Este manuscrito descreve um protocolo para examinar o sistema olfativo de roedores. O teste de habituação/deshabituação olfativa permitirá que os investigadores determinem se um camundongo se habitua a um odor apresentado repetidamente e se o camundongo demonstra deshabituação quando apresentado a um novo odor.
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Artigo de método
Testes para Odor Discriminação e habituação em ratos
Neste artigo
Resumo
Resumo
Este vídeo demonstra uma técnica para estabelecer a presença de um sistema olfativo funcionando normalmente em um camundongo. O teste ajuda a determinar se o camundongo pode discriminar entre odores não sociais e odores sociais, se o camundongo se habitua a um odor apresentado repetidamente e se o camundongo demonstra deshabituação quando apresentado a um novo odor. Como muitos testes de comportamento social medem a resposta do animal experimental a um camundongo familiar ou novo, os falsos positivos podem ser evitados estabelecendo que os animais podem detectar e discriminar entre odores sociais. Existem considerações semelhantes em testes de aprendizagem, como o condicionamento do medo, que usa o odor para criar um novo ambiente ou pistas olfativas como estímulo associativo. Déficits no sistema olfativo prejudicariam a capacidade de distinguir entre contextos e formar uma associação com uma sugestão olfativa durante o condicionamento do medo.
No teste de habitação/deshabituação de odores, o camundongo é repetidamente apresentado a vários odores. Cada odor é apresentado três vezes por dois minutos. O investigador registra o tempo de cheiração direcionado ao odor como a medida da capacidade de resposta olfativa. Um camundongo típico mostra uma diminuição na resposta ao odor ao longo de apresentações repetidas (habituação). O experimentador então apresenta um novo odor que provoca um aumento do cheiro em direção ao novo odor (deshabituação). Após repetidas apresentações do novo odor, o animal novamente mostra habituação. Este protocolo envolve a apresentação de água, dois ou mais odores não sociais e dois odores sociais. Além de reduzir os fatores de confusão experimentais, este teste pode fornecer informações sobre a função dos sistemas olfativos de novas linhagens de camundongos knockout, knock-in e knockout condicional.
Introdução
Ratos são dependentes olfato para navegar novos ambientes, encontrar comida, para o reconhecimento de outras pessoas, e comportamento sexual 1-3. É essencial que os investigadores determinar se ou não os animais experimentais têm um sentido de cheiro funcionamento antes de administrar testes comportamentais que envolvem a comida, a interacção social, ou quaisquer odores destinados a induzir uma resposta a partir do ratinho. A anosmia ou a incapacidade de distinguir entre diferentes odores, poderia resultar em falsos positivos ou negativos em uma ampla variedade de paradigmas de comportamento, de modo a capacidade de um rato para detectar e distinguir os od....
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Protocolo
Os ratos machos adultos utilizados na experiência seguinte foram gerados e alojado na Universidade de Baylor a uma temperatura ambiente de 22 ° C, com uma luz de 14 h e 10 h escuro (20:00-06:00 h) ciclo diurno. Os ratos tiveram acesso ad libitum a comida e água. Todos os procedimentos para os ratos estavam em conformidade com os Institutos Nacionais de Saúde Diretrizes para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório eo protocolo animal foi aprovado pela Universidade de Baylor Animal Care e do Comitê Use. Os ratinhos foram testados no final da manhã / tarde. Para todos os procedimentos abaixo o pesquisador deve usar luvas para eliminar odores e evitar a contaminação.
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Resultados
Seguindo o protocolo descrito, os resultados foram registados utilizando dez adultos (dia pós-natal 90-120) ratos machos C57BL / 6J e oito macho estirpe FVB mista-fundo (dia pós-natal 50-70). O teste foi realizado por um único investigador ao longo de vários dias. Cada ponto nos gráficos representa a média de tempo gasto a investigar um odor.
Quando o cotonete embebido em água é introduzido pela primeira vez, os ratos gastar uma grande quantidade de tempo a investigar este romance objeto
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Discussão
Os resultados apresentados neste artigo são ideais para camundongos. Os ratinhos demonstram uma forte resposta a um odor de novo, em seguida, rapidamente habituar. Um dos passos chave no presente método é a preparação dos odores. O investigador deve tomar muito cuidado para isolar os odores um do outro para evitar a contaminação. Outro aspecto importante é a apresentação do cotonete. O investigador precisa solucionar a melhor localização da ponta de algodão para que o rato pode investigar a ponta, mas não rasga na ponta.......
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Divulgações
Os autores não têm nada a divulgar.
Agradecimentos
Este trabalho é apoiado por uma bolsa do Baylor University Research Council e por uma bolsa de pesquisa da Epilepsy Foundation.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Gaiola de rato | Allentown | de rato padrão | |
| Tampa de arame | Allentown | BCU Rato WBL 2500 | |
| Roupa de cama | Harlan | 7090 Sani-Chips | |
| Cotonetes | VWR | 89031-270 | Cabo de madeira de 6" |
| Extrato de banana | McCormick | ||
| Extrato de amêndoa | McCormick | ||
| Fita de laboratório | VWR | 89098-062 | |
| Cronômetro | VWR | 62374-000 | |
| Luvas de nitrilo | VWR | 82026 | |
| Dispositivo de cronometragem | VWR | 61161-350 | |
| Tubos cônicos de 15 ml | VWR | 89003-294 | |
| Copos de 2 L | Pyrex | 1003 | |
| Parafilm | Parafilm | PM-992 | 4" x 250' |
| Frasco de 1 L com tampa | VWR | 89000-240 |
Referências
- Doty, R. L. Odor-guided behavior in mammals. Experientia. 42, 257-271 (1986).
- Restrepo, D., Arellano, J., Oliva, A. M., Schaefer, M. L., Lin, W. Emerging views on the distinct but related roles of the main and accessory olfactory systems in respon....
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Reimpressões e permissões
