Com este estudo, apresentamos um modelo de estresse padronizado para a retina bovina superfundido isolado para o futuro teste pré-clínico terapêutico. O efeito de qualquer hipóxia (puro N 2) ou estresse glutamato (250 mM glutamato) em função da retina representado por a- e amplitudes da onda-b foi avaliado.
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Artigo de método
Glutamato e hipóxia como um modelo de estresse para o isolado perfundido Vertebrate Retina
Neste artigo
Resumo
Resumo
Neuroprotection tem sido um forte campo de investigação na investigação oftalmológica nas últimas décadas e afeta doenças como glaucoma, oclusão vascular da retina, descolamento de retina, e retinopatia diabética. Era o objeto deste estudo a introdução de um modelo de estresse padronizado para futuro teste pré-clínico terapêutico.
Retina bovina foram preparadas e perfundido com uma solução saturada de oxigénio padrão, e o ERG foi gravado. Depois de gravar b-ondas estáveis, hipoxia (N 2) puro ou estresse glutamato (250 um glutamato) foi exercida por 45 min. Para investigar os efeitos sobre sozinho função de fotorreceptores, 1 mM aspartato foi adicionada para obter a-ondas. ERG-recuperação foi monitorada por 75 min.
Para hipoxia, uma diminuição na amplitude da onda-um de 87,0% foi observada (p <0,01) após um tempo de exposição de 45 min (36,5% de redução após o final da lavagem p = 0,03). Além disso, um decr inicialfacilidade de amplitudes de ondas de b-87.23% foi registada, que atingiu significado estatístico (p <0,01, diminuição de 25,5% no final da lavagem, p = 0,03).
Para 250 um glutamato, uma redução inicial de 7,8% de um amplitudes de ondas (p> 0,05), seguidas por uma redução de 1,9% (p> 0,05). Uma redução de 83,7% da amplitude da onda b (p <0,01) foi observado; após uma lavagem de 75 min, a redução foi de 2,3% (p = 0,62). Neste estudo, um modelo de tensão é apresentada normalizada que pode ser útil para identificar possíveis efeitos neuroprotectores no futuro.
Introdução
Neuroprotection tem sido um forte campo de investigação na investigação oftalmológica nas últimas décadas. A retina é uma rede neuronal altamente sensível que depende significativamente a oxigenação e é fortemente influenciado pelo metabolismo das suas células vizinhas. As principais patologias oculares relacionadas com a lesão das células nervosas são oclusões vasculares retinianas, glaucoma e descolamento da retina.
A oclusão da artéria retinal, como um exemplo para a oclusão vascular da retina, leva a uma perda súbita de visão devido a hipoxia da retina interna 1. Ela é freqüentemente associada com patologias vasculares gera....
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Protocolo
1. Preparação de Bovinos Olhos
- Obter bovina olhos imediatamente após o abate do animal.
- Transportar os olhos protegidos em "Sickel-solução" uma forma especial, contendo NaCl 120 mM, KCl a 2 mM, 0,1 mM de MgCl2, 0,15 mM de CaCl2, 1,5 mM de NaH 2 PO 4, 13,5 mM de Na 2 HPO 4 e 5 mM de glucose no RT.
- Realizar a preparação da retina em condições adaptadas escuro com uma luz vermelha ofuscante.
- Retire a parte anterior do olho. Executar uma ca. incisão equatorial 4 milímetros posterior ao limbo. Posteriormente remover córnea, íris, corpo ciliar e lente em uma única peç....
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Resultados
Após 1 hora de perfusão dos preparativos da retina com solução padrão saturado de oxigênio (Figura 1A e B) ERG-amplitudes mostrou estabilização e menor variação de amplitudes entre as medidas individuais. pH, pressão osmótica, temperatura, e pO 2 (excepto para o teste de hipóxia) foram mantidas constantes em todos os testes.
Para isolar o sinal a partir do sinal de fotorreceptores da retina interna, aspartato 1 mM foi adicionado para a solução padrão para suprimir a .......
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Discussão
Neste estudo, um impacto significativo na amplitude da onda b após 45 minutos de hipoxia foi encontrado. Esta redução foi ainda significativo após a fase de washout. Um efeito semelhante sobre o potencial de fotorreceptores pode ser observada.
Os resultados são compatíveis com outros dados publicados 16 e nos dão a oportunidade de estudar possíveis efeitos neuroprotetores após hipóxia.
Depois de 45 minutos de exposição de 250 uM de glutamato, conseguim.......
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Divulgações
Os autores não têm nada a divulgar.
Agradecimentos
Este artigo é dedicado à minha amada esposa Maren e ao nosso pequeno Karl.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| 120 mM NaCl | Merck Pharma, Alemanha | 1.064.041.000 | |
| 2 mM KCl, | Merck Pharma, Alemanha | 1.050.010.250 | |
| 0,1 mM MgCl2, | Merck Pharma, Alemanha | 58.330.250 | |
| 0,15 mM CaCl2 | Merck Pharma, Alemanha | 111 TA106282 | |
| 1,5 mM NaH2PO4/13,5 mM Na2HPO4 | Merck Pharma, Alemanha | 1.065.860.500 | |
| 5 mM de glicose | Merck Pharma, Alemanha | 40.741.000 |
Referências
- Varma, D. D., Cugati, S., Lee, A. W., Chen, C. S. A review of central retinal artery occlusion: clinical presentation and management. Eye (Lond). 27, 688-697 (2013).
- Resch, M., Suveges, I., Nemeth, J. Hypertension-related eye disorders). Orv Hetil. 154, 1773-1780 (20....
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Reimpressões e permissões
