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Artigo de método

As investigações sobre o Complexo Ga (III) de EOB-DTPA e sua

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⸱

DOI:

10.3791/54334

⸱

17 de agosto de 2016

 ,  ,  , 
1Clinic of Nuclear Medicine, University Hospital Jena, 2Friedrich Schiller University

Neste artigo

Resumo

Um procedimento para o isolamento de EOB-DTPA e complexação subsequente com Ga naturais (III) e 68 Ga é aqui apresentado, bem como uma análise aprofundada de todos os compostos e investigações sobre a eficiência rotulagem, a estabilidade in vitro e o octanol / água coeficiente de distribuição do complexo marcado radioactivamente.

Resumo

Nós demonstramos um método para o isolamento de EOB-DTPA (3,6,9-triaza-f 3,6,9-tris (carboximetil) -4- (etoxibenzil) ácido -undecanedioic) a partir da sua Gd (III) e os protocolos para a preparação do seu novo não-radioactivos, isto é, singular Ga (III), bem como radioactivos 68Ga complexo. O ligando, bem como o Ga (III) foram caracterizados por espectroscopia de ressonância magnética nuclear (RMN), espectrometria de massa e análise elementar. 68Ga foi obtido por um método de eluição a partir de um padrão / 68Ga gerador 68 Ge. Experimentos para avaliar a eficiência de 68 Ga-rotulagem de EOB-DTPA em pH 3,8-4,0 foram realizadas. técnicas de análise de rádio estabelecida TLC (cromatografia de camada fina) e HPLC de rádio (cromatografia líquida de alta eficiência) foram usadas para determinar a pureza radioquímica do traçador. Como uma primeira investigação de lipofilicidade dos 68 Ga traçadores o n- octanol / água DISTRIBUTION coeficiente de Ga 68 espécies presentes em uma solução de pH 7,4 foi determinada por um método de extracção. medições in vitro de estabilidade do marcador em vários meios a pH fisiológico foram realizadas, revelando diferentes taxas de decomposição.

Introdução

Ácido gadoxético, um nome comum para o complexo de Gd (III) do ligando EOB-DTPA 1, é um agente de contraste utilizado em imagiologia hepatobiliar frequência de ressonância magnética (MRI). 2,3 Devido à sua absorção específica do fígado por hepatócitos e elevada percentagem de excreção hepatobiliar que permite a localização das lesões focais e tumores hepáticos. 2-5 no entanto, certas limitações da técnica de ressonância magnética (por exemplo, a toxicidade dos agentes de contraste, aplicabilidade limitada em pacientes com implantes claustrophobia ou de metal) para chamar uma ferramenta de diagnóstico alternativa .

A tomografia de emissão de positrões (PET) é um método de imagiologia molecular, em que uma pequena quantidade de uma substância radioactiva (traçador) é administrado, em que a sua distribuição no corpo é registado por um aparelho de PET. 6 O PET é um método dinâmico que permite alta a resolução espacial e temporal das imagens, bem como a quantificação dos resultados, sem ter delidar com os efeitos colaterais dos agentes de contraste de MRI. O valor informativo das informações metabólica obtida pode ser ainda aumentada pela combinação com dados anatômicos recebidos dos métodos de imagem adicionais, como mais comumente atingida por imagem híbrido com tomografia computadorizada (TC) em scanners de PET / CT.

A estrutura química de um marcador adequado para o PET deve incluir um isótopo radioactivo serve como emissor de positrões. Pósitrons têm um curto período de vida, uma vez que aniquilar quase imediatamente com os elétrons das conchas átomo de tecido circundante. Por aniquilação dois fotões gama 511 keV com direcção oposta de movimento são emitidos, que são registados pelo aparelho de PET 7,8. Para formar um traçador, nuclidos animal de estimação pode ser ligado covalentemente a uma molécula, como é o caso em 2-desoxi- 2- [18F] fluoroglucose (FDG), o marcador PET mais amplamente utilizado. 7 no entanto, um nuclídeo também podem formar ligações coordenativas a um ou vários ligantes (por exemplo,, [68 Ga] -DOTATOC 9,10) ou ser aplicado na forma de sais inorgânicos dissolvidos (por exemplo, [18F] fluoreto de sódio 11). No seu conjunto, a estrutura do marcador é crucial, uma vez que determina o seu comportamento biodistribuição, metabolismo e excreção.

