Isolamento e excisão de Murino Aorta; A técnica versátil no Estudo de Doenças Cardiovasculares

Summary

A patologia da aorta pode levar a morbidade e mortalidade graves, portanto, a pesquisa da progressão da doença e possíveis terapias é necessária. Aqui, apresentamos um protocolo para isolar e extirpar a aorta murina para auxiliar os pesquisadores na investigação de doenças cardiovasculares.

Abstract

Doença cardiovascular é um termo amplo que descreve doenças do coração e/ou vasos sanguíneos. O principal vaso sanguíneo que fornece sangue oxigenado ao corpo é a aorta. A aorta pode ser afetada em doenças como aterosclerose e aneurisma. Os pesquisadores que investigam essas doenças se beneficiariam da observação direta da aorta para caracterizar a progressão da doença, bem como para avaliar a eficácia de possíveis terapêuticas. O objetivo deste protocolo é descrever o isolamento e a excisão adequados da aorta para auxiliar os investigadores na pesquisa de doenças cardiovasculares. O isolamento e a excisão da aorta permitem que os investigadores observem as alterações morfométricas macroscópicas, além de preservar e corar o tecido para observar as alterações histológicas, se desejado. A aorta pode ser usada para estudos moleculares para avaliar a expressão de proteínas e genes para descobrir alvos de interesse e mecanismos de ação. Essa técnica é superior às modalidades de imagem, pois têm limitações inerentes à tecnologia e ao custo. Além disso, células isoladas primárias de uma aorta recém-isolada e excisada podem permitir que os pesquisadores realizem mais ensaios in situ e in vitro. O isolamento e excisão da aorta tem a limitação de ter que sacrificar o animal, porém, neste caso os benefícios superam os malefícios, pois é a técnica mais versátil no estudo da doença aórtica.

Introduction

A aorta desempenha um papel crucial na função cardiovascular fornecendo o corpo com sangue oxigenado e outros semelhantes para partes do corpo, é susceptível à doença. Doenças da aorta comuns incluem aterosclerose e aneurisma, que são o resultado de fatores genéticos e ambientais, incluindo dieta, tabagismo e sedentarismo ^1. A aterosclerose é a deposição de cálcio e uma placa à base de lípidos para a parede da aorta, tipicamente encontrados em pacientes com hiperlipidemia crónica ^2. Os aneurismas são caracterizadas por degradação de componentes estruturais da aorta e adelgaçamento da parede do vaso, seguido por um aumento do diâmetro que poderia....

Protocol

Todos os procedimentos com animais foram realizados com a aprovação do Cuidado e Uso Comitê da Universidade de Cincinnati animal Institucional e de acordo com o Guia para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório do National Institutes of Health (NIH Publication No. 85-23, revista em 1996).

1. Preparar o mouse

1. Eutanásia por exposição do animal a uma dose supraterapêutica de anestésico, isoflurano inalado para o efeito. Verifique eutanásia principal via toe pitada como um estímulo nocivo. Método secundário da eutanásia, o corte de diafragma, irá ocorrer em uma próxima etapa. Métodos alternativos podem ser concedidos a eutanásia ....

Results

Após a conclusão do processo, haverá uma aorta intacta proveniente do coração, descendo para as cavidades torácica e abdominal, com as artérias renais ainda ligado (Figura 1A). A partir daqui, a aorta pode ser visualizado in situ para quantificar as alterações morfométricas que são de diagnóstico no estudo de aneurismas da aorta abdominal (Figura 1B e 1C). Subsequentemente, a aorta pode ser removidas, fixadas e coradas para olhar para mudanças histológicas. A m.......

Discussion

A doença aórtica pode levar a patologia sistêmica significativa e possivelmente morte em casos graves. As opções de tratamento são atualmente limitadas, portanto, é necessária a continuação da pesquisa na área¹⁰. Os modelos murinos são ideais para estudar mais a progressão da doença e as opções potencialmente terapêuticas⁴. Portanto, a conclusão bem-sucedida do método descrito neste manuscrito fornecerá aos investigadores as ferramentas para medir a progressão da doença e a eficácia do medicamento. .......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Isoflurano	Med-Vet International	#RXISO-250
70% etanol	Fisher	07-678-001
Solução salina tamponada com fosfato	Sigma Aldrich	P5368-10PAK
Fita cirúrgica	3M	1527-1
Gaze estéril	Dukal Corporations	1312
Agulha de calibre	25 BD
seringa de 10 ml	BD	309604