Em setembro deste ano, em JoVE, pesquisadores da Escola de Medicina da Universidade Livre de Berlim demonstram um novo método para estudar como os pacientes com AVC compensam os defeitos do campo visual. Para fazer isso, nossos autores fazem uso de um simulador de direção completo com freios, volante e piscas. Usando software de simulação de direção e rastreamento ocular sofisticado, os pesquisadores podem comparar o comportamento do olhar de pacientes com AVC enquanto navegam por cursos de direção virtuais com vários graus de complexidade. Embora o infarto da artéria cerebral posterior possa levar a déficits visuais semelhantes em pacientes, alguns são capazes de navegar pelos cursos de direção desenvolvendo movimentos oculares compensatórios, enquanto outros colidem com obstáculos perigosos, como javalis. Por meio da análise do comportamento compensatório do olhar empregado pelos pacientes, nossos autores veem um grande potencial para usar a simulação de direção como uma ferramenta para reabilitar pacientes com AVC que tentam superar os pontos cegos em seus campos visuais.
Em colaboração com a University of Southern California, pesquisadores do Departamento de Oftalmologia da Oregon Health and Science University apresentam um método para medir o fluxo sanguíneo total na retina usando tomografia de coerência óptica (OCT) Doppler. A retina contém milhões de neurônios que capturam imagens visuais e as convertem em sinais elétricos, que viajam através do nervo óptico até o cérebro. Os vasos sanguíneos entram na retina no disco óptico, onde o nervo óptico se conecta à retina. Esses vasos fornecem oxigênio e nutrientes e também removem resíduos. Em algumas doenças da retina (como retinopatia diabética) ou glaucoma (que afeta o nervo óptico), a vasculatura da retina pode ser anormal. Como essas doenças são as principais causas de perda irreversível da visão, as medições do fluxo sanguíneo da retina podem ser muito úteis na prática clínica e na pesquisa. Ao contrário dos métodos tradicionais de imagem óptica, como Doppler a laser e Doppler colorido por ultrassom, o Doppler a laser OCT pode fornecer medições absolutas do fluxo sanguíneo retiniano; estes são baseados na luz deslocada por Doppler, que é retroespalhada pelos glóbulos vermelhos à medida que fluem pelos vasos. Nossos autores demonstram como escanear a retina e o disco óptico com Doppler OCT; os exames são então classificados e analisados com o software DOCTORC, desenvolvido por nossos autores. Este método mostra boa reprodutibilidade entre classificadores e métodos. Além disso, em olhos com glaucoma, as medições do fluxo sanguíneo retiniano estão altamente correlacionadas com a perda de visão. Assim, o Doppler OCT representa uma ferramenta poderosa que pode ser utilizada na pesquisa oftalmológica e na prática clínica.
Coincidindo com a temporada de mosquitos, pesquisadores do Departamento de Entomologia da Virginia Tech demonstram uma técnica simples e robusta para mapeamento cromossômico de genomas de mosquitos. Dos mais de 40 gêneros de mosquitos contendo milhares de espécies, os pesquisadores estão particularmente interessados nos gêneros Anopheles, Aedes e Culex porque contêm espécies que transmitem doenças humanas prejudiciais. Cerca de 90% do genoma de Anopheles gambia foi mapeado para locais cromossômicos; no entanto, é extremamente difícil preparar spreads cromossômicos adequados para o gênero Aedes ou o gênero Culex usando linhagens celulares e técnicas padrão. Para superar esse problema, nossos autores usam larvas de mosquito de 4º ínstar, que possuem discos imaginários que produzem propagações cromossômicas de alta qualidade. Os pesquisadores mostram como dissecar os discos imaginais e preparar preparações cromossômicas adequadas para hibridização in situ fluorescente (FISH). O mapeamento do genoma é, portanto, possível para mosquitos dos gêneros Aedes, Culex e Anopheles. Essa técnica abriu caminho para os entomologistas fazerem mapas cromossômicos precisos não apenas para mosquitos, mas também para outros insetos.
No Centro de Pesquisa da Universidade de Laval, em Quebec, os pesquisadores demonstram um método para rastrear a migração neuronal no prosencéfalo murino. Um local importante de neurogênese no cérebro dos mamíferos é a zona subventricular, e os neurônios recém-nascidos migram para longe dessa área através do fluxo migratório rostral para o bulbo olfatório. As células são marcadas com um retrovírus injetado estereotaxicamente que codifica uma proteína fluorescente verde; Em seguida, usando uma combinação de preparação de corte agudo, imagem de lapso de tempo e análise de imagem, nossos autores podem calcular a velocidade de migração de neuroblastos marcados. Por meio do rastreamento cuidadoso das trajetórias celulares ao longo dos vasos sanguíneos, esse método pode ajudar a elucidar as diferentes pistas moleculares e mecanismos celulares que influenciam a migração celular.
Este breve resumo destaca apenas alguns artigos de vídeo notáveis que serão lançados em setembro na JoVE. Também apresentamos métodos para rastrear o destino celular em peixe-zebra com proteínas fluorescentes fotoconversíveis, usando micropipetas para testar a rigidez celular e imagens do comportamento de proteínas que respondem a danos no DNA.