dependente da salinidade toxicidade Ensaio de prata nanocolóides Usando Medaka Eggs

Chisato Kataoka; Shosaku Kashiwada

doi:10.3791/53550

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Artigo de método

dependente da salinidade toxicidade Ensaio de prata nanocolóides Usando Medaka Eggs

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DOI:

10.3791/53550

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18 de março de 2016

Chisato Kataoka¹^,² , Shosaku Kashiwada¹^,²

¹Graduate School of Life Sciences, Toyo University, ²Research Center for Life and Environmental Sciences, Toyo University

Neste artigo

Resumo

Os estágios embrionários são os mais suscetíveis aos xenobióticos. Embora a toxicidade química dependa da salinidade, não existe nenhum método para testar a dependência da salinidade da toxicidade para organismos aquáticos. Aqui, descrevemos um método novo e de alto rendimento para determinar a dependência da salinidade da toxicidade para embriões aquáticos.

Resumo

A salinidade constitui uma característica importante do ambiente aquático. Para os organismos aquáticos que define os habitats de água doce, água salobra e água do mar. Os testes de toxicidade dos produtos químicos e avaliações de seus riscos ecológicos para os organismos aquáticos são freqüentemente realizada em água doce, mas a toxicidade dos produtos químicos para os organismos aquáticos depende do pH, temperatura e salinidade. Não existe um método, no entanto, para testar a dependência salinidade de toxicidade para os organismos aquáticos. Aqui, usamos medaka (Oryzias latipes), porque eles podem se adaptar à água doce, água salobra e água do mar. Diferentes concentrações do meio de criação de embriões (ERM) (1x, 5x, 10x, 15x, 20x e 30x) foram empregadas para testar a toxicidade de partículas nanocolloidal prata (SNCs) para Medaka ovos (ERM 1x e 30x ERM têm pressões osmóticas equivalentes à água doce e água do mar, respectivamente). Em placas de seis poços de plástico, de 15 ovos medaka, em triplicado, foram expostas a SNCs a 10 mg / L ^&# 8722; 1 em diferentes concentrações de MTC a pH 7 e 25 ° C no escuro.

Foi utilizado um microscópio de dissecação e um micrômetro para medir a frequência cardíaca por 15 seg e olho de diâmetro no dia 6 e comprimento do corpo cheio de larvas em incubação dia (secção 4). Os embriões foram observados até a eclosão ou dia 14; Em seguida, contou a taxa de eclosão todos os dias, durante 14 dias (Seção 4). Para ver a acumulação de prata em embriões, que usamos em espectrometria de massa com plasma para medir a concentração de prata de soluções de teste (seção 5) e embriões dechorionated (secção 6) .A toxicidade dos SNCs para embriões medaka, obviamente, aumentou com o aumento da salinidade. Este novo método permite-nos testar a toxicidade dos produtos químicos em diferentes salinidades.

Introdução

Desde a criação da Organização para a Cooperação e as diretrizes de teste Desenvolvimento Económico (OCDE) para produtos químicos de teste em 1979, 38 guias do teste foram publicados na Seção 2 das orientações, efeitos sobre os sistemas bióticos ^1. Todos os organismos aquáticos testados ter sido de habitats de água doce, ou seja, plantas de água doce; algas; invertebrados, como dáfnias e quironomídeos; e peixes, como medaka, peixe-zebra, e truta arco-íris. Em comparação com ambientes de água salgada, ambientes de água doce estão mais directamente afectados pelas actividades económicas e industriais humanos. Portanto, ambientes de água doce foram priorizado....