O objetivo deste protocolo é avaliar a pressão arterial sistêmica em camundongos conscientes em movimento livre usando dispositivos de radiotelemetria implantáveis.
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Artigo de método
Longo prazo medição de pressão arterial em ratos movimentando-se livremente utilizar telemetria
Neste artigo
Resumo
Resumo
Durante o desenvolvimento de novos agentes vasoativos, monitorização da pressão sanguínea arterial é crucial para avaliar a eficácia dos novos medicamentos propostos. De fato, a pesquisa com foco na descoberta de novos alvos terapêuticos potenciais usando ratos geneticamente modificados exige uma avaliação fiável e de longo prazo da variação da pressão arterial sistêmica. Atualmente, o padrão ouro para a obtenção de medidas de longo prazo da pressão arterial em ratos ambulatoriais utiliza rádio-transmissores implantáveis, que exigem canulação da artéria. Esta técnica elimina a necessidade de tethering, restringindo ou anestesiar os animais que introduzem o stress e artefatos durante a amostragem de dados. No entanto, a monitorização da pressão arterial em ratos através de cateterismo pode ser bastante desafiador, devido ao pequeno tamanho das artérias. Aqui nós apresentamos um guia passo-a-passo para ilustrar as passagens-chave cruciais para a implantação subcutânea bem sucedida de rádio-transmissores e artéria carótida cannulation em ratinhos. Nós também incluímos exemplos de atividade pressão arterial a longo prazo retiradas de ratos movimentando-se livremente após um período de recuperação pós-cirurgia. Após este procedimento permitirá gravações de pressão arterial direta de confiança de vários animais ao mesmo tempo.
Introdução
A hipertensão arterial é um dos principais fatores de risco para doenças cardiovasculares, sem dúvida, é um grande problema de saúde pública tanto nos países desenvolvidos e em desenvolvimento 1. Vários modelos animais de hipertensão experimentais têm sido desenvolvidos para imitar respostas hipertensivas, como as observadas em humanos 2. Entre outros, o mouse ambulatório representa um excelente modelo para o estudo da gênese e progressão da hipertensão permitindo a análise in vivo das consequências da exposição crônica à hipertensão.
Pressão arterial (PA) de monitoramento em camundongos tem ajudado....
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Protocolo
declaração de ética: Todos os procedimentos com animais mencionados neste vídeo-artigo foram revistos e aprovados pela Comissão de animal Cuidado e Uso (IACUC) da Universidade de Tennessee Health Science Center.
Nota: Utilize instrumentos de microcirurgia estéreis durante todo o procedimento cirúrgico. Os instrumentos cirúrgicos podem ser esterilizadas utilizando um esterilizador de infravermelhos a uma temperatura de esterilização óptima de 1500 ° F (815,6 ° C). Telémetros pode ser reutilizado, no entanto, antes de o introduzir no animal certificar-se para esterilizar todo o transmissor de acordo com as instruções do fabricante e que a ponta do cateter foi novamente cheio com um....
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Resultados
Os dados podem ser adquiridos à distância através de um receptor; traços são visualizados na tela do computador para controle de qualidade (Figura 1a). Detalhes como ID animal, pressão diastólica e pressão arterial sistólica também são mostrados (Figura 1b). Arterial BP podem ser gravadas continuamente (24/7), ou por curtos intervalos programados (ou seja, 60 seg aquisição a cada hora). Os dados podem ser automaticamente armazenada num disco ríg.......
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Discussão
Implantável radio-telemetria tem melhorado significativamente ao longo da última década; o tamanho da sonda menor faz o implante menos traumática para o animal, a vida da bateria prolongada ajuda a reduzir os custos e frequências Telemeter independentes eliminar crosstalk entre receptores. Telemetria é considerado o método state-of-the-art para a recolha de uma grande variedade de parâmetros fisiológicos de se mover livremente animais sem os artefatos associados com o uso da contenção, a interação humana, ou anestesia q.......
