Um modelo de tenotomia de Aquiles e lesão por queimadura de ossificação heterotópica permite o estudo confiável da formação óssea ectópica induzida por trauma sem a aplicação de fatores exógenos.
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Artigo de método
Direto Rato Trauma / Burn Modelo de ossificação heterotópica
Neste artigo
Resumo
Resumo
A ossificação heterotópica (HO) é a formação de osso fora do esqueleto que se forma após grandes traumas, queimaduras e procedimentos cirúrgicos ortopédicos. A maioria dos modelos animais usados para estudar HO depende da aplicação de substâncias exógenas, como proteína morfogenética óssea (BMP), construções de células exógenas ou mutações genéticas na sinalização de BMP. Embora esses modelos sejam úteis, eles não reproduzem com precisão os estados inflamatórios que causam a maioria dos casos de OH. Aqui descrevemos um modelo de queimadura / tenotomia em camundongos que produz HO focalizado de forma confiável. Este protocolo envolve a criação de uma queimadura de contato de espessura parcial da área total da superfície corporal de 30% na pele dorsal, bem como a divisão do tendão de Aquiles em seu ponto médio. Confiar apenas na lesão traumática para induzir OH em um local previsível permite o estudo temporal da formação óssea heterotópica endocondral apenas a partir de processos fisiológicos intrínsecos e ambiente. Este método pode ser fundamental para a compreensão das vias inflamatórias e osteogênicas envolvidas na OH induzida por trauma. Além disso, como a OH se desenvolve em um local previsível e curso de tempo neste modelo, ela permite que a pesquisa melhore as estratégias de imagem precoce e as modalidades de tratamento para prevenir a formação de OH.
Introdução
A ossificação heterotópica (HO) é a formação de osso ectópico no qual células osteopotentes são aberrantemente induzidas a formar osso endocondral fora do esqueleto. Embora os detalhes da via de formação de HO ainda sejam amplamente desconhecidos, um paradigma aceito inclui três fatores principais: um incidente inflamatório incitante, um nicho permissivo e células-tronco mesenquimais capazes de formar osso. 1-3 HO é uma comorbidade comum que complica mais de 60% das queimaduras graves, 65% das lesões relacionadas ao combate e 10% dos casos de cirurgia ortopédica invasiva. 4,5 No entanto, muitas vezes é difícil prever onde a OH se formará, pois p....
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Protocolo
Declaração de ética: Todos os procedimentos com animais foram realizados em estrita conformidade com as boas práticas de animais, tal como definido nas orientações fornecidas no Guia para uso e cuidado de Animais de Laboratório: Oitava Edição do Instituto de Laboratório de Pesquisa Animal (ILAR de 2011) e foram aprovado pelo Comitê de Cuidado e Uso de Animal Institucional da Universidade de Michigan (PRO0001553).
1. mouse Procedimentos Cirúrgicos
NOTA: Use 8-10 semanas de idade C57BL / 6 ratos. Outras idades, origens e linhagens de camundongos também pode ser usado para testar diferentes condições ou composição ....
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Resultados
No presente estudo, o protocolo é descrito para o modelo de rato previamente publicado de trauma / queimadura induzida HO 14-17. Isto envolve a criação de concomitante lesão musculoesquelética localizada com uma tenotomia Aquiles e insulto inflamatório global, com uma espessura parcial queimaduras. Isto resulta na formação fiável do osso no local reactivo Tenotomia que pode ser seguido com imagens em série. Até à data, todos os ratinhos (mais de 50) que sofreram ambos Aquiles Tenotomia e lesão por queimadura .......
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Discussão
A ossificação heterotópica representa um importante comprometimento funcional enfrentado por pacientes que sofrem traumas, queimaduras e procedimentos musculoesqueléticos invasivos. A população de maior risco são soldados em conflitos modernos com ferimentos graves causados por explosões causadas por mecanismos como dispositivos explosivos improvisados (IED). 18 Armaduras corporais aprimoradas e unidades médicas posicionadas para a frente permitem uma melhor sobrevida de lesões graves nas extremidades. Após.......
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Divulgações
Os autores não têm nada a revelar
Agradecimentos
Agradecemos a Amanda Fair, ao CMI e a Kathy Sweet e ao ORL da UM pela assistência com imagens e análises de μCT. Financiamento: BL Financiado por 1K08GM109105-01 e Prêmio Nacional de Doação da Fundação de Cirurgia Plástica.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Camundongos C57BL / 6 | Jackson Laboratory | 664 | 8-10 semanas de idade |
| Isoflurano – Fluriso | VET one, Boise, ID | V1 501017 | |
| Buprenorfina – Buprenex | Reckitt Benckiser Healthcare | NDC 12496-0757-1 | solução de 0,3 mg/ml |
| Betadine | Owens e Minor, Mechanicsville, VA | 2047PVP202 | |
| 5-0 Suturas Vicryl | Ethicon, Summerville, NJ | J493 | |
| Tegaderm Film, 6 cm x 7 cm | 3M | 1624W | Corte ao meio para cobrir adequadamente o local da queimadura |
| µ CT - GE eXplore Locus SP | GE Healthcare Pre-Clinical Imaging, Londres, ON, Canadá | ||
| Microview 2.2 Aplicação Avançada de Análise Óssea | GE Healthcare Pre-Clinical Imaging, Londres, ON, Canadá |
Referências
- Leblanc, E., et al. BMP-9-induced muscle heterotopic ossification requires changes to the skeletal muscle microenvironment. J Bone Miner Res. 26 (6), 1166-1177 (2011).
- Shore, E. M. Osteoinductive signals and heterotopic ossification. J Bon....
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Reimpressões e permissões
