Este manuscrito descreve os protocolos de próstata micro-dissecção e castração cirúrgica no rato de laboratório. Nós também retratam resultados representativos produzidos por estes protocolos. Finalmente, discutimos as vantagens e utilização desses protocolos.
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Artigo de método
Murino próstata Micro-dissecção e castração cirúrgica
Neste artigo
Resumo
Resumo
Modelos de camundongos são usados extensivamente para estudar o câncer de próstata e outras doenças. O camundongo é um excelente modelo para estudar a próstata e tem sido usado como substituto para descobertas no desenvolvimento e doenças da próstata humana. A microdissecção da próstata permite o estudo consistente da anatomia, histologia e características celulares da próstata específicas do lobo na ausência de contaminação de outros tecidos. A testosterona afeta o desenvolvimento e a doença da próstata. A terapia de privação androgênica é um tratamento comum para pacientes com câncer de próstata, mas muitos tumores de próstata se tornam resistentes à castração. A castração cirúrgica de modelos de camundongos permite o estudo da resistência à castração e outras facetas da biologia hormonal na próstata. Este procedimento pode ser acoplado à reintrodução de testosterona, ou regeneração hormonal da próstata, um método poderoso para estudar linhagens de células-tronco na próstata. Juntas, a microdissecção da próstata e a castração cirúrgica abrem uma infinidade de oportunidades para pesquisas robustas e consistentes sobre o desenvolvimento e a doença da próstata. Este manuscrito descreve os protocolos para microdissecção da próstata e castração cirúrgica em camundongos de laboratório.
Introdução
A próstata é o local mais comum de câncer em homens em os EUA. Cerca de 220.000 homens cada ano serão diagnosticados com câncer de próstata, e aproximadamente 27.000 homens vai sucumbir à sua doença 1. Os homens têm um risco de 1 em 7 vida de um diagnóstico de câncer de próstata em os EUA 1. Hiperplasia benigna da próstata (HBP), uma ampliação não canceroso relacionada com a idade da próstata, é também uma condição generalizada, afectando mais de 80% dos homens com mais de 80 2. Como tal, a próstata é o foco de consideráveis pesquisas.
Modelos de ratos têm sido amplamente utilizados para estudar doenças ....
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Protocolo
Este protocolo cumpre e segue as diretrizes estabelecidas pelo Comitê Animal Care Institucional e Use da Universidade Johns Hopkins.
1. Micro-dissecando um rato próstata
- Euthanize o mouse por asfixia com dióxido de carbono ou por um método alternativo aprovado em conformidade com as orientações de cuidados de animais e uso institucional.
- Pin o rato em decúbito dorsal para um quadro de dissecção, colocando um pino através de cada uma das quatro patas.
- Pulverizar o abdômen com etanol 70%.
- Segure a pele do abdómen inferior com uma pinça, e usar uma tesoura para cortar através da pele e peritônio aproximadamente 1 cm anter....
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Resultados
Todos os seis lóbulos da próstata foram removidos a partir de um rato através de micro-dissecção de próstata (Figura 1). O tracto urogenital completo (UGT) é constituído por todos os lóbulos da próstata, da bexiga, vesícula seminal, e da uretra (Figura 1A). Os canais deferentes atribui à uretra, mas é desnecessário para próstata micro-dissecação, e pode, portanto, ser separado antes da remoção da UGT cortando a uretra (Figura 1b-1c). O t.......
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Discussão
Próstata de micro-dissecção de experimentação específica permite-lobo e análise da próstata de ratinho (Figura 1). Em modelos de rato geneticamente modificadas, fenótipos podem ser vistos em um lóbulo que não é observada em outros. Além disso, para análise histológica, este protocolo garante que a quantidade máxima de tecido da próstata puro pode ser seccionados e corados, sem outros tecidos do tracto urogenital presente na secção. Finalmente, para experiências de uma única célula, este protocolo permit.......
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Divulgações
Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes.
Agradecimentos
Algumas das figuras neste manuscrito foram generosamente fornecidos pelo laboratório de Bart O. Williams. Os autores são suportados pelo Instituto Nacional do Câncer concede U54CA143803, CA163124, CA093900, CA143055 E.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Ferramentas cirúrgicas | Roboz | Various | |
| Formaldeído | Sigma | F8775 | |
| OCT medium | VWR | 25608-930 | Deve ser colocado em gelo seco para congelar e armazenado a -80 ° C |
| PBS | Life Technologies | 10010 | |
| Isoflurano | Johns Hopkins | Também disponível de fornecedores online | |
| Caneta Cautery | Medline | ESCT002 | |
| Sutura de seda | AD Surgical | M-S330R19 | |
| Clipes de ferida cirúrgica | Roboz | RS-9265 |
Referências
- Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. Cancer statistics. CA Cancer J Clin. 65 (1), 5-29 (2015).
- Roehrborn, C. G. Pathology of benign prostatic hyperplasia. Int J Impot Res. 20 (suppl 3), 11-18 (2008).
- Valkenburg, K. C., Williams, B. O.
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Reimpressões e permissões
