Ex Situ Normotérmica máquina de perfusão de fígados doados

Resumo

Aqui apresentamos um protocolo descrevendo ex oxigenado máquina de perfusão in situ de enxertos de doadores de fígado. Este artigo contém um passo a passo protocolo de adquirir e preparar o enxerto de fígado para a máquina de perfusão, preparar o líquido de perfusão, privilegiada a máquina de perfusão e executar oxigenado máquina de perfusão normotérmica do enxerto de fígado.

Resumo

Em contraste com a preservação frio estática convencional (0-4 ° C), à saída da máquina de perfusão in situ pode proporcionar uma melhor preservação dos fígados de doadores. Perfusão contínua de órgãos proporciona a oportunidade para melhorar a qualidade de órgãos e permite a avaliação de viabilidade ex situ de fígados de doadores antes do transplante. Este artigo de vídeo fornece um protocolo passo-a-passo por ex situ máquina de perfusão normotérmica (37 ° C) de fígados de dadores humanos utilizando um dispositivo que fornece uma pressão e temperatura controlada pulsátil de perfusão da artéria hepática e perfusão contínua da veia porta. O fluido de perfusão é oxigenado pelo oxigenador de membrana de fibra duas ocas e a temperatura pode ser regulada entre 10 ° C e 37 ° C. Durante a perfusão, a actividade metabólica do fígado, bem como o grau de lesão pode ser avaliada através de análises bioquímicas de amostras colhidas a partir do fluido de perfusão. Máquina de perfusão é uma ferramenta muito promissorapara aumentar o número de fígados que são adequados para transplantação.

Introdução

O actual método de preservação de órgãos em transplante de fígado é lavar com e posterior armazenamento de fígados de doadores no frio (0-4 ° C) fluido de conservação (como University of Wisconsin solução ou solução de histidina-triptofano-Ketoglutarate). Este método é conhecido como armazenamento a frio estático (SCS). Embora a taxa metabólica de fígado a 0-4 ° C é muito baixo, existe ainda a procura de / min / g de tecido de fígado de 0,27 umol de oxigénio, o que não pode ser fornecida durante ^uma SCS. O método convencional de SCS, portanto, resulta em algum grau de lesão (adicional) de fígados de doadores. Embora este montante do prejuízo preservação nã....

Protocolo

Este protocolo foi aprovado pelo Comitê de Ética Médica (Medisch Ethische Toetsingscommissie) do Centro Médico da Universidade de Groningen, na Holanda.

1. Preparação do líquido de perfusão

Nota: O volume total do fluido de perfusão preparado para perfusão normotérmica máquina de acordo com este protocolo é 2233 ml e a osmolaridade alvo do fluido de perfusão foi de 302 mOsmol / L.

1. A partir dos componentes do fluido de perfusão descrito na Tabela 1, manter as células vermelhas do sangue humano embalado, plasma fresco congelado e albumina humana separada. Misturar o resto dos componen....

Resultados

12 fígados humanos que foram recusados ​​para transplante devido a várias razões, foram utilizados após obtenção do consentimento informado para a investigação de famílias doadoras. Doadores características estão descritas na Tabela 2. Os fígados foram perfundidos doadores humanos normotérmica durante 6 horas, utilizando o protocolo descrito no presente documento. A qualidade dos enxertos de fígado foram avaliados através da monitorização da homogeneidade macroscópica de perfusão do fígado (Figu.......

Discussão

Este vídeo fornece um passo a passo para o protocolo máquina de perfusão normotérmica dos fígados de doadores humanos usando um dispositivo que permite a pressão controlada dupla perfusão através da veia artéria e porta hepática. Ao seguir este protocolo, as falhas técnicas da máquina de perfusão não ocorreu e todos os enxertos foram bem perfundidos e bem oxigenado. Os fígados perfundidos ex situ tinha hemodinamicamente estáveis ​​e foram metabolicamente activo, tal como definido pela produção de bílis ^16,.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Assistência Hepática	Assistência Orgânica	OA. Li.Li.140	Dispositivo de perfusão
Liver Assist pacote descartável	Organ Assist	OA. Li.DP.540	Conjunto descartável e cânulas
Meredith No.8	Vygon Nederlands B.V.	1362082	Cânula do ducto biliar Albumina
humana 200 g/L / ALBUMAN	Sanquin	15522598	100 ml
Nutrição parenteral modificada	Baxter Nederland B.V.	N14G30E	de 7,35 ml
/ CERNEVIT	Baxter International Inc.	9800927	7 μ l
Oligoelementos concentrados para perfusão / NUTRITRACE	B. Braun Melsungen AG	14811332	7,35 ml
Metronidazol 5 mg/ml	Baxter Nederland B.V.	98181882	40 ml
de cefazolina / SERVAZOLIN	Sandoz B.V.	15611337	2 ml
Insulina de ação rápida	vários fornecedores		20 ml
Glubionato de cálcio, solução intravenosa 10%, 137,5 mg/ml	Sandoz	97038695	40 ml
Estéril H2O	Fresenius Kabi Nederland B.V.	98084453	51,3 ml
NaCl 0,9%	Baxter Nederland B.V.	15262510	160 ml
de heparina 5.000 IE/ml para administração intravenosa	LEO Pharma B.V.	98026178	4 ml
de bicarbonato de sódio 8,4%	B. Braun Melsungen AG	97973874	A quantidade depende do pH
Concentrado de glóbulos vermelhos (em SAGM)	Banco de sangue (Sanquin)	N0012000	750 ml
Plasma fresco congelado	Banco de sangue (Sanquin)	N04030A0/N04030B0	900 ml

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