Um nuclido PET adequado deve combinar as características favoráveis ​​de energia de positrões como conveniente e disponibilidade, bem como uma meia-vida adequadas para a investigação pretendida. O 68Ga nuclídeo tornou-se uma força essencial no domínio do PET ao longo das últimas duas décadas. 12,13 Isto é principalmente devido à sua disponibilidade através de um sistema de gerador, que permite rotulagem no local, independentemente, a partir da vizinhança de um ciclotrão. Em um gerador, o nuclido mãe 68 Ge é absorvido numa coluna de onde o nuclídeo filha 68Ga é eluída e, subsequentemente, rotulados com um agente quelante adequado. 6,14 Uma vez que o 68Ga nuclídeo existe como um TrivalPendientesent catião tal como Gd (III) 10,13, quelantes EOB-DTPA com 68Ga vez iria produzir um complexo com a mesma carga global negativa como ácido gadoxético. Assim, que 68 Ga traçador pode combinar uma especificidade hepática característica semelhante com a aptidão para a imagem PET. Embora o ácido gadoxético é comprado e administrado como sal de sódio, no seguinte contexto vamos nos referir a ele como Gd [EOB-DTPA] e para o complexo não-radioativo Ga (III) como Ga [EOB-DTPA], ou 68 Ga [ EOB-DTPA] no caso de o componente marcado radioactivamente por uma questão de conveniência.

Para avaliar a sua aplicabilidade como marcadores para PET, complexos de metais radioactivos têm de ser examinadas extensivamente in vitro, in vivo ou ex experiências in vivo em primeiro lugar. Para determinar a aptidão para o respectivo problema médico, várias características tracer como comportamento biodistribuição e perfil de apuramento, a estabilidade, a especificidade do órgão e célula ou tissue captação precisam ser investigadas. Devido ao seu caráter não-invasivo, in vitro determinações são muitas vezes realizados antes de experimentos in vivo. É geralmente reconhecido que o DTPA e os seus derivados são de aptidão limitada como quelantes para 68Ga, devido a estes complexos de falta inércia cinética, resultando em decomposição comparativamente rápido, quando administrado in vivo. 14-20 Isto é causado principalmente pela apo- transferrina actua como um concorrente por 68 Ga no plasma. No entanto, nós investigamos este novo marcador relativa à sua eventual aplicação em imagiologia hepatobiliar, em que as informações de diagnóstico podem ser fornecidas dentro de minutos após a injecção 3,4,21-23, assim, que não implica necessariamente a estabilidade traçador de longo prazo. Para este efeito foram isoladas EOB-DTPA a partir de ácido gadoxético e inicialmente realizado a complexação com Ga naturais (III), que existe como uma mistura de dois isótopos estáveis, 69 Ga e 71 Ga. O complexo assim obtido serviu como padrão não radioactivo para o seguinte quelação de 68 Ga. Usamos métodos estabelecidos e, simultaneamente, avaliada sua adequação para determinar a eficiência 68 Galabeling de EOB-DTPA e investigar a lipofilicidade do novo 68 Ga traçador e sua estabilidade em diferentes mídias.

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Protocolo

1. Preparação de EOB-DTPA e Ga [EOB-DTPA]

Cuidado: Por favor, consulte todas as folhas de dados de segurança pertinentes (MSDS) dos utilizados solventes orgânicos, ácidos e alcalinos antes do uso. Execute todas as etapas em um exaustor e usar equipamentos de proteção individual (óculos de segurança, luvas, jaleco).

