Sintonizar um paralelo Coluna Segmentada fluxo e permitindo a detecção multiplexada

Summary

Aqui, apresentamos um protocolo para a operação e ajuste de colunas de cromatografia de fluxo segmentado paralelo para permitir a detecção multiplexada.

Abstract

A tecnologia de fluxo ativo (AFT) é uma nova forma de tecnologia de coluna que foi projetada para superar a heterogeneidade do fluxo para aumentar o desempenho de separação em termos de eficiência e sensibilidade e permitir a detecção multiplexada. Essa forma de AFT usa uma coluna de fluxo segmentado paralelo (PSF). Um encaixe de extremidade de saída de coluna PSF consiste em 2 ou 4 portas, que podem ser multiplexadas para conectar até 4 detectores. A coluna PSF não só permite uma plataforma para detecção multiplexada, mas também a combinação de detectores destrutivos e não destrutivos, sem tubulação de volume morto adicional, simultaneamente. A quantidade de fluxo através de cada porta também pode ser ajustada através do gerenciamento de pressão para atender aos requisitos de um detector específico. Para obter a detecção multiplexada usando uma coluna PSF, há uma série de parâmetros que podem ser controlados para garantir o desempenho ideal da separação e a qualidade dos resultados; ou seja, dimensões do tubo para cada porta, escolha da porta para cada tipo de detector e ajuste de fluxo. Este protocolo destina-se a mostrar como usar e ajustar uma coluna PSF funcionando em um modo multiplexado de detecção.

Introduction

Colunas Fluxo de Tecnologia ativos

Tecnologia de fluxo Ativa (AFT) colunas de cromatografia foram recentemente desenvolvidas para superar a ineficiência nas separações associados a heterogeneidade de fluxo de ^1-6 e também para permitir a detecção multiplexada. Nesse particular detalhe comunicação que o processo operacional do paralelo segmentado coluna de fluxo (PSF), com detecção multiplexada. As vantagens funcionais da coluna PSF são: (1) o fluxo a partir da região central radial do leito da coluna é isolado a partir da região periférica ou parede de fluxo, (2) o volume de fase móvel que devem ser processados....

Protocol

Nota: Este protocolo contém instruções sobre como usar uma coluna de PSF em um sistema de HPLC associada a múltiplos detectores para detecção multiplexada. O protocolo foi escrito assumindo que o leitor tenha conhecimentos básicos e experiência em cromatografia e vários métodos de detecção de HPLC.

Atenção: Por favor, consulte as fichas de dados de segurança de material (MSDS) para todos os materiais e reagentes antes do uso (ou seja, MSDS para metanol). Garantir a utilização de todas as práticas de segurança adequadas ao manusear solventes e High Performance Liquid Chromatography (HPLC) eluente. Assegurar o uso apropriado de con....

Results

Uma análise por HPLC multiplexada foi realizada utilizando uma coluna de TFA no modo de PSF (Figura 1) e configurado como ilustrado na Figura 2. Este tipo de configuração permitiu uma amostra de café para ser analisada simultaneamente usando UV-Vis, de DPPH ^• e MS No total Contagem Ion modo (TIC). Os compostos da amostra de café que responderam ao DPPH ^• poderia, então, ser facilmente compensada aos UV-Vis e MS - respostas de TIC com base no alinha.......

Discussion

Este estudo envolve a caracterização e definição de perfis de café utilizando HPLC com detecção multiplexada empregando uma coluna paralela fluxo segmentado (PSF). Multiplexada HPLC utilizando colunas PSF permite a caracterização e identificação de entidades químicas chave reduzindo a complexidade de dados da amostra, enquanto a obtenção de um maior grau de informações específicas da molécula dentro de uma fracção do tempo que leva a utilização de processos de detecção de múltiplos convencionais. A coluna PSF não só per.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Instrumento			HPLC Vários detectores de escolha para detecção multiplexada. Os detectores de escolha podem exigir instrumentação adicional, por exemplo, bomba.
Coluna de HPLC de fluxo segmentado paralelo	Thermo Fisher Scientific	Não definido	Em breve a ser comercializado
Metanol	Qualquer marca		Tubo de HPLC de grau
PEEK	Qualquer marca		Vários comprimentos e identificação
Rolhas de coluna	Qualquer marca		Para bloquear portas periféricas não utilizadas.
Cortador de tubos PEEK	Qualquer marca
Balança Analítica Balança	Qualquer marca
Cronômetro	Qualquer marca
			Frascos de amostra de 1-2 ml podem ser usados como recipientes de coleta de eluente