VacuSIP, um método melhorado para Inex<em&gt; In Situ</em&gt; Medição de partículas e dissolvidos compostos Processado por alimentadores de suspensão ativa

Resumo

Apresentamos o VacuSIP, um método simples, não intrusivo e confiável para amostragem pontual limpa e precisa de água. O sistema foi desenvolvido e avaliado para a coleta simultânea da água inalada e exalada por alimentadores de suspensão bentônica in situ, para medir de forma limpa a remoção e excreção de compostos particulados e dissolvidos.

Resumo

Os alimentadores de suspensão bentônica desempenham papéis essenciais no funcionamento dos ecossistemas marinhos. Ao filtrar grandes volumes de água, remover plâncton e detritos e excretar partículas e compostos dissolvidos, eles servem como agentes importantes para o acoplamento bentônico-pelágico. A medição precisa dos compostos removidos e excretados por alimentadores em suspensão (como esponjas, ascídias, poliquetas, bivalves) é crucial para o estudo de sua fisiologia, metabolismo e ecologia alimentar, e é fundamental para determinar a relevância ecológica dos fluxos de nutrientes mediados por esses organismos. No entanto, a avaliação da taxa pela qual os alimentadores de suspensão processam compostos particulados e dissolvidos na natureza é restrita pelas limitações das metodologias atualmente disponíveis. Nosso objetivo era desenvolver um método simples, confiável e não intrusivo que permitisse a amostragem de água limpa e controlada a partir de um ponto específico, como a abertura atual de alimentadores de suspensão bentônica, in situ. Nosso método permite a amostragem simultânea da água inalada e exalada do organismo estudado usando tubos minúsculos instalados em um dispositivo manipulador personalizado e cuidadosamente posicionados dentro do orifício exalante do organismo amostrado. Perfurar um septo no recipiente coletor com uma agulha de seringa presa à extremidade distal de cada tubo permite que a pressão externa force lentamente a água amostrada para dentro do recipiente através do tubo de amostragem. A taxa de amostragem lenta e controlada permite integrar a fragmentação inerente à água, garantindo uma amostragem livre de contaminação. Fornecemos recomendações para os dispositivos de filtragem, recipiente de coleta e procedimentos de armazenamento mais adequados para as análises de diferentes compostos particulados e dissolvidos. O sistema VacuSIP oferece um método confiável para a quantificação do metabolismo do alimentador em suspensão não perturbado em condições naturais, que é barato e fácil de aprender e aplicar para avaliar a fisiologia e o papel funcional dos alimentadores de filtro em diferentes ecossistemas.

Introdução

Alimentadores de suspensão bentônicos desempenham um papel essencial no funcionamento dos ecossistemas marinhos ^1. Ao filtrar grandes volumes de água ^2,3, eles removem e excretar partículas (plâncton e detritos) e compostos dissolvidos ¹ (e referências) e são um importante agente de acoplamento de ^4,5 bentônica-pelágica e ciclagem de nutrientes ^6,7. Com precisão medir a partículas e compostos dissolvidos removidos e excretados pelos alimentadores de suspensão bentônicas (como esponjas, ascídias, poliquetas, e bivalves) é fundamental para compreender a sua fisiologia, metabolismo e ecologia alimentar. Juntamente c....

Protocolo

1. Passos de preparação e limpeza Procedimentos

1. Solução de limpeza
   1. Usar equipamento de proteção, um jaleco e luvas em todos os momentos. Realizar estas etapas preparatórias em um espaço limpo livre de poeira e fumaça.
   2. Preparar uma solução clorídrico 5-10% de ácido (HCl) com frescos, de alta qualidade, água bidestilada.
   3. Prepare a 5% de mistura de base altamente solúvel da solução de surfactante aniónico e não iónico (Veja Lista de Materiais) com frescos, de alta qualidade, água bidestilada.
   4. Armazenar todas as soluções em limpo, lavado com ácido recipientes.
2. Etapas pre....

