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Artigo de método

Um novo método de Drug Administration para Multiple peixe zebra ( Danio rerio) Ea quantificação da Retirada

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DOI:

10.3791/51851

12 de novembro de 2014

Neste artigo

Resumo

Um novo método para reduzir a variabilidade ao expor peixes a drogas é explicado. Verificou-se que os peixes expostos a vários padrões de exposição ao etanol apresentaram níveis alterados de ansiedade durante a abstinência em um ensaio escototáxico claro/escuro.

Resumo

O teste de ansiedade em peixe-zebra é frequentemente estudado em combinação com a aplicação de substâncias farmacológicas. Nesses estudos, os peixes são rotineiramente capturados e transportados entre aquários domésticos e tanques de dosagem. A fim de aumentar a facilidade de administração do composto, foi desenvolvido um novo método de transferência de peixes entre tanques para administração de medicamentos. Inserções projetadas para desova foram usadas para transferir grupos de peixes para a solução do medicamento, permitindo a dosagem precisa de todos os peixes do grupo. Isso aumenta a precisão e a eficiência da dosagem, o que se torna muito importante em longos esquemas de administração repetida de medicamentos. Implementamos esse procedimento para uso em um estudo que examinou o comportamento do peixe-zebra no teste claro/escuro após a administração de etanol com diferentes esquemas de 21 dias. Nos peixes expostos a quantidades moderadas diárias de álcool, houve uma diferença significativa na preferência de localização após 2 dias de abstinência quando comparado ao grupo controle. No entanto, não foi observada uma diferença significativa na preferência de localização em um grupo exposto à administração semanal de compulsão.

Este protocolo pode ser generalizado para uso com todos os tipos de compostos solúveis em água e pode ser usado em qualquer situação em que o comportamento dos peixes durante ou após longos esquemas de administração de medicamentos esteja sendo examinado. O teste claro/escuro também é um método valioso de avaliar as mudanças induzidas pela abstinência na ansiedade.

Introdução

O peixe-zebra (Danio rerio) é uma pequena espécie de teleósteos originárias da Índia que é um organismo modelo útil para um comportamental e médica 2,3 pesquisa. Peixe-zebra também são vulgarmente usado nos testes de várias substâncias farmacológicas, a fim de caracterizar o seu impacto sobre o comportamento. Vários dosagens e horários de administração de medicamentos têm sido utilizados para investigar o comportamento do peixe-zebra, após a administração de compostos tais como estimulantes 4, 5 e ansiolíticos etanol 6-8.

Nosso laboratório tem investigado os efeitos de diferentes horári....

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Protocolo

Todos os procedimentos e testes comportamentais foram aprovadas pelo Conselho de Ética em Pesquisa Animal da Universidade MacEwan sob o protocolo número 06-11-12, que está em conformidade com o Conselho Canadense para as diretrizes do Animal Care para o cuidado e uso de animais de experimentação.

1. Prepare Tanques Dosagem, soluções e esquema de administração

  1. Preparar um esquema de administração de tal modo que os animais são doseados no mesmo ambiente e durante o mesmo tempo do dia a fim de evitar quaisquer confunde de tempo ou de polarização a estímulos visuais.
  2. Obter o maior número, 1,5 L, tanques de desova de poli....

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Resultados

Para manter a precisão e controlo em estudos farmacológicos com peixe-zebra é importante para o tempo de duração da administração de etanol de forma consistente e com precisão, tal como descrito acima. O nosso procedimento pode aumentar o rendimento e a facilidade do procedimento de dosagem. A administração de etanol no horário ou uma compulsão semanal ou diária moderada resultou em níveis de ansiedade alterados, medidos com o teste de claro / escuro, em comparação aos controles. Quando testados dois dias após a última .......

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Discussão

Estudos anteriores envolvendo a administração da droga no peixe-zebra simplesmente invocada compensação peixes para transportá-los a partir de seu tanque de casa para a solução de drogas 12,16. Rede nem sempre é consistente e frequentemente leva mais tempo do que o esperado, devido à resposta de fuga do peixe-zebra, que tem variabilidade individual significativa. Métodos de transferência tradicionais, embora úteis, pode ser melhorado através da diminuição da quantidade de tempo total dos peixes passar do lado.......

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Divulgações

Os autores reconhecem Joshua Gallup para o uso de seu equipamento de fotografia utilizada para a Figura 1. Este trabalho foi apoiado por um Conselho de Ciências Naturais e Pesquisa de Engenharia (NSERC) Canadá Descoberta de subvenção (para TJH).

Agradecimentos

Os autores não têm nada a divulgar.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Sistema de bancada com três prateleirasfigure-materials-1 Aquatic HabitatsN/A
Tanque de desova de 1,5 L com difusor de 400 μmfigure-materials-2 Aquatic HabitatsN/A
Etanol de grão purofigure-materials-3 Luxco, INCN/A
Software de rastreamento de movimento Ethovision XTfigure-materials-4 Noldus Information Technology
Pipetafigure-materials-5 Eppendorf Canada
Arena Clara/EscuroPersonalizadoConstruir conforme a descrição do procedimento. 9,5 cm de largura, 9,5 cm de profundidade, 55 cm de comprimento.

Referências

  1. Spence, R., Gerlach, G., Lawrence, C., Smith, C. The behaviour and ecology of the zebrafish, Danio rerio. Biological Reviews. 83 (1), 13-34 (2008).
  2. Langheinrich, U. Zebrafish: A new model on the pharmaceutical catwalk. BioEssays. 25 (9), 904-912 (2003).
  3. Santoriell....

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Reimpressões e permissões

Etiquetas

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