Uma correção foi feita em: Preparação de Culturas Orgânicas de Timo Tratadas com 2-dGuo. Um resumo revisado foi republicado devido a um erro do editor.
542 visualizações
⸱
1 de abril de 2012
Uma correção foi feita em: Preparação de Culturas Orgânicas de Timo Tratadas com 2-dGuo. Um resumo revisado foi republicado devido a um erro do editor.
Uma correção foi feita em: Preparação de Culturas Orgânicas de Timo Tratadas com 2-dGuo. Um resumo revisado foi republicado devido a um erro do editor. O resumo foi corrigido para:
No timo, sabe-se que as interações entre precursores de linfócitos T em desenvolvimento e células estromais, incluindo células epiteliais corticais e medulares, desempenham um papel fundamental no desenvolvimento de um pool de linfócitos T funcionalmente competente. No entanto, a complexidade do desenvolvimento dos linfócitos T no timo in vivo pode limitar a análise de componentes celulares individuais e de estágios específicos do desenvolvimento. Sistemas de cultura in vitro oferecem um meio facilmente acessível para estudar múltiplos processos celulares complexos. Os sistemas de cultura de órgãos timo representam uma abordagem amplamente utilizada para estudar o desenvolvimento intratímico dos linfócitos T sob condições definidas in vitro. Aqui descrevemos um sistema no qual lóbulos timo de embriões de camundongo podem ser esvaziados de elementos hematopoiéticos endógenos por meio de cultura prévia do órgão em 2-desoxiguanosina, um composto que é seletivamente tóxico para células hematopoiéticas. Além de fornecer uma fonte facilmente acessível de células estromais timo para investigar o papel dos microambientes timo no desenvolvimento e seleção dos linfócitos T, esta técnica também fundamenta outras abordagens experimentais, incluindo a reconstituição in vitro de lóbulos timo a linfoides com elementos hematopoiéticos definidos, o transplante de timos a linfoides em camundongos receptores e a formação de culturas de órgãos timo reagregados. (Este artigo baseia-se em trabalho inicialmente relatado em Methods in Molecular Biology 2007, Vol. 380, páginas 185-196).
de
No timo, timócitos imaturos CD4+8+ que expressam genes aleatoriamente rearranjados dos receptores de células T das cadeias α e β passam por eventos de seleção positiva e negativa com base em sua capacidade de reconhecer peptídeos autorreagentivos/moléculas do complexo principal de histocompatibilidade (MHC) expressos por células estromais timicas. A análise in vivo do papel das células estromais timicas durante a seleção intratímica é dificultada pela complexidade celular do microambiente timico no timo adulto em estado estável e pela ausência de estratégias adequadas de direcionamento para manipular a expressão gênica em compartimentos estromais timicos específicos. Demonstramos que o microambiente timico pode ser facilmente manipulado in vitro por meio do uso de culturas de órgãos de timo reagregados, que permitem a preparação de lóbulos timicos tridimensionais a partir de células estromais e linfoides definidas. Embora outros sistemas in vitro suportem alguns aspectos do desenvolvimento de células T, a cultura de órgão de timo reagregado permanece como o único sistema in vitro capaz de suportar eventos eficientes de seleção de timócitos mediados pelas classes I e II do MHC, podendo assim ser utilizado como uma ferramenta eficaz para estudar a regulação celular e molecular da seleção positiva e negativa no timo.
Uma correção foi feita em: Preparação de Culturas Orgânicas de Timo Tratadas com 2-dGuo. Um resumo revisado foi republicado devido a um erro do editor. O resumo foi corrigido para:
No timo, sabe-se que as interações entre precursores de linfócitos T em desenvolvimento e células estromais, incluindo células epiteliais corticais e medulares, desempenham um papel fundamental no desenvolvimento de um pool de linfócitos T funcionalmente competente. No entanto, a complexidade do desenvolvimento de linfócitos T no timo in vivo pode limitar a análise de componentes celulares individuais e de estágios específicos do desenvolvimento. Os sistemas de cultura in vitro oferecem um meio facilmente acessível para estudar múltiplos processos celulares complexos. Os sistemas de cultura de órgãos timicos representam uma abordagem amplamente utilizada para estudar o desenvolvimento intratímico de linfócitos T sob condições definidas in vitro. Aqui descrevemos um sistema no qual lóbulos timicos embrionários de camundongos podem ser esvaziados de elementos hematopoéticos endógenos mediante cultura prévia do órgão em 2-desoxiguanosina, um composto que é seletivamente tóxico para células hematopoéticas. Além de fornecer uma fonte facilmente acessível de células estromais timicas para investigar o papel dos microambientes timicos no desenvolvimento e seleção de linfócitos T, esta técnica também fundamenta outras abordagens experimentais, incluindo a reconstituição in vitro de lóbulos timicos alinfocíticos com elementos hematopoéticos definidos, o transplante de timos alinfocíticos em camundongos receptores e a formação de culturas de órgãos timicos reagregados. (Este artigo baseia-se em trabalho inicialmente relatado em Methods in Molecular Biology 2007, Vol. 380, páginas 185-196).
de
No timo, timócitos imaturos CD4+8+ que expressam genes aleatoriamente rearranjados dos receptores de células T das cadeias α e β passam por eventos de seleção positiva e negativa com base em sua capacidade de reconhecer peptídeos autorreagentivos/moléculas do complexo principal de histocompatibilidade (MHC) expressos por células estromais timicas. A análise in vivo do papel das células estromais timicas durante a seleção intratímica é dificultada pela complexidade celular do microambiente timico no timo adulto em estado estável e pela ausência de estratégias adequadas de direcionamento para manipular a expressão gênica em compartimentos estromais timicos específicos. Demonstramos que o microambiente timico pode ser facilmente manipulado in vitro por meio do uso de culturas de órgãos timicos reagregados, que permitem a preparação de lóbulos timicos tridimensionais a partir de células estromais e linfoides definidas. Embora outros sistemas in vitro suportem alguns aspectos do desenvolvimento de células T, a cultura de órgãos timicos reagregados permanece como o único sistema in vitro capaz de suportar eventos eficientes de seleção de timócitos mediados pelas classes I e II do MHC, podendo assim ser utilizado como uma ferramenta eficaz para estudar a regulação celular e molecular da seleção positiva e negativa no timo.
Nenhum conflito de interesses declarado.