Um protocolo de passo-a-passo para a colocação inter-posicional de engenharia de tecidos Vessels (TEVs) na artéria carótida de um carneiro usando anastomose end-to-end e avaliação digital em tempo real, in vivo até o sacrifício animal.
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Artigo de método
Técnica Cirúrgica para a Implantação de engenharia de tecidos enxertos vasculares e Subsequente
Neste artigo
Resumo
Resumo
O desenvolvimento da engenharia de tecidos de vasos (TEVs) é avançada pela capacidade de TEVs habitual e efectivamente implante (4-5 mm de diâmetro) em um modelo animal de grande porte. Um protocolo de passo a passo para colocação inter-posicional da avaliação digital de TEV e em tempo real de TEV e artérias carótidas nativas é descrito aqui. In vivo, a monitorização é tornada possível pela implantação de sondas de fluxo, cateteres de ultra-sons e cristais (capaz de gravar mudanças dinâmicas diâmetro de TEVs implantados e artérias carótidas nativas) no momento da cirurgia. Uma vez implantado, os pesquisadores podem calcular padrões de fluxo sanguíneo arterial, pressão arterial invasiva e diâmetro da artéria rendendo parâmetros como a velocidade da onda de pulso, índice de aumento, pressão de pulso e conformidade. A aquisição de dados é conseguida utilizando um único programa de computador para análise ao longo da duração da experiência. Tais dados inestimável fornece insights sobre TEV remodelação da matriz, a sua resemblanCE para controles nativos / farsa e desempenho geral TEV in vivo.
Introdução
O foco principal para o desenvolvimento de TEVs tem sido fornecer um substituto para a substituição de enxerto autólogo quando os vasos autólogos não estão disponíveis e limitar doador vista morbidade. Por exemplo, o número de cirurgias de revascularização do miocárdio por ano ultrapassou 350 mil nos EUA, e a fonte ideal de enxertos adequados continua a ser a artéria mamária interna esquerda, descendente anterior da artéria coronária e uma veia safena. Uma vez que muitos indivíduos que sofrem de doenças vasculares pode não ter artérias e veias adequadas para a substituição de enxerto autólogo, o desenvolvimento de TEVs tornou-se assim um campo de intensa p....
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Protocolo
NOTA: Este protocolo foi aprovado pelo Comitê de Cuidados e Uso Animal da Universidade Estadual de Nova York em Buffalo.
Preparação 1. Pré-cirúrgica
- Use ovelhas (Dorset cruz, fêmea, cerca de 1-3 anos de idade com um peso de 40-60 kg) para o seguinte estudo. Administrar ciclosporina A (200 mg / dia), aspirina (975 mg / dia), e coumadina (20-30 mg / dia) por via oral, começando 3 dias antes da cirurgia e continuar para a duração de todos os estudos.
- Garantir a ovelha jejuou 12 horas antes da cirurgia (alimentação normal = 1,8 kg de feno e 0,4 kg de grãos).
- Esterilizar todos os materiais cirúrgicos usando um au....
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Resultados
Mais de 30 ovelhas foram submetidas a técnica cirúrgica descrita neste relatório para a implantação de TEVs (no prelo) 9. Uma tabela que resume as operações mais recentes ovelhas após a otimização de protocolo são apresentados na Tabela 2. Todos os animais recuperaram após a implantação TEV sem complicações fatais. Em alguns animais, fibrose foi observada em artéria nativa perto da ponta do cateter arterial. Não foi observado um aumento significativo de inflamação com a presença de instrument.......
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Discussão
O objetivo deste relatório é fornecer um procedimento confiável e reprodutível para TEVs implante de interesse na artéria carótida ovinos. As artérias carótidas nativas dos animais utilizados neste modelo foram 0,5-0,75 mm de espessura e 4,5-5 mm de diâmetro externo. A técnica cirúrgica descrita aqui tem sido bem sucedida para a implantação TEVs de diferentes geometrias de medição 0,25-1 mm de espessura, de 4-5 mm de diâmetro externo e 4 cm de comprimento, com grande sucesso provando eficaz até duração de 3 meses, o pon.......
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Divulgações
Não há divulgações a serem relatadas.
Agradecimentos
Este trabalho foi financiado por doações do Instituto Nacional do Coração e Pulmão (R01 HL086582) e do Fundo de Ciência Stem Cell New York (NYSTEM, Contrato # C024316) para STA e DDS ilustrações utilizadas vídeo JoVE foram preenchidos por John Nyquist; Illustrator Medicina da Universidade Estadual de Nova York em Buffalo.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Transdutor de Pressão | Becton Dickinson | P23XL-1 | Quantidade: 1+ (1 para cada artéria). Usado com cúpulas de diafragma cheias de água. |
| Caixa de amplificador e transdutor | Gould | 5900 Signal Conditioner Cage | Quantidade: 1. Dois transdutores e amplificadores devem ser incluídos no cage. Embora esta unidade específica possa ser descontinuada, outros transdutores de pressão disponíveis comercialmente com uma saída BNC/analógica se comunicarão com o equipamento Sonometrics. |
| Console T403 com módulo de medidor de vazão perivascular TS420 (x2) | Sistemas Transônicos | Módulo T403 e TS420 (x2) | Quantidade: 1. As sondas de fluxo que medem o fluxo através de cada uma das artérias carótidas se conectarão a cada uma das unidades TS420. |
| Unidade de medição ultrassônica digital | Sonometrics | TR-USB | Quantidade: 1 |
| Sonda de Fluxo Precision S-Series 4 mm | Sistemas Transônicos Inc. | MC4PSS-LS-WC100-CM4B-GA | Quantidade: 2 |
| 1 mm Sonometrics Crystals | Sonometrics Systems | 1R-38S-20-NC-SH | Quantidade: 2-4 (2 para cada artéria) |
| Cateter para implantação | BD (Becton Dickinson) | 381447 | Quantidade: 1+ (1 para cada artéria). O cateter é cortado e fixado ao tubo microbore, o stylette é utilizado para inserção. |
| Tubulação Microbore Tygon | Norton Performance Plastics | (AAQ04127) Formulação S-54-HL | Corte no comprimento para um conjunto de extensão |
| Adaptador Luer Stub | BD (Becton Dickinson) | 427564 (20 gauge) | Quantidade: 1+ (1 para cada cateter arterial) |
| Plugue de Injeção Surflo | Terumo | SR-IP2 | Quantidade: 1+ (1 para cada cateter arterial) |
| Meadox | PTFE (Teflon) Felt | 19306 | Corte no tamanho. O feltro de PTFE utilizado em nossos estudos foi descontinuado. No entanto, empresas comparáveis como " Malha cirúrgica" oferecer produtos equivalentes. |
Referências
- Goldman, S., et al. Long-term patency of saphenous vein and left internal mammary artery grafts after coronary artery bypass surgery: Results from a Department of Veterans Affairs Cooperative Study. Journal of the American College of Cardiology. 44, 2149-2156 (2004).
- Achouh, P., et al.
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Reimpressões e permissões