Resultados

Otimização dos métodos de coleta de água do mar

Seleção de frascos de coletor e procedimento de limpeza

vasos de coleta VacuSIP compatíveis devem ter um septo que permite amostragem a ser iniciada por perfuração com uma agulha de seringa. Eles devem suportar a pressão debaixo d'água elevada (2-3 bares no scuba típicos p.......

Discussão

etapas preparatórias

Frascos de colector para os DOM e análise de nutrientes

Uma vez que os navios de colector podem interagir com micro-constituintes dissolvidos e as paredes do amostrador pode ser um substrato para as bactérias de crescimento ^30-34, diferentes frascos de DOM e recolha de nutrientes foram testados. Borosilicato não é recomendado para a quantificação de sílica ^33,35, uma vez que as .......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
GorillaPod, Original	Joby	GP000001	tripé portátil flexível
Virola sem flange	IDEX Health & Ciência	P-200X	1/16" em Azul/pk
Porca Macho	IDEX Saúde & Ciência	P-205X	1/16" em Verde/10  pk
Fêmea para Fêmea Luer	IDEX Saúde & Ciência	P-658
Luer	IDEX Feminino-Masculino Saúde e Ciência	Tubo P-655
Peek (254  µ m ID)	IDEX Saúde & Ciência	1531	1/16" OD x 0.01  em ID x 5  pés de comprimento. O ID alternativo pode ser usado.
Resina epóxi de dois componentes	IVEGOR	9257	Misture bem a resina de dois componentes antes de usar
(TOC) Frascos EPA	Cole -Parmer	03756-20	Frascos de vidro de 40 ml. Fabricado também pela Thomas Scientific (número de referência 9711F09).
Frascos de HDPE	Wheaton	986701 (E78620)	Frascos de polietileno de alta densidade de 20 ml
Vacuette Z sem aditivo	Greiner bio-one		455001 pré-vácuo pelo fabricante
Frascos de Amostra de Septo	Thomas Scientific	1755C01	Garrafas de vidro de 250 ml
Tampa de Septo 1	Wheaton	W240844SP (E7865R)	22-400 para frascos de HDPE
Tampa de septo 2	Wheaton	W240846 (1078-5553)	24-400 para frascos e frascos de vidro. Também fabricado pela Thermo Scientific National (ref. 03-377-42).
Porta-Filtros Swinney em linha em aço inoxidável	Pall	516-9067	13 mm de diâmetro
PTFE Arruela de Vedação	Pall	516-8064	anel para suportes de filtro de aço inoxidável
TCLP Filtros	de Vidro Pall	516-9126	Filtros de Fibra de Vidro Sem Aglutinantes, 13  mm de diâmetro, tamanho do poro 0,7  µ m
Suportes de Filtro de Policarbonato	Cole -Parmer	17295	13 mm de diâmetro
Filtros de Membrana Isopore Millipore		GTTP01300	13  mm de diâmetro, tamanho do poro 0,2  µ m
Contrad 70 Solution	Decon Labs	1002	mistura básica altamente solúvel de solução de surfactante aniônico e não iônico
Filtros de seringa estéreis	VWR International Eurolab S.L.	514-0061P	25  mm de diâmetro, tamanho do poro 0.2  µ m
Fluoresceína	Sigma-Aldrich	(antiga ref.28802) 46955-100G	100  g
Holdex, descartável, estéril	Greiner bio-one	450263	suporte de tubo estéril, de uso único com luer descentralizado para
Agulhas Estéreis	IcoGammaPlus	5160	0.7  mm x 30  mm
Cryovials Nalgene	Nalgene	V5007(Cat. No.5000-0020)	2  ml
Cryobox carton	Rubilabor	M-600	145x145x55  mm p/microtubo 1.5  ml
de ácido ortofosfórico	Sigma	79617 ou alternativamente use ácido clorídrico ultra-puro, concertação final 0,1%
Paraformaldeído	Sigma	P6148	500  g
Glutaraldeído	Merck	8,206,031,000	25%, Bomba de Vácuo Manual de 1 L
	Bü rkle	5620-2181 ou alternativamente use bomba

Vacuette de vácuo de laboratório padrão