  1. Isolamento de EOB-DTPA a partir de ácido gadoxético
    1. Coloque 3 ml de solução injectável gadoxético 0,25 M de ácido para um balão. Adicionar 500 mg (5,6 mmol) de ácido oxálico à solução agitada.
    2. Depois de se agitar durante 1 hora, filtrar a suspensão através de uma frita utilizando pressão reduzida. Lavar o resíduo três vezes com 3 ml de água, respectivamente.
    3. Combinar os filtrados aquosos e equipar a solução com um eléctrodo de pH. Adiciona-se ácido clorídrico 12 M para o filtrado até que o pH é de cerca de -0,1.
    4. Remover o solvente in vácuo para se obter um resíduo incolor. Armazenar sob gás inerte.
    5. Lavar o resíduo cuidadosamente (pelo menos trêsvezes) com acetato de etilo para remover o excesso de ácido oxálico. Secar o resíduo em vácuo.
    6. Redissolve-se o resíduo em 2 ml de água à temperatura ambiente e depois arrefece-se a solução num banho de gelo. Sem remover o banho de gelo, adicionar 0,5 M de hidróxido de sódio aquoso a solução gota a gota, até que a formação de um sólido incolor é observado pegajosa.
    7. Remover a água por decantação. Lavar os sólidos mais duas vezes com 1 ml de água fria. Seca-se o sólido in vácuo para se obter a primeira fracção do produto.
    8. Isolar uma segunda fracção de produto a partir das fracções combinadas de água decantada por meio de cromatografia em coluna (sílica, metanol / água 01/04). 24 Remover o solvente em vácuo.
    9. Se o sólido assim obtido não é puro branco, dissolvê-la em 1 ml de água, adicionar 10 ml de etanol e subsequentemente 10 ml de éter dietílico para precipitar o produto. Filtra-se através de um filtro poroso utilizando pressão reduzida e seca in vácuo.
    10. Combinarambas as frações sólidas de EOB-DTPA e realizar espectroscopia de RMN, 25 de espectrometria de massa 26 e elementares 27 análises.
  2. Síntese de Ga [EOB-DTPA]
    CUIDADO: Loja cloreto de sólido Ga (III) sob uma atmosfera inerte seca, uma vez que ao entrar em contato com o ar, humidade ou a decomposição da graxa ocorre, resultando em vapores corrosivos e formação de impurezas amarelos, castanhos ou pretos.
    1. Prepara-se uma solução de estoque de 0,11 M por dissolução de 1,94 g (11,0 mmol) de Ga (III) cloreto em 100 ml de água. Dilui-se 1 ml de solução de amoníaco aquoso a 25% com 4 ml de água.
    2. Dissolve-se 80 mg (0,15 mmol) de EOB-DTPA num balão de 10 ml de água. Se necessário, aquecer o solvente para se conseguir a dissolução completa.
    3. Adicionar 1,4 ml (0,15 mmol) da solução de cloreto de Ga (III). Equipar o frasco com um agitador e pH-eletrodo. Adicionar gota a gota uma solução de amoníaco diluído aquoso até que o pH da solução é de aproximadamente 4,1. Agita-se à rotemperatura om durante 30 minutos.
    4. Remover o solvente em vácuo. Colocar o resíduo num balão, equipado com um stillhead com uma tubuladura lateral central e paralela. Equipar a central do pescoço com um dedo de arrefecimento e do pescoço lado com uma saída da bomba de vácuo
    5. Aquece-se o resíduo sob pressão reduzida (125 ° C, 0,6 mbar). Periodicamente remover o cloreto de amónio sublimado (visível como revestimento branco da superfície de vidro) a partir do dedo de refrigeração e ainda cabeça, bem como a partir das partes superiores do frasco com um pano ligeiramente molhado. Continuar o processo até que não há formação visível de novo sublimado.
    6. Para remover os vestígios finais de cloreto de amónio lavar o resíduo três vezes com 0,5 ml de metanol quente, respectivamente. Seca-se o resíduo incolor em vácuo. Execute NMR espectroscópica, 25 de massa por espectrometria de 26 e elementares 27 análises.

