Um modelo murino de Spinal Cord Injury do colo do útero para o Estudo de pós-lesional respiratória Neuroplasticidade

Resumo

A insuficiência respiratória é a principal causa de morte na sequência de uma lesão medular cervical. Ter um modelo animal pré-clínico reprodutível, quantificáveis ​​e confiável de insuficiência respiratória induzida por uma lesão cervical parcial vai ajudar a entender a neuroplasticidade respiratório e não-respiratório posterior e permite testar estratégias de reparo putativos.

Resumo

A lesão da medula espinhal cervical induz a paralisia permanente, e muitas vezes leva a problemas respiratórios. Até o momento, não houve terapêutica eficientes foram desenvolvidos para melhorar / amenizar a insuficiência respiratória após alta lesão medular cervical (SCI). Aqui propomos um modelo pré-clínico murino de alta SCI na cervical 2 (C2) nível metamérica estudar diversificada neuroplasticidade respiratória pós-lesional. A técnica consiste numa lesão parcial cirúrgica ao nível C2, que irá induzir uma hemiparalisia do diafragma devido a uma deaferentação dos motoneurónios frênicas dos centros respiratórios localizados no tronco cerebral. O lado contralateral da lesão permanece intacta e permite a recuperação dos animais. Ao contrário de outros SIC que afetam a função locomotora (no tórax e nível lombar), a função respiratória não requer motivação animal e à quantificação do déficit / recuperação pode ser realizada facilmente (diafragma e gravação do nervo frênicos, ventilação de todo o corpo). Este modelo pré-clínico C2 SCI é um modelo pré-clínico poderoso, útil e confiável para estudar vários eventos neuroplasticidade respiratórios e não respiratórios em diferentes níveis (molecular) para a fisiologia e para testar diferentes estratégias terapêuticas putativos que possam melhorar a respiração em pacientes com LM.

Introdução

Trauma medular é uma lesão comum observada na população humana com incidências dramáticas, tais como paralisia permanente. No entanto, a gravidade da lesão depende do grau e da extensão do trauma inicial. A insuficiência respiratória é a principal causa de mortalidade após lesão medular cervical superior (SCI) ^1. Atualmente, o único tratamento terapêutico é colocar o paciente sob assistência ventilatória. Desde alguns pacientes podem ser desmamados a assistência ventilatória ^2, devido à recuperação espontânea que ocorre com atraso pós-lesional, a necessidade de desenvolver novas terapias não-invasivas inovadores é urgente ^3. Tendo um ....

Protocolo

Este protocolo foi aprovado pelo comitê de ética da cadeira RBUCE-UP de Excelência (Universidade de Paris Sud, convenção de subvenção n º 246556) e da Université de Versailles Saint-Quentin-en-Yvelines.

1. Preparação de instrumentos cirúrgicos esterilizados

1. Limpe os instrumentos cirúrgicos com detergente de laboratório.
2. Autoclave os instrumentos antes da cirurgia.
3. Numa sessão cirúrgica, esterilizar as ferramentas, colocando as pontas de um esterilizador talão quente durante 10 minutos a 180 ° C entre as duas operações.

2. Preparação de Drogas

1. Prepare 2 x 1 ml ser....

Resultados

Extensão da lesão

O sucesso ea reprodutibilidade deste modelo experimental específico dependem da experiência de cada manipulador / cirurgião. A quantidade subseqüente de recuperação respiratória (atividade do nervo frênico e atividade do diafragma), após uma lesão no C2 está correlacionada com o restante ventrolateral poupado substância branca ^21. Uma vez que a lesão é "handmade" e requer um pouco de prática do cirurgião, a extensão de cada lesão tem de.......

Discussão

Dificuldades técnicas de fazer o ferimento Modelo C2

O modelo murino lesão C2 é uma ferramenta interessante para estudar respiratória neuroplasticidade pós-lesional. No entanto, os passos necessários para produzir um modelo reproduzível e confiável são numerosos e cada um pode ter um impacto sobre o resultado do estudo. Por exemplo, durante o processo de intubação, o maior cuidado deve ser tomado uma vez que o tubo orotraqueal pode produzir uma inflamação da traqueia, que po.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Animal
Macho Sprague Dawley Rat	Janvier		225-250 g
Instrumentos Cirúrgicos
Student Dumont #5 fórceps	Ferramenta de Ciências Finas	91150-20
Estudantes		91100-12
Mayo-Stille Tesoura	Fine Science Tool	14013-15
Curvado Estudante Vannas Spring Scissors	Fine Science	91500-09	Tesoura de
Mola Reta - Lâminas de 8 mm	Fine Science Tool	15025-10	Reta Blunt/Blunt
Friedman Pearson Rongeur	Fine Science Tool	16121-14
Faca de Dissecção Curva - Fine Tip	Fine Science Tool	10055-12	Ferramenta de
Ciência Fina	de Suporte de Agulha Olsen-Hegar	12002-14	Afastador
Weitlaner-Locktite	Ferramenta de Ciência Fina	17012-11	2x3 Suturas cirúrgicas absorvíveis sem corte
	Centravet	BYO001	Tamanho da sutura 4-0
Equipment
Hot Bead Steriliser	Fine Science Cateter Tool	18000-45
	Centravet	CAT188	16 G
Laringoscópio
Fio
Espelho laríngeo	Centravet	MIR011
Ringers com lactato	Centravet	RIN020
Seringa	Centravet
Agulha	Centravet
O2	Air Liquid	I1001M20R2A001
683 Ventilador RodentT 115/230V	Harvard Apparatus	55-0000
Vaporizador autônomo	WPI	EZ-155
Cama aquecida de linha fina	WPI	EZ-211
Recipiente de ar	WPI	EZ-258
Drugs
Carprofeno	Centravet
Rimadyl	Centravet	RIM011
Buprenorfina	Centravet	BUP001
Baytril	Centravet	BAY001
Dexmedetomidina	Centravet	DEX010
Atipamezol	Centravet	ANT201
Solução	de BetadineCentravet	VET002
Isoflurano	Centravet	VET066

Ferramenta de Ciências Finas Padrão para Tool Reta Serrilhado guia