Rápida Detecção Molecular e diferenciação de Influenza vírus A e B

Caitlin C. Otto; Samuel E. Kaplan; Jeffrey Stiles; Albina Mikhlina; Cindy Lee; N. Esther Babady; Yi-Wei Tang

doi:10.3791/54312

Artigo de método

Rápida Detecção Molecular e diferenciação de Influenza vírus A e B

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DOI:

10.3791/54312

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30 de janeiro de 2017

Caitlin C. Otto¹ , Samuel E. Kaplan¹ , Jeffrey Stiles¹ , Albina Mikhlina¹ , Cindy Lee¹ , N. Esther Babady¹ , Yi-Wei Tang¹

¹Department of Laboratory Medicine, Memorial Sloan Kettering Cancer Center

Neste artigo

Resumo

Descreve-se um ensaio rápido, com base molecular da gripe A e B. O ensaio detecta Influenza cada alvo dentro de 15 min, utilizando amplificação isotérmica com iniciadores específicos de influenza, seguido de detecção do alvo com as sondas farol molecular. O ensaio de Influenza A e B é de fácil utilização e necessário hands-on tempo mínimo para executar.

Resumo

A gripe é uma doença respiratória contagiosa causada por vírus da gripe A e B em seres humanos e faz com que uma quantidade significativa de morbilidade e mortalidade a cada ano. A Influenza A e B do ensaio foi o primeiro teste molecular gripe rápida dispensada-CLIA disponível. O teste de Influenza A e B funciona através do emprego de amplificação isotérmica com iniciadores específicos de influenza, seguido de detecção do alvo com as sondas farol molecular. Aqui, o desempenho do ensaio de Influenza A e B em congelado, arquivado esfregaço nasofaríngeo (NPS) amostras armazenadas no meio de transporte viral (VTM) foram comparados com um ensaio de painel respiratório.

O desempenho do ensaio de Influenza A e B foi avaliada por comparação dos resultados com o método de referência do painel respiratório. A sensibilidade para o vírus total de influenza A foi 67,5% (CI de 95% (IC), 56,6-78,5) e a especificidade foi de 86,9% (Cl, 71,0-100). Para os testes de vírus da gripe B, a sensibilidade e a especificidade foram de 90,2% (Cl, 68,5-100) E 98,8% (Cl, 68,5-100), respectivamente.

Este sistema tem a vantagem de um tempo de teste significativamente mais curto do que qualquer outro ensaio molecular actualmente disponíveis e o processo simples, livre de pipeta é executado em um sistema totalmente integrado, fechada, de pequenas dimensões. No geral, a Influenza A e B ensaio avaliada neste estudo tem o potencial de servir como um teste de diagnóstico da gripe rápida point-of-care.

Introdução

Infecções de vírus da gripe resultar em uma quantidade significativa de morbidade e mortalidade em cada ano ^{^1,} ^{^2,} ^3. Influenza não complicada é caracterizada por sintomas respiratórios e constitucionais, tais como febre, mialgia, dor de cabeça e tosse não produtiva ^{^4,} ^5. Os indivíduos mais velhos, crianças, doentes imunocomprometidos e pacientes com comorbidades subjacentes correm um risco maior de complicações graves, como pneumonia, miocardite, doença do sistema nervoso central, ou morte ^{^6,}