A propagação metastática do câncer é a principal causa de mortes relacionadas ao câncer. Nós fornecemos uma descrição detalhada da nossa metodologia cirurgia sobrevivência para o estabelecimento de um sistema modelo sing�ico rato "paciente-like" orthotopic para o estudo dos mecanismos de metástases em tumores de órgãos sólidos.
É necessária uma assinatura do JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou inicie seu teste gratuito.
Artigo de método
A "Patient-Like" Orthotopic Singênico Rato Modelo de carcinoma hepatocelular Metástase
Neste artigo
Resumo
Resumo
A maioria das mortes relacionadas ao câncer é causada pela metástase do câncer, e não pelo próprio tumor primário. No entanto, os mecanismos subjacentes da metástase do câncer ainda não estão claros. Modelos animais são essenciais para elucidar os mecanismos e avaliar novas estratégias para o tratamento de cânceres metastáticos. Aqui, é fornecida uma descrição detalhada de um modelo de camundongo singênico ortotópico "semelhante ao paciente" para explorar os mecanismos de metástase de tumores de órgãos sólidos. A implantação cirúrgica de sobrevivência de células de carcinoma hepatocelular de camundongo BNL 1ME A.7R.1 diretamente no fígado (o órgão de origem) da linhagem de camundongo de laboratório imunocompetente do tipo selvagem, BALB/c é descrita. O sucesso e a reprodutibilidade dessa metodologia recomendam seu uso generalizado na elucidação dos mecanismos biológicos da metástase do câncer de órgãos sólidos.
Introdução
O carcinoma hepatocelular (CHC) é um dos cânceres mais letais, com prognóstico ruim e baixa expectativa de vida. Quase todas as mortes relacionadas ao câncer são devidas à disseminação metastática da doença do órgão de origem para outros órgãos distantes2-6. A progressão do CHC é um processo complexo. Portanto, ser capaz de modelar o microambiente tumoral que é naturalmente encontrado no CHC metastático em modelos animais pode ser uma maneira bem-sucedida e útil de revelar mecanismos relevantes em humanos. 7Infelizmente, os mecanismos da metástase do câncer ainda não estão claros. Portanto, há necessidade de estabelecer modelos animais que nos pe....
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Protocolo
Declaração de ética
Todos os estudos com animais foram aprovados pelo cuidado e uso Comitê Institucional Animal (IACUC) da Hunter College of The City University of New York.
Nota: Oito ratos BALB / c foram utilizados neste procedimento experimental. Cinco ratinhos BALB / c foram implantados com 5 x 10 6 BNL 1ME A.7R.1 carcinoma hepatocelular células de rato para produzir os tumores primários. Três ratinhos BALB / c sem implantes foram usadas como controlos. BNL A.7R.1 1ME é uma linha celular de carcinoma hepatocelular murino que foi derivada através de transformação química a partir da linha celular de h....
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Resultados
Os fígados de ratos Balb / c foram implantados com 5 x 10 6 BNL 1ME A.7R.1 células rato HCC. Evidência clínica de desenvolvimento HCC foi observado 63 dias pós-cirurgia. Consequentemente, os ratos foram humanamente eutanasiados. A necropsia foi realizada nos ratos sacrificados. Os pulmões eo fígado foram ressecados e um exame cuidadoso bruta foi realizada para identificar tumores macroscópicos. Em um rato, um tumor superficial foi observada sobre a superfície do fígado com alguma ligação à parede abdominal
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Discussão
Neste artigo, uma descrição detalhada do método é dado que foi relatado recentemente por Ogunwobi e colegas de concretizar a criação de um modelo de camundongo singênico orthotopic de HCC metástase (Figura 2) 3. A taxa de absorção de tumores para este procedimento é geralmente elevada. Nós já observamos uma taxa de take tumor de 100% 3. No entanto, a taxa de absorção pode ser variável dependendo da competência do investigador. Em um experimento recente realizado por um novo aluno d.......
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Divulgações
Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes.
Agradecimentos
Gostaríamos de agradecer a Pascal DuBois pela revisão do artigo. Os autores também gostariam de agradecer ao pessoal do Animal Facility do Hunter College da City University of New York. Este trabalho foi apoiado por uma bolsa do NIH RCMI para o Hunter College.
....Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Pinça de Micro Dissecação | Roboz | (RS-5040) | Ponta 0,20 x 0,12 mm |
| Graefe Micro Dissecante Pinça, ponta curva serrilhada | Roboz | (RS-5111) | 1 X 2 dentes, largura da ponta curva 0,6 mm |
| Micro Dissecante Retractor-Agricola (3 por 3 pinos) | Roboz | (RS-6501) | Sem corte 3 X 3 pinos, profundidade 4 mm, spread 25 mm |
| Micro Dissecting Retractor-Goldstein (3 por 3 pinos) | Roboz | (RS-6503) | Sem corte, 3 X 3 pinos, profundidade 4 mm, spread 19 mm |
| Paquímetro Jameson (Mede tumores) | Roboz | (RS-6466) | Escala de 80 mm/3 polegadas, cromado |
| Tesouras de Micro Dissecação, grandes anéis de sissors, lâminas retas e afiadas | Roboz | (RS-5852) | 23 mm, comprimento 4 polegadas, hastes planas e anéis grandes |
| Bisturi com lâminas, para procedimentos delicados de dissecação | Roboz | (RS-9861-36) | |
| Cabo de bisturi | Roboz | (RS-9884) | |
| Solid Littauer Stitch Sissors | Roboz | (RS-7074) | Comprimento 4.5 polegadas |
| Porta-agulha marrom, para fácil amarração de sutura | Roboz | (RS-7960) | Mandíbula convexa, serrilhas finas |
| Reflex 7MM clipes de ferida com reflexo 7 aplicador de clipe | Roboz | (RS-9262) | método alternativo seguro de fechamento de feridas |
| Bandeja de instrumentos e tampa | Roboz | RT-1350S | |
| Mini-clipper com lâmina destacável | Roboz | (RS-5903) | |
| Germinator 500 (o Terminador de Germes) Esterilizador a Seco | Roboz | Ds-400, Ds-401, DS-501 | Para descontaminação rápida de instrumentos de micro-dissecação. Os instrumentos descontaminam em 15 segundos. |
| Agulhas de microinjeção | VWR | BD305125 | 25G Agulha |
Referências
- Sheng, W., et al. Capture, release and culture of circulating tumor cells from pancreatic cancer patients using an enhanced mixing chip. Lab on a Chip. 14, 89-98 (2014).
- Ogunwobi, O. O., Liu, C.
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Reimpressões e permissões
