Artigo de método

Uma nova técnica de Análise Quantitativa de perda de cabelo em ratos usando Análise Tons de Cinza

DOI:

10.3791/52185

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9 de março de 2015

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1Pediatric Endocrinology, Children's Hospital at Montefiore

Neste artigo

Resumo

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A alopecia é uma forma comum de queda de cabelo que pode ocorrer em muitas condições diferentes, inclusive como efeito colateral da quimioterapia. Desenvolvemos um método para quantificar a perda de cabelo em camundongos, utilizando um gerador de imagens de gel padrão para realizar uma análise em escala de cinza, para facilitar o estudo de novas terapias promissoras para alopecia.

Resumo

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Alopecia é uma forma comum de perda de cabelo, que pode ocorrer em diversas condições, incluindo a perda de padrão masculino de cabelo, síndrome do ovário policístico, e alopecia areata. Alopecia também pode ocorrer como um efeito secundário da quimioterapia em pacientes com cancro. Neste estudo, o nosso objectivo foi desenvolver um método consistente e fiável para quantificar a perda de cabelo em ratinhos, o que vai permitir aos investigadores comparar e avaliar com precisão a novas abordagens terapêuticas para estas várias formas de alopécia. O método utiliza um gerador de imagens de gel padrão de obtenção e processamento de imagens de ratos, medindo a absorção de luz, o que ocorre em proporção com a quantidade aproximada de cabelo preto (ou cinzento) no rato. Os dados que foram quantificados desta forma podem ser analisados ​​utilizando técnicas estatísticas padrão (ou seja, ANOVA, teste t). Esta metodologia foi testada em modelos de rato de alopecia induzida por quimioterapia, alopécia areata e alopécia de depilação. Neste relatório, o protocolo detalhado é prestura orientada para a execução dessas medidas, incluindo dados de validação de C57BL / 6 e C3H / HeJ cepas de camundongos. Esta nova técnica oferece uma série de vantagens, incluindo a relativa simplicidade de aplicação, a confiança no equipamento que está prontamente disponível na maioria dos laboratórios de pesquisa, e aplicar uma avaliação objectiva, quantitativa que é mais robusto do que avaliações subjetivas. Melhorias na quantificação do crescimento do cabelo em camundongos vai melhorar estudo de modelos de alopecia e facilitar a avaliação de novas terapias promissoras em estudos pré-clínicos.

Introdução

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Alopecia (queda de cabelo) pode ser um evento psicologicamente e emocionalmente estressante com múltiplas causas. Calvície de padrão masculino é a causa mais comum de alopecia, que afecta cerca de dois terços do sexo masculino de 35 anos 1. Um padrão semelhante de perda de cabelo pode ser observado em mulheres com síndrome do ovário policístico. Em ambos estes distúrbios, a perda de cabelo é mediada androgénio. Alopecia também pode ocorrer como uma doença auto-imune, alopecia areata, que afecta 1,7% da população 2. Alopecia pode ocorrer como um efeito colateral de alguns tratamentos médicos, tais como a quimioterapia e 3. Uma elevada ....

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Protocolo

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Declaração de Ética: Todos os estudos que envolvam animais devem ser aprovados pelo IACUC da instituição (para os dados que se segue, os protocolos foram aprovados pela Montefiore IACUC, protocolo nº 11-6-240 e # 13-7-100). Animais são fornecidos anestesia luz, como indicado para o único propósito de mantê-los ainda durante a fotografia, não há procedimentos dolorosos necessários para este protocolo.

1. Aquisição de fotografias

  1. Definir o foco e campo de visão para imager gel usando papel com texto impresso. Verifique uniformidade da fonte de luz em toda a região fotografada. Para ajudar a garantir a uniformidade, usar um gerado....

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Resultados

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Esta técnica foi validado utilizando camundongos C3H / HeJ em vós implantada, a modelo de rato com alopecia areata 16. Estes animais desenvolvem a perda de cabelo global que progride de forma gradual ao longo do tempo. No entanto, a perda de cabelo ocorre em manchas, e pode variar de um rato para o outro, a introdução de uma grande variabilidade e dificulta as avaliações qualitativas. Este modelo proporcionou uma oportunidade para testar as correlações entre as medições de densidade óptica em diferentes locai.......

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Discussão

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Neste relatório, uma descrição detalhada é fornecida de uma nova técnica para quantificar a perda de cabelo em roedores. Esta técnica utiliza um gerador de imagens de gel para aquisição e análise de imagem, o equipamento que está prontamente disponível, na maioria dos laboratórios. As medições foram mostrados para ser robusto para pequenas variações na técnica (Figuras 4-5), e está bem correlacionada com o grau de perda de cabelo visual em modelos de tratamento (Figura 6). Estas técnica.......

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Divulgações

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Os autores não têm nada a divulgar.

Agradecimentos

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Gostaríamos de agradecer ao Hospital Infantil de Montefiore, Departamento de Pediatria, por fornecer apoio a esses estudos. Gostaríamos de agradecer à National Alopecia Areata Foundation por fornecer apoio financeiro para a realização de estudos com camundongos enxertados com C3H/HeJ.

....

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Materiais

figure-materials-1 Imatest Greyscale padrão C57BL / 6J Ratos Jackson Laboratories, Bar Harbor, Maine Ratos para estudo representativo C3H / HeJ camundongo enxertado Jackson Laboratories, Bar Harbor, Maine Ratos para estudo representativo

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Sistema de imagem KODAK Gel Logic 100 EastmanKodak Company, Rochester, NY, EUAGerador de imagens em gel para obtenção e análise de fotografias, deve ter uma fonte de luz integrada para fotografia reflexiva.
A escala de cinza Kodak / Tiffen Q-13

Referências

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  1. McAndrews, P. J. American Hair Loss Association. , http://www.americanhairloss.org/men_hair_loss/introduction.asp (2011).
  2. Safavi, K. H., Muller, S. A., Suman, V. J., Moshell, A. N., Melton, L. J. 3rd Incidence of alopecia areata in Olmsted Count....

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