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Artigo de método

O Helsinki Rat microcirúrgica Sidewall Aneurysm Modelo

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DOI:

10.3791/51071

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12 de outubro de 2014

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Neste artigo

Resumo

Os aneurismas microcirúrgicos da parede lateral em ratos são criados pela anastomose término-lateral de um enxerto aórtico na aorta abdominal. Apresentamos instruções passo a passo e discutimos detalhes anatômicos e cirúrgicos para a criação bem-sucedida de aneurisma sacular experimental.

Resumo

Modelos de aneurisma sacular experimentais são necessários para testar novas opções e dispositivos de tratamento cirúrgico e endovascular, antes de serem introduzidos na prática clínica. Além disso, os modelos experimentais são necessários para elucidar a biologia aneurisma complexo levando à ruptura de aneurismas saculares.

Vários tipos diferentes de modelos experimentais para os saculares foram estabelecidas em diferentes espécies. Muitos deles, no entanto, exigem habilidades especiais, equipamentos caros, ou ambientes especiais, o que limita a sua utilização generalizada. Um modelo experimental simples, robusto e de baixo custo é necessário, como uma ferramenta normalizada que pode ser usada de uma maneira normalizada em diversas instituições.

O modelo de aneurisma da aorta abdominal lateral rato microcirúrgica combina a possibilidade de estudar duas novas estratégias de tratamento endovascular ea base molecular da biologia aneurisma em um padronizado e baratomaneira. Enxertos normalizado por meio de forma, tamanho e geometria são colhidos a partir da aorta torácica descendente de um rato doador e depois transplantadas para um rato destinatário singénico. Os aneurismas são suturados de ponta a lado com contínuo ou interrompido 9-0 suturas de nylon para a aorta abdominal infra-renal.

Apresentamos instruções processuais passo-a-passo, informações sobre o equipamento necessário, e discutir detalhes anatômicos e cirúrgicos importantes para a criação de microcirurgia sucedido de um aneurisma da aorta abdominal lateral no rato.

Introdução

A ruptura de um aneurisma da artéria cerebral sacular provoca hemorragia ameaçadora da vida levando a acidente vascular cerebral, danos neurológicos permanentes ou morte. A rotura pode ser evitada por qualquer recorte microcirúrgico ou oclusão endovascular de aneurisma. Um tratamento médico para evitar o crescimento de aneurisma e ruptura não foi ainda estabelecida.

Modelos experimentais para os saculares são necessários para estudar a biologia de aneurismas arteriais e para o teste de equipamentos terapêuticos e estratégias. Para estes fins, de vários modelos diferentes em espécies diferentes foram desenvolvidos e publicado em 1.

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Protocolo

NOTA: Masculino ratos Wistar (peso médio: 356 ± 44 g; 10-14 semanas de idade) foram alojados em sala de animal a 22-24 ° C e 12 horas ciclo claro / escuro com livre acesso a pellet dieta, a água da torneira normal e também recebeu atendimento humanizado, em conformidade com as diretrizes institucionais. Os experimentos foram analisados ​​e aprovados pelo Comitê de Bem-Estar Animal da Universidade de Helsinki, na Finlândia.

NOTA: Para o seguinte demonstração nosso método cirúrgico é como se segue: Anestesiar ratos, por injecção subcutânea de adaptação ao peso de cloridrato de medetomidina (0,5 mg / kg) e a injecção intraperitoneal de clori....

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Resultados

Uma série piloto era composto por 14 ratos. Posteriormente, um total de 84 animais foram operados de acordo com o protocolo apresentado em vários projectos de investigação, entre Março e Setembro de 2012. adicionais 29 animais serviram como doadores de enxertos arteriais saculares. Os demais experimentos foram realizados utilizando enxertos pré-tratados colhidas e armazenadas a partir de experiências anteriores com ratos do mesmo sexo, tensão, peso e idade.

O peso corporal, o tempo total de .......

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Discussão

O melhor conhecimento da biologia complexa de aneurisma da artéria cerebral sacular depende da análise de dados epidemiológicos e clínicos, complementado por estudos de laboratório em amostras de pacientes e trabalhos experimentais em modelos animais 3,12,13.

Pequenos animais como o rato está intrinsecamente associado com menores custos de experiências e habitação, e menor necessidade de equipamentos especializados. Um tempo de operação total médio de menos de 60 minutos para a cr.......

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Divulgações

Os autores não têm qualquer interesse financeiro ou comercial em qualquer um dos medicamentos, materiais ou equipamentos utilizados.

Agradecimentos

Os autores são os únicos responsáveis pelo desenho e condução do estudo apresentado. O Dr. Marbacher foi apoiado por uma bolsa da Swiss National Science Foundation (PBSKP3-123454). Os autores declaram não haver conflito de interesses.

As contribuições dos autores para o estudo e preparação do manuscrito incluem o seguinte. Concepção e desenho do estudo: SM, JM, JF. Obtenção de dados: SM, EA, JF. Análise e interpretação dos dados: SM, JF, JM. Redação do artigo: SM, JF, JM. Revisão crítica do artigo: JH, MN. Análise estatística: SM, JF. Orientação do estudo: JF, JH, MN.

....

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
MedetomidinaQualquer genérico
CetaminaQualquer genérico
BuprenorfinaQualquer genérico
Solução salina
Dodecil sulfato de sódio (0,1%)
3-0 sutura reabsorvívelEthicon Inc., USAa name="RANGE! C7">VCP824G
5-0 sutura não absorvívelEthicon Inc., EUA8618G
6-0 sutura de seda não absorvívelB. Braun, AlemanhaC0761060
microssutura de nylon 9-0 B. Braun, AlemanhaG1118471
SpongostanEthicon Inc., EUAMS0002
Microscópio de operaçãoLeica, AlemanhaM651
Câmera de microscópio digitalSony, JapãoSSC-DC58AP
Instrumentos cirúrgicos padrãoB. Braun, AlemanhaVer protocolo1.4
Instrumentos microcirúrgicosB. Braun, AlemanhaVer protocolo1.5
Aplicador de clipe vascularB. Braun, AlemanhaFT495T
Grampos vasculares temporáriosB. Braun, AlemanhaFT250T
Graph Pad Prism software estatísticoGraphPad Software, San Diego, Califórnia, EUAV 6.02 para Windows
tamponada com fosfato<

Referências

  1. Bouzeghrane, F., et al. In vivo experimental intracranial aneurysm models: a systematic review. AJNR Am J Neuroradiol. 31, 418-423 (2010).
  2. Marbacher, S., et al.

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Reimpressões e permissões

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