2. Procedimento Geral Labeling

ATENÇÃO: Todos os exexperi- incluindo contato direto ou indireto com substâncias radioactivas devem ser realizadas apenas por pessoal treinado. Por favor, use equipamento de proteção adequado. Recolher quaisquer resíduos radioactivos separadamente e armazenar e descartar de acordo com os regulamentos válidos.

  1. A eluição do gerador
    Nota: A 40 mCi 68 Ge / 68Ga gerador com o nuclido mãe ligado como óxido sobre sílica dodecil-3,4,5-trihydroxybenzoate foi usada. A eluição e a purificação pode ser realizada manualmente ou, como foi o caso no presente processo, tal como um processo automatizado combinada utilizando uma bomba peristáltica e unidade de distribuição.
    1. Preparar soluções de 5,5 M, 1,0 M e ácido clorídrico 0,05 M. Prepara-se uma solução de cloreto de sódio 5,0 M contendo 25 uL de ácido clorídrico 5,5 M por ml. Prepara-se uma solução tampão de pH 4,6 através da combinação de 4,1 g de acetato de sódio, 1 mL de HCl (30%) e 2,5 ml de ácido acético glacial e diluindo a mistura com água até 50 ml.
    2. precondition o PS-H + cartucho enxaguando-o devagar com 1 ml de ácido clorídrico 1,0 M e, subsequentemente, 5 ml de água.
    3. Elui-se a coluna de sílica do gerador com 4 ml de 0,05 M de HCl. 12 Carregar o 68Ga eluato para o PS-H + cartucho.
    4. Passar o cartucho com 5 ml de água e subsequentemente secá-lo com 5 ml de ar. Eluir a 68 Ga a partir do cartucho com 1 ml de 5,0 M de solução de cloreto de sódio acidificada. 28
  2. Etiquetagem de EOB-DTPA com 68Ga
    1. Dissolve-se 1 mg (1,9 umol) de EOB-DTPA em 1 ml de água. A partir desta solução ter 100 uL (0,19 nmol) e diluí-los com 9,9 ml de água para preparar um 19 uM (10 ug / ml) da solução de EOB-DTPA.
    2. Remover 50 pi (equivalentes a 22-29 MBq) da solução contendo 68 Ga e colocado num frasco. Adicionam-se 50 ul (0,5 ug) de uma solução de estoque 19 mM de EOB-DTPA e 300 ul óf tampão para elevar o pH a 4,0. Agitar rapidamente e incubar a solução à temperatura ambiente durante 5 min. Retirar uma alíquota de 1-5 ul e colocar a HPLC ou análise TLC.
    3. Realizar a análise por HPLC de rádio em um de fase inversa (RP) C18 29 Uso da seguinte fase móvel:. A - água ácido trifluoroacético / (99,9% / 0,1%), B - acetonitrilo / ácido trif luoroacético (99,9% / 0,1%), gradiente : 06 min 80% de A → 0% de A (0,5 ml / min), 610 min 0% de A (0,5 ml / min).
    4. Determinar as intensidades dos picos dos sinais de rádio HPLC, como área sob a curva. Calcular o rendimento da marcação de pureza radioquímica (RCP) do traçador como se segue:
      RCP = A Ga-EOB-DTPA / (A Ga + A Ga-EOB-DTPA) ∙ 100%
      A Ga-EOB-DTPA: área sob a curva de 68 Ga [EOB-DTPA]
      A Ga: área sob a curva de livre 68 Ga

