Cardiac Pressão-Volume Análise loop usando Conductance Cateteres em Ratos

Summary

A análise de loop de pressão-volume cardíaco é a maneira mais abrangente de medir a função cardíaca no coração intacto. Descrevemos uma técnica para realizar e analisar loops de volume da pressão cardíaca, utilizando cateteres de condutância.

Abstract

A análise da alça pressão-volume cardíaco é o "padrão-ouro" na avaliação de medidas dependentes e independentes de carga da função sistólica e diastólica ventricular. As medidas de contratilidade e complacência ventricular são obtidas por meio do exame da resposta cardíaca às alterações na pós-carga e pré-carga. Essas técnicas foram originalmente desenvolvidas há quase três décadas para medir a função cardíaca em grandes mamíferos e humanos. A aplicação dessas análises em pequenos mamíferos, como camundongos, tem sido realizada por meio da otimização de técnicas microcirúrgicas e criação de cateteres de condutância. Os cateteres de condutância permitem estimar o pool de sangue explorando a relação entre a condutância elétrica e o volume. Quando realizadas corretamente, essas técnicas permitem testar a função cardíaca em modelos genéticos de camundongos mutantes ou em estudos de tratamento medicamentoso. A exatidão e a precisão desses estudos dependem de atenção cuidadosa à calibração dos instrumentos, à realização sistemática de medidas hemodinâmicas e à análise dos dados. Revisaremos os métodos de realização de experimentos de loop de pressão-volume usando um cateter de condutância em camundongos.

Introduction

Análise de ciclo de volume pressão cardíaca fornece informações detalhadas da função cardíaca e são o padrão ouro para avaliação funcional ^1. Embora as técnicas de imagem, como a ecocardiografia ou a ressonância magnética cardíaca fornecer medidas funcionais, estas medidas são altamente dependentes de condições de carga. Medidas independentes de Carga, de contratilidade cardíaca e relaxamento requerem medições dinâmicas da pressão ventricular e relação do volume em um intervalo de pré-carga e pós-carga. Esta compreensão da relação pressão-volume decorre do trabalho inovador de Sagawa e colegas ^2,3. Eles demonstraram em ex vivo corações ....

Protocol

1. Preparações Conductance cateter e calibração de pressão

1. Conectar cateter de condutância para o módulo de cateter hemodinâmica. Eletronicamente calibrar as medições de pressão e volume gravando pressão predefinida eo volume ajustado no módulo cateter. Grave um traçado de 0 mm Hg e 25 mm Hg (Figura 1A) e atribuir as voltagens para ambos os traçados de pressão (Figura 1B e 1C). Da mesma forma, gravar um rastreamento volume de 5 RVU e 25 RVU (Figura 1D) e atribuir as voltagens para ambos os traçados unidades (1E e 1F).
2. Confirme a calibração de pressão eletrônico com uma calibração....

Results

Análise de ciclo de pressão-volume pode ser usado para medir a função cardíaca em camundongos geneticamente modificados ^14,15 ou camundongos submetidos a estudos de drogas ^16. Lacetes de volume pressão representativos são fornecidos a partir de trabalhos publicados anteriormente ¹⁶ investigar o efeito de beta-arrestina inclinado AT1R ligando, TRV120023. Para testar se TRV120023 afeta a função cardíaca in vivo, análise do lacete pressão-volume foi realizada em camundongos selvage.......

Discussion

Nós descrevemos um método para perfoming análise do lacete pressão-volume usando um cateter de condutância em camundongos, para derivar análises abrangentes, tanto a contratilidade cardíaca e relaxamento. Suga, Sagawa e seus colegas utilizaram pressão-volume loops para definir medidas de contratilidade cardíaca, especificamente a inclinação da ESPVR, ou a elastância sistólica final _(es E), e _E max. Elastância, definida pela relação de pressão para o volume (P / V), varia ao longo da duração da síst.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
AnaSed (xilazina)	Lloyd Laboratories	NADA no. 139-236	Anestésico
Ketaset (cetamina)	Pfizer	440842	Anestésico
VIP3000	Matrx Medical Inc.		Máquina de anestesia
Ventilador	Harvard Apparatus	Modelo 683	Equipamento cirúrgico
Kit de tubulação	Harvard Apparatus	72-1049	Equipamento cirúrgico
Homeotérmico Cobertor	Kaz Inc.	5628	Equipamento cirúrgico
Microscópio estéreo	Carl Zeiss Optical Inc.	Stemi 2000	Equipamento Cirúrgico
Iluminador	Cole– Parmer	41720	Equipamento Cirúrgico
Dumont no. 55 Fórceps Dumostar	Fine Science Tools Inc	11295-51	Instrumentos Cirúrgicos
Graefe fórceps, curvado	Fine Science Tools Inc	11052-10	Instrumentos Cirúrgicos
Pinça Moria MC31	Fine Science Tools Inc	11370-31	Instrumentos
Cirúrgicos Mayo tesouras	Cirúrgicos	Fine Science Tools Inc	14512-15
Tesouras de íris	Fine Science Tools Inc	14041-10	Instrumentos Cirúrgicos
Halsey porta-agulhas	Fine Science Tools Inc	12501-13	Instrumentos Cirúrgicos
Olsen– Porta-agulhas Hegar	Fine Science Tools Inc	12002-12	Instrumentos Cirúrgicos
Tesoura de mola	Fine Science Tools Inc	15610-08	Instrumentos
Cirúrgicos underpads descartáveis	Kendall/Tyco Healthcare	1038	Suprimentos Cirúrgicos
Esponjas de gaze estéreis, estéreis	Suprimentos Cirúrgicos	Dukal	62208
Aplicadores com ponta de algodão, estéreis	Solon	368	Suprimentos Cirúrgicos
Sutura cirúrgica,  seda, 6-0	DemeTECH	FT-639-1	Suprimentos Cirúrgicos
1 cc Seringas de insulina	Becton Dickenson	329412	Suprimentos Cirúrgicos
Access 9 Válvula de Hemostasia	Merit Medical	MAP111	Equipamento hemodinâmico
Esfigmomanômetro	Bamanômetro	320	Equipamento hemodinâmico
Sistema Millar PV MPVS-300/400 ou MPVS Ultra (inclui cubeta de calibração)	ADInstruments Inc		Equipamento hemodinâmico
1.4F cateter de condutância	ADInstruments Inc	SPR-839	Equipamento hemodinâmico
PowerLab 4/30 com Chart Pro	ADInstruments Inc.	ML866/P	Tosquiadeira para animais de software hemodinâmico
	Wahl	8787-450A
Tubos intradérmicos diversos PE-10 Tubos intradérmicos	diversos 427401		Becton Dickenson
	427411		Diversos
Variedade de agulhas (calibre 18, 25 e 30; Thomas Scientific)
Diversos 0,9% (peso / vol) injeção de cloreto de sódio, USP)	Hospira	NDC no. 0409-4888-50	Diversos
Fita			Diversos
Alconox (Alconox Inc.) para limpeza de cateteres	ADInstruments Inc.		variado