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Divulgações
Os autores não têm nada a divulgar.
Agradecimentos
Este trabalho foi apoiado pelo National Institutes of Health (NIH / NHLBI) [Grant no. HL114869] e o apoio da UTHSC ao SM.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Sistema de anestesia para pequenos animais | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, EUA | Sistema de anestesia para pequenos animais de baixo fluxo | |
| Aquecedor de almofadas e termômetro de camundongo | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, EUA | permite monitorar a temperatura corporal e o controle homeotérmico em pequenos animais | |
| Microscópio binocular | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, EUA | Corpo binocular KSCXTS-1121 | com haste de suporte e |
| pinça de hemostático | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, EUA | INS750451 | usado para prender vasos sanguíneos ou marcar suturas Pequenos |
| clipes de metal, 7 mm, aço inoxidável | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, EUA | INS750344 | usado para fechamento da pele |
| Solução Betadine | Purdue Products L.P., Stamford, CT, EUA | NDC-67618-150-01 | Solução tópica de iodopovidona a 10% |
| Solução salina normal | Abott Laboratories | 04930-04-10 | necessária para evitar a secagem do tecido. |
| Nair (Loção removedora de pelos) | necessária para remoção de pelos do local da incisão/cirurgia | ||
| Sutura de seda Braide | Teleflex Medical OEM, Coventry, Connecticut, EUA | Tamanho 5.0, 6.0, 7.0 | |
| Etanol | 2716 | 70% etanol para desinfecção | |
| Tesoura de mola | Ferramenta de Ciências Finas | 15000-10 | para dissecção menor |
| Tesoura (inclinada para o lado) | Ferramenta de Ciências Finas | 14063-011 | No. 3 punho |
| Lâmina | 2976-0 | Pinça nº 10 | |
| (curva) | Ferramenta de Ciências Finas | 11150-10 | para segurar tecido |
| Fórceps (reto) | Ferramenta de Ciências Finas | 11151-10 | para segurar tecido |
| Porta-agulhas | Ferramenta de Ciência Fina | 12002-12 | para sutura |
| Nariz de agulha fina Fórceps | Ferramenta | ||
| Fina Isoflurano | Henry Schein Saúde Animal, Melville, Nova York, EUA | um agente anestésico geral por inalação | |
| Esterilizador Benchmark | Scientific, 116 Corporate Blvd, South Plainfield, NJ, EUA | B1000 | esteriliza ferramentas cirúrgicas em 5-10 segundos usando almofadas de gaze de aquecimento infravermelho |
| Johnson & Johnson, New Brunswick, NJ, USA | JJ8513 | para uso para limpeza de feridas, preparação, esfregar ou curativo Dispositivo de | |
| Telemetria | Data Sciences International, St. Paul, MN, EUA | DSI-PA-C10 | para registrar a pressão arterial em ratos em movimento livre |
| Sistema receptor de telemetria acoplado a um PC | Data Sciences International, St. Paul, MN, EUA | ||
| Tubing | Instech Laboratories, Plymouth Reunião, PA USA | BTPE-90 | |
| Pinça de Canulação de Vaso, 13 cm, 0.5 mm OD | World Precision Instruments | 503374 | pinça de canulação de vaso especial |
| Adesivo de tecido | 3M Animal Care Products, St. Paul, MN, USA | NAC No.: 11380041 | usar para fechar feridas menores, muitas vezes eliminando a necessidade de suturas e/ou bandagens |
| Balança de pesagem | Balança de laboratório analítica de precisão | BB300 |
Referências
- Danaei, G., et al. The preventable causes of death in the United States: comparative risk assessment of dietary, lifestyle, and metabolic risk factors. PLoS Med. 6 (4), e1000058(2009).
- Dornas, W. C., Silva, M. E. Animal models ....
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Reimpressões e permissões
