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Artigo de método

Demonstração da Wound modelo de pele de rato Isquêmico

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DOI:

10.3791/52637

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1 de abril de 2015

* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

O rato, devido ao seu tamanho, disponibilidade e de comportamento e dócil, tem sido utilizada como um modelo de pesquisa durante muitos anos. O objetivo deste protocolo é para utilizar o rato como modelo isquêmico cura de feridas cutâneas de fornecer informações valiosas sobre a fisiopatologia das feridas crônicas.

Resumo

A propensão para feridas crônicas em humanos aumenta com a idade, condições de doenças como diabetes e função cardiovascular prejudicada e pressão unrelieved devido à imobilidade. Os modelos animais têm sido desenvolvidos que a tentativa para imitar estas condições para o propósito de promover a compreensão da complexidade de feridas crónicas. O modelo aqui descrito é um modelo de rato de isquemia aba de pele que permite uma redução prolongada do fluxo sanguíneo resultando em feridas que se tornam isquémica e se assemelham a um fenótipo ferida crónica (vascularização reduzida, aumento de inflamação e de encerramento de feridas retardada). Ele consiste de um retalho dorsal bipediculado com 2 feridas isquêmicas colocados centralmente e 2 feridas não-isquêmicas lateral à aba como controles. Uma nova adição a este modelo isquémico aba de pele é a colocação de uma folha de silicone sob a aba que funciona como uma barreira e uma tala para prevenir e reduzir a contração revascularização como as feridas cicatrizam. Apesar dodebate de usar ratos para estudos de cicatrização de feridas devido a suas diferenças anatômicas e fisiológicas bastante distintas em comparação com os seres humanos (ou seja, a presença de um músculo panniculus carnosus, curto tempo de vida, aumento do número de folículos pilosos, e sua capacidade de curar as feridas infectadas) as modificações empregadas neste modelo o tornam uma alternativa valiosa para modelos retalhos cutâneos isquêmicos anteriormente desenvolvidos.

Introdução

Desenvolvimento de medicamentos eficazes e outras terapêuticas de cura de feridas requerem adequada em modelos in vivo, apesar dos problemas conhecidos em traduzir achados em modelos animais para terapias humanas 1. O que se segue é uma descrição de um protocolo detalhado para a utilização de um modelo de rato da cicatrização de feridas isquémico para investigar os mecanismos que ainda mais a compreensão da cicatrização de feridas patológico. As espécies de rato, muitas vezes empregadas devido à sua ampla disponibilidade, tamanho e natureza dócil é usado para estudos de cicatrização de feridas, pois é grande o suficiente para fornecer uma....

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Protocolo

NOTA: A aprovação para todos os procedimentos com animais apresentados a seguir foram obtidos a partir da Universidade do Comitê Animal Care do sul da Flórida (IACUC) e cumprir todas as exigências da Lei do Bem-Estar Animal e do Guia para Cuidados e Uso de Animais de Laboratório.

1. Preparação de folhas de silicone e instrumentos cirúrgicos

  1. Tiras pré-cortadas (10,5 cm x 3,0 cm), de não reforçado 0,01 espessura, folhas de silicone de grau médico e esterilizar utilizando uma autoclave.
  2. Limpar e esterilizar instrumentos cirúrgicos adequados (tesouras, pinças e cortinas ou toalhas para criar um campo estéril durante a cir....

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Resultados

O protocolo de rato modelo cura isquêmico ferida deve demorar cerca de 20 min por animal se realizada de forma eficiente. Antes da aplicação de um penso, o modelo deve aparecer como representado na Figura 1G. Será importante verificar que a aba e as feridas bipediculado aí são isquémicos. Tensão de oxigénio subcutânea (PSCO 2) ao nível das feridas foi medido durante a validação deste modelo 5, colocando um eléctrodo polarográfico no tecido subcutâneo entre os dois ferimentos isquém.......

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Discussão

A cicatrização de feridas em ratos tem sido muitas vezes objecto de debate, devido à sua capacidade de curar feridas infectadas e alta taxa de variabilidade interanimal 5. Um dos objetivos originais do modelo durante o seu desenvolvimento foi para diminuir essa variação. Modificações na largura do retalho, reduzindo o número de feridas com posicionamento específico (centrada na aba com localização crânio-caudal consistente) e introdução de uma folha de silicone tem conseguido esse objetivo. Cicatrização.......

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Divulgações

Os autores não têm nada a divulgar.

Agradecimentos

Os autores gostariam de agradecer o apoio financeiro da Universidade do Sul da Flórida, Departamento de Cirurgia (Mack Wu, MD, PhD).

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Folhas de grau médico Sil-TecTechnical Products Inc.500-3não reforçado, 0,01 polegadas de espessura
Mini Iris scissors, 8 cm, curvado, SSWorld Precision Instruments#503671
Suturas de Nylon EthilonEthicon1964Gpreto, tamanho 4.0, PC-3 16  mm agulhas (3/8 círculo)
Laser Doppler ImagerMoor InstrumentsmoorLDI2-IRImager de fluxo sanguíneo padrão: http://us.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8
ImageJNIHdownload gratuitohttp://rsb.info.nih.gov/ij/
MastisolHenry ScheinCat # 7289210Fisher Scientific NC9774929
TegadermMedical Specialties 3M1624WFisher NC9922128 Científica

Referências

  1. Ansell, D. M., Holden, K. A., Hardman, M. J. Animal models of wound repair: Are they cutting it. Experimental dermatology. 21 (8), 581-585 (2012).
  2. Dorsett-Martin, W. A. Rat models of skin wound....

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Reimpressões e permissões

Etiquetas

Cicatrização de Feridas em RatosBarreira de Folha de SiliconeImagem por Doppler a LaserRetalho Pediculado BipediculadoProgressão do Fechamento da FeridaProcessamento HistológicoAnálise MolecularMedição por Fotografia DigitalControle da Dor com Cetoprofeno