Measurement of Survival Time in<em&gt; Brachionus</em&gt; Rotifers: Sincronização de condições maternas

Gen Kaneko; Tatsuki Yoshinaga; Kristin E. Gribble; David M. Welch; Hideki Ushio

doi:10.3791/54126

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Artigo de método

Measurement of Survival Time in

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DOI:

10.3791/54126

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22 de julho de 2016

Gen Kaneko¹^,⁴ , Tatsuki Yoshinaga² , Kristin E. Gribble³ , David M. Welch³ , Hideki Ushio¹

¹Department of Aquatic Bioscience, Graduate School of Agricultural and Life Sciences, The University of Tokyo, ²School of Marine Biosciences, Department of Marine Biosciences, Kitasato University, ³Josephine Bay Paul Center for Comparative Molecular Biology and Evolution, Marine Biological Laboratory, ⁴School of Arts and Sciences, University of Houston-Victoria

Neste artigo

Resumo

Os rotíferos são zooplânctons microscópicos usados como modelos em estudos ecotoxicológicos e de envelhecimento. Aqui, fornecemos um protocolo para medição poderosa e reprodutível do tempo de sobrevivência em rotíferos de Brachionus. A sincronização das condições de cultura ao longo de várias gerações é de particular importância porque a condição materna afeta a história de vida da prole.

Resumo

Os rotíferos são zooplânctons microscópicos cosmopolitas usados como modelos em estudos ecotoxicológicos e de envelhecimento devido às suas diversas vantagens, como vida útil curta, facilidade de cultivo e partenogênese que permite a cultura clonal. No entanto, é necessário cautela ao medir seu tempo de sobrevida, pois é afetado pela idade materna e pelas condições de alimentação materna. Aqui, fornecemos um protocolo para medição poderosa e reprodutível do tempo de sobrevivência em rotíferos de Brachionus após uma sincronização cuidadosa das condições de cultivo ao longo de várias gerações. Empiricamente, a má sincronização resulta em mortalidade precoce e diminuição gradual da taxa de sobrevida, resultando em fraco poder estatístico. De fato, sob tais condições, a restrição calórica (RC) não conseguiu prolongar significativamente a vida útil de B. plicatilis, embora a longevidade induzida por RC tenha sido demonstrada com amostras de rotíferos bem sincronizadas em estudos anteriores e atuais. Este protocolo é provavelmente útil para outros modelos de invertebrados, incluindo a mosca-da-fruta Drosophila melanogaster e o nematóide Caenorhabditis elegans, porque os efeitos da idade materna também foram relatados nessas espécies.

Introdução

Rotíferos são microscópicos cosmopolita zooplâncton (<1 mm), que constituem o filo rotifera ^1. Eles têm um plano de corpo simples composto por cerca de 1000 células somáticas, bem como um dispositivo de roda-ciliar como característica chamada coroa, que é usado para locomoção e de alimentação. A maioria dos rotíferos pertencem a classes monogononta ou bdelloidea, que contêm cerca de 1.600 e 500 espécies, respectivamente ^2. Rotíferos monogononta geralmente têm duas fases reprodução sexuada e assexuada (partenogênese cíclico), enquanto rotíferos bdelloid reproduzir por partenogênese obrigatória ^3. É, assim, possível a obtenção de indiví....