Apresentamos um teste olfativo simples e imparcial em camundongos. Com este protocolo, a discriminação olfativa, a preferência, a evitação e a sensibilidade a um novo odor em comparação com a água podem ser avaliadas em sessões comportamentais únicas. Este método é indicado para um único experimentador e a análise é baseada no processamento de vídeo assistido por computador.
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Artigo de método
Simples e Testes Olfativo para Ratos assistido por computador
Neste artigo
Resumo
Resumo
Olfaction é altamente conservada entre espécies e é necessária para a reprodução e sobrevivência.
Nos seres humanos, olfacto é também um dos sentidos que é afectado com o envelhecimento e é um forte indicador de doenças neurodegenerativas. Assim, o teste de olfacto é utilizado como um método de diagnóstico não invasivo para detectar os défices neurológicos no início. A fim de compreender os mecanismos subjacentes susceptibilidade rede olfativo, a investigação olfativa em roedores ganhou impulso na última década.
Aqui, apresentamos um tempo método muito simples, eficiente e reproduzível teste olfativo de percepção de odor inata e sensibilidade em ratos sem a necessidade de qualquer restrição de alimentos ou água antes. Os testes são realizados em um ambiente familiar para os ratos, requerem apenas os aromas e uma sessão de 2 min de exposição odorante. A análise é realizada, post-hoc, usando comandos assistidas por computador em ImageJ e pode ser, portanto,, Realizado do início ao fim por um pesquisador.
Este protocolo não requer nenhum hardware ou configuração especial e é indicado para qualquer laboratório interessado em testar percepção olfativa e sensibilidade.
Introdução
Olfaction é uma das funções sensoriais e mais desenvolvidos importantes em mamíferos. Qualquer prejuízo na atividade olfativa pode afetar a ingestão de alimentos, comportamento social e, no pior dos casos, até mesmo a sobrevivência. Nos seres humanos, a deterioração olfactiva é dependente 1 idade e é considerado um forte indicador de distúrbios neurológicos 2-6. O teste de identificação olfatória desenvolvido pela Universidade da Pensilvânia atualmente representa um dos testes mais utilizados, não-invasivos e quantificáveis, de diagnóstico, que pode avaliar primeiros déficits neurológicos 7 e prever com elevada probabilidade, a progre....
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Protocolo
Todos os procedimentos com animais estão em conformidade com a directiva comunitária 2010/63 / UE relativa à protecção dos animais utilizados para fins científicos e são aprovados pelo Comitê Animal Care locais (cantão de Fribourg, Suíça).
1. Preparação de animais
- Os animais experimentais
- Realizar experimentos sobre tipo selvagem macho adulto e camundongos transgênicos (C57BL / 6 background) de 3-5 meses de idade. Os três grupos de ratos correspondem a controlos de tipo selvagem da mesma ninhada (grupo A, Jagged1 Flox / Flox 19) e duas linhas de ratinhos KO condicionais (grupo B, e C Jagged1ncKO, Jagged1gcKO....
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Resultados
O teste mede a percepção atração a manteiga de amendoim e evasão de ácido 2-MB. Três grupos de ratinhos são testados e o tempo gasto no "perímetro odor" são quantificadas em relação à água. No teste de preferência, o grupo controlo exibe uma significativa preferência para o odor em comparação com a água (8 t = 2,52, p <0,05). Por outro lado, o grupo B não apresenta qualquer atracção significativa para a manteiga de amendoim e gasta mais tempo com água (6 t = 3,22, p <0,05). Deste mo.......
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Discussão
Os testes propostos neste protocolo permitem avaliar diferentes aspectos do comportamento olfativo inata em camundongos: a percepção de odores, uma discriminação entre os odores contra água e sensibilidade aos odores. Este protocolo pode ser aplicado a qualquer odor de acordo com a preferência e escala evitar mostrado previamente 15. Uma vez que o protocolo baseia-se na actividade exploratória é importante que os ratinhos não exibem qualquer deficiência motora ou ansiedade que podem afectar o seu movimento e .......
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Divulgações
Não há conflito de interesses.
Agradecimentos
Este trabalho é financiado pela Fundação Nacional Suíça (31_138429) e pela Fundação Synapsis para o apoio à pesquisa sobre a doença de Alzheimer.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Gaiola de rato | Italplast (Itália) | 1144B | 36 cm de comprimento x 20,5 cm de largura x 13,5 cm de altura |
| Cama de madeira lascada | Abedd (Áustria) | LTE E-001 | 3 cm de altura |
| Manteiga de amendoim | Migros (Suíça) | NA | 1:10 |
| 2-metilbutírico | Sigma Aldrich (Suíça) | W269514 | Urina feminina pura |
| de fêmeas férteis da mesma linhagem de camundongo | NA | NA | Dilution series |
| Camera | Olympus (EUA) | Camedia C-8080 | Arquivos MOV |
| Quicktime para Java (Windows) | Apple (EUA) | Plugin | de vídeo NA para visualização de arquivos MOV |
| ImageJ para Windows | NIH (EUA) | NA | Processamento/Análise de Vídeo |
Referências
- Doty, R. L., Kamath, V. The influences of age on olfaction: a review. Cognitive Science. 5, 20(2014).
- Mesholam, R. I., Moberg, P. J., Mahr, R. N., Doty, R. L. Olfaction in neurodegenerative disease: a meta-analysis of o....
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Reimpressões e permissões
