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Artigo de método

Medição do volume Pressão Loops no mouse

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DOI:

10.3791/53810

2 de maio de 2016

Neste artigo

Resumo

Este manuscrito descreve um protocolo detalhado para a recolha de dados de pressão-volume do mouse.

Resumo

Compreender as causas e progressão da doença cardíaca apresenta um desafio significativo para a comunidade biomédica. A flexibilidade genética do mouse oferece um grande potencial para explorar a função cardíaca no nível molecular. O tamanho reduzido do rato apresenta alguns desafios no que diz respeito à realização de fenotipagem cardíaco detalhado. Miniaturização e outros avanços na tecnologia fizeram muitos métodos de avaliação cardíaca possível no mouse. Destes, a coleta simultânea de dados de pressão e volume fornece uma imagem detalhada da função cardíaca que não está disponível através de qualquer outra modalidade. Aqui, um procedimento detalhado para a recolha de dados de loop pressão-volume é descrito. Incluído é uma discussão sobre os princípios subjacentes às medições e as potenciais fontes de erro. manejo anestésico e abordagens cirúrgicas são discutidos em grande detalhe como ambos são cruciais para a obtenção de medida hemodinâmica de alta qualidades. Os princípios do desenvolvimento protocolo de hemodinâmica e aspectos relevantes da análise dos dados também são abordados.

Introdução

A doença cardiovascular continua a ser uma causa significativa de morbilidade e mortalidade em todo o mundo 1. Doenças do coração apresentar desafios particularmente difíceis no desenvolvimento de novas terapias. Os avanços no campo da genética para proporcionar a possibilidade de identificar uma grande variedade de potenciais contribuintes genética para o desenvolvimento de doença cardíaca. A natureza integradora do sistema cardiovascular exige que esses alvos genéticos ser validados em modelos animais intactos. Os custos de flexibilidade e baixa habitação genéticas do rato tê-lo trazido para o primeiro plano para a avaliação do papel fisiológico de um de....

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Protocolo

Antes de realizar qualquer um dos procedimentos descritos neste protocolo, obter a aprovação pelo comité de cuidados com os animais e uso institucional local.

1. Configurando o Rig Experimental

Nota: O procedimento é realizado em animais anestesiados e a qualidade dos dados é proporcional à qualidade do suporte oferecido anestésico para o animal. Este primeiro detalhe secção vontade o equipamento e os procedimentos necessários para fornecer a anestesia para o mouse durante a execução deste protocolo.

  1. Selecione um protocolo anestésico. anestésicos inaláveis ​​têm muitas propriedades ....

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Resultados

Por convenção, o volume é representada graficamente no eixo X e a pressão sobre o eixo dos Y como na Figura 1. As malhas de pressão-volume decorrentes traçando pressão contra o volume deve assemelhar a um rectângulo, os bordos verticais que representam as alterações isovolumétrica de pressão (isto é, quando ambos valvas mitral e aórtica estão fechados). A horizontal inferior representa enchimento ventricular através da válvula mitral e a parte horizontal superio.......

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Discussão

Existem três passos críticos neste processo: 1) a colocação do tubo endotraqueal e ventilação adequado, 2) a colocação do cateter IV jugular, e 3) a colocação correcta do cateter PV no ventrículo esquerdo. Determinação da taxa respiratória apropriada é uma parte importante do fornecimento de suporte ventilatório. ratinhos conscientes geralmente manter a ventilação alveolar com respirações superficiais rápidas. Em geral, os ratinhos ventilados terá volumes correntes muito maiores. Assim, é necessária uma taxa mais lenta .......

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Divulgações

O autor não tem nada a divulgar.

Agradecimentos

O autor gostaria de reconhecer financiamento do NHLBI (K08 HL102066 e R01 HL114832).

....

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Dumont 5/45 (2)Ferramentas de Ciências Finas11251-33
Fórceps de Dilatação de VasosFerramentas de Ciências Finas18153-11
Tesoura de Mola Micro de Dissecação CastroviejoRoboz InstrumentsRS-5668
Fórceps Octogon - Serrilhado/CurvoFerramentas de Ciências Finas11041-08
Fórceps Octógono - Serrilhado/RetoFino Ferramentas de Ciência11040-08
Tesoura Dissector - Lâmina PesadaFerramentas de Ciência Fina14082-09
Transpore Fita Cirúrgica3M1527-1
3-0 Sutura de SedaFerramentas de Ciência Fina18020-30
TOPO VentiladorKent ScientificTOPO
Martin ME 102 Unidade EletrocirúrgicaHarvard AparelhoPY2 72-2484
Bomba de SeringaGenieTouchLucca Technologies
com suporte de lançaTermômetro deSMZ-800N
Cole ParmerEW-91100-40
T / Bomba Recirculador de Água QuenteKent ScientificTP-700
ADVantage Sistema de Pressão-VolumeTransônicoADV500
Aquisição e Análise de DadosDSIPonemah ACQ-16
Estereomicroscópio da termopar Nikon

Referências

  1. Mozaffarian, D., et al. Heart disease and stroke statistics--2015 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 131 (4), e29-e322 (2015).
  2. Katz, A. M. Influence of altered inotropy and lusitropy on ventricula....

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Reimpressões e permissões

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