Artigo de método
O pulmão é perfundida, tanto arterial sistémica brônquica e artérias pulmonares. Na maioria das patologias do pulmão, é a mais pequena da vasculatura sistémica que mostra a neovascularização robusto. Cessação do fluxo sangüíneo pulmonar promove a angiogênese brônquica vivo. Nós fornecemos detalhes cirúrgicos de induzir isquemia da artéria pulmonar esquerda que promove neovascularização brônquica.
O pulmão adulto é perfundido por tanto arterial sistémica brônquica e o retorno venoso inteiro que flui através das artérias pulmonares. Na maioria das patologias do pulmão, é a mais pequena da vasculatura sistémica que responde a uma necessidade de perfusão pulmonar melhorada e mostra neovascularização robusto. Isquemia vascular pulmonar induzida pela obstrução da artéria pulmonar demonstrou resultar na angiogénese arterial sistémica rápida no homem, bem como em vários modelos animais. Embora a avaliação histológica do curso de tempo da proliferação artéria bronquial em ratos foi cuidadosamente descrito por Weibel 1, os mecanismos responsáveis para este crescimento organizado de novos vasos não são claras. Fornecemos detalhes cirúrgicos de induzir isquemia da artéria pulmonar esquerda no rato que conduz a neovascularização brônquica. A quantificação da extensão da angiogénese apresenta um desafio adicional, devido à presença dos dois leitos vasculares no interior do pulmão. Métodospara determinar a angiogénese funcional com base em injecções de microesferas marcadas são fornecidos.
Angiogénese sistémica no pulmão é bem reconhecida. Em estados patológicos tais como a asma 2, fibrose pulmonar intersticial, 3, 4 cancro, e o tromboembolismo pulmonar crónica 5, a vasculatura e sistémico em torno das prolifera pulmonares e invade o parênquima pulmonar. No entanto, os modelos animais para estudar esta ativação diferencial da sistêmica e não a circulação pulmonar são poucos. Talvez o modelo mais reprodutível da neovascularização sistémica no pulmão do mamífero adulto é a que ocorre após a indução de isquemia da artéria pulmonar crónica. A resposta à obstrução da artéria pulmonar em humanos 5-7, cães 8, 9....
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Todos os protocolos realizados com ratos foram aprovados pelo Animal Care Universidade Johns Hopkins e do Comitê utilização e de acordo com as diretrizes do NIH. Sempre que possível, o animal deve ser cirurgicamente preparado numa zona separada da zona cirúrgica para minimizar a contaminação do local da cirurgia.
1. Anestesia / analgesia
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Fundido vascular: Resultados dos efeitos da isquemia da artéria pulmonar esquerda no rato são apresentadas na Figura 1. É mostrado um molde de metacrilato da vasculatura brônquica e da vascularização extensa da árvore da via aérea esquerdo 28 dias após LPAL. Para obter esse elenco, a vasculatura sistêmica foi injetado com uma mistura de metacrilato (vermelho), retrógrada para a aorta descendente ea traquéia foi canulada e injetada com um material de silicone branco baseado. Este molde vascular fornece u.......
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Ligação da artéria pulmonar esquerda em todas as espécies testadas conduz a neovascularização sistémica robusta do pulmão isquêmico. Nós apresentamos os detalhes da abordagem cirúrgica num modelo de rato. Nossos resultados produzidos por vazamento vascular, histopatologia e na rotulagem vivo demonstram que artérias brônquicas proliferar e perfundir o parênquima pulmonar. Assim, os mecanismos de angiogénese brônquica pode ser estudado num modelo animal que se assemelha à condição humana de tromboembolis.......
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Não há conflitos de interesse declarados.
Nós reconhecemos o trabalho do Dr. Adlah Sukkar, MD em ajudar com elenco do pulmão. Este trabalho foi financiado pelo NHLBI, HL088005.
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| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Reagentes: | Companhia | ||
| de cloridrato de buprenorfina, Puralube | Butler Schein | ||
| bupivicaine | APP Pharmaceuticals | ||
| Povidona-iodo vareta com tampão | Dynarex Corporação | ||
| polipropileno tamanho sutura 6-0, 3/8 círculo agulha reversa corte | Myco Médica | ||
| PE20 tubulação | Becton Dickinson | ||
| 15 um carmesim fluoroesferas de poliestireno | Invitrogen | ||
| 1 ml Hamilton seringa de vidro | Hamilton Company | ||
| Equipamento: | |||
| Genie bomba de seringa Além | Kent Científico | ||
| Espectrofotômetro de fluorescência | Digilab | ||
| Roedor ventilador modelo 683 | Harvard Apparatus | ||
| Tabela 1. Tabela de reagentes e equipamentos específicos. |
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