरों से औरत प्रयोगात्मक आईसीएच अधीन चूहों एक neurofunctional घाटे के काफी तेजी से वसूली दिखाया. इसी तरह के निष्कर्ष ischemic स्ट्रोक मॉडल में बनाया गया है, इस प्रकार पुरुष कृन्तकों अधिक अधिक स्ट्रोक विकृति और उपचार 17 मूल्यांकन के अध्ययन के लिए लागू कर रहे हैं.
इन प्रयोगों में हम anesthetics (100 मिलीग्राम / किग्रा) ketamine और दोनों मॉडलों के लिए आईसीएच xylazine (10 मिग्रा / किग्रा) के सह इंजेक्शन intraperitoneal का उपयोग किया है, तथापि, पिछले अध्ययनों anesthetized कृन्तकों में तीव्र hyperglycemia की घटनाओं की सूचना दी है, 20 के भीतर शुरू मिनट कश्मीर के बादetamine और xylazine 18 इंजेक्शन. इसके अलावा, एक एन मिथाइल D-aspartate (NMDA) रिसेप्टर प्रतिपक्षी, ketamine, संभवतः NMDA रिसेप्टर निर्भर excitotoxicity को कम करने के लिए, हो सकता है और इसलिए मस्तिष्क की चोट के मॉडल में परिणामों में उन्नति. Isoflurane के रूप में ऐसे अस्थिर anesthetics, वैकल्पिक रूप से preclinical आईसीएच अनुसंधान में उपयोग किया जाता है और इंजेक्शन एजेंटों पर संज्ञाहरण गहराई और कम वसूली के 19 गुना के त्वरित परिवर्तन सहित अद्वितीय फायदे, पकड़. गैस संज्ञाहरण के मुख्य नुकसान विस्तृत उपकरणों की जरूरत है (vaporizer, प्रवाह मीटर, मुखौटा साँस लेने सर्किट) के रूप में के रूप में अच्छी तरह से मानव गैस जोखिम की संभावना है. इसके अलावा, isoflurane 20 चूहों में रक्तस्रावी स्ट्रोक के बाद apoptotic कोशिका मृत्यु को कम करने के लिए सूचित किया गया है. इष्टतम संज्ञाहरण सर्जरी की लंबाई, पशु प्रजातियों या तनाव पर निर्भर करता है, और ब्याज के परिणाम माप पर अनुकूलित किया जा जरूरत है.
हम वर्णित है और दो आईसीएच मॉडल है कि uniqu का प्रदर्शनई शक्तियों और कमजोरियों, जबकि विशिष्ट आईसीएच गुण का प्रतिनिधित्व. प्रत्येक मॉडल प्रतिनिधि विशेषताओं को ध्यान में रखा जाना चाहिए, जब preclinical आईसीएच जांच में प्रयोग किया जाता है.
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Disclosures
ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.
Acknowledgments
इस अध्ययन में आंशिक रूप से झा जांग NIH अनुदान RO1NS053407 द्वारा समर्थित है. हम अपने बहुमूल्य योगदान के लिए श्री Damon Klebe धन्यवाद देना चाहूंगा.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Stereotactic Head Frame | Stoelting Co. | 51600 | |
| Nanomite Syringe Pump | Harvard Apparatus | PY2 70-2217 | |
| Hamilton Syringe | Hamilton Company | 1725RN (250 μl) 1701 RN (10 μl) |
26 Gauge needle for 250 μl and 10 μl syringes. |
| Microdrill | Fine Science Tools | 18000-17 | |
| Microdrill burr | Fine Science Tools | 19007-09 | 0.9 mm diameter |
| Collagenase Type VII-S | Sigma-Aldrich | C2399 | |
| Microhematocrit Capillary Tubes | Fisher Scientific | 22-362-574 | unheparinized |
| Bone Wax | Ethicon | W31 | |
| Suture | Ethicon | 1676G | |
| Ketamine | JHP Pharmaceuticals | 42023-115-10 | Ketalar |
| Xylazine | LLOYD Laboratories | 139-236 | AnaSed |
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