Eficiência 3. Rotulagem

  1. Realizar procedimentos de rotulagem como descreverd na seção 2. Use uma gama consistente de iniciar a atividade de 68 Ga fluido, por exemplo, 22-29 MBq (40-140 ul, dependendo da frescura do eluato).
  2. Adicionar a quantidade necessária de solução tampão para ajustar o pH a 3,8-4,0 (40-190 ul, dependendo do volume de fluido 68 Ga). Adicionar a quantidade necessária de solução de reserva de ligando (10-70 ul de uma solução a 19 mM).
  3. Adicionar as quantidades necessárias de água para ajustar o volume global de cada sonda rotulagem para 1,75 ml. Misturar completamente e deixar a amostra repousar durante 5 min à temperatura ambiente. Realizar análise HPLC como descrito na seção 2 para determinar o rendimento de marcação.
  4. Realizar procedimentos de rotulagem com quantidades de ligante entre 0,1 mg e 0,7 mg em intervalos de 0,1 g. Realizar experiências em triplicado para cada concentração de ligando. Calcule o rendimento de média e desvio padrão.

4. Vitro estabilidade na

  1. p geralROCEDIMENTO e preparações
    1. Dissolve-se um comprimido de tampão fosfato salino (PBS) em 200 ml de água desionizada para se preparar uma solução stock de PBS com uma concentração de fosfato de 10 mM.
    2. Realizar etiquetagem de 22-29 MBq 68Ga com 0,5 ml de solução de estoque EOB-DTPA, como descrito na secção 2. Dependendo do volume do eluato 68Ga, ajustar a quantidade de tampão, como descrito na secção 3. Retirar amostras de solução de rotulagem contendo 6-12 MBq de traçador para realizar medições de estabilidade.
    3. Realizar a análise TLC rádio sobre gel de sílica placas de alumínio revestidas de 80 mm utilizando citrato de sódio 0,1 M aquoso como eluente e analisar as placas com um leitor de radioactividade TLC. 30 Determinar as intensidades dos sinais de TLC como a área sob a curva. Calcula-se a RCP do traçador como se segue:
      RCP = A Ga-EOB-DTPA / (A Ga-livre + A Ga-EOB-DTPA + A Ga-coloidal) ∙ 100%
      A Ga-EOB-DTPA: área sob a curva de 68 Ga [EOB-DTPA]
      A Ga-livre: área sob a curva de livre 68 Ga
      A Ga-coloidal: área sob a curva de coloidal 68 Ga
    4. Calcule RCP t / RCP 0 para cada ponto de tempo. Traçar a RCP assim padronizado vs. diferença de tempo desde o ponto de partida t = 0 min.
      RCP t = RCP de 68 Ga [EOB-DTPA] no ponto de tempo t.
      RCP 0 = RCP de 68 Ga [EOB-DTPA] em t = 0 min.
  2. Estabilidade em tampão fosfato salino (A)
    1. A 65 ul de solução de etiquetagem adicionar 150 ul de solução de reserva de PBS e 60 ul de solução de hidróxido de sódio (0,1 M) para elevar o pH para 7,4. Homogeneizar.
    2. Retirar uma alíquota de 1-5 ul para realizar a análise TLC ( 'ponto de partida'). armazenar imediatamente a solução numa incubadora a 37 ° C e remover aliquotas para realizar a análise de cromatografia em camada fina representamAtivE pontos de tempo ao longo de 3 h.
  3. Estabilidade no sentido excesso de apo -transferrin em PBS (B)
    1. A 120 ul de solução de etiquetagem adicionar 50 ul de solução de reserva de PBS e 430 ul de uma solução de hidróxido de sódio (0,1 M) para elevar o pH para 7,4. Adicionar 40 ul de uma solução de Apo -transferrin (25 mg / ml). Homogeneizar.
    2. Retirar uma alíquota de 1-5 ul para realizar a análise TLC ( 'ponto de partida'). armazenar imediatamente a solução numa incubadora a 37 ° C e remover aliquotas para realizar a análise de TLC em pontos temporais representativos ao longo de 3 h.
  4. Estabilidade no soro humano (C)
    1. A 500 ul de soro humano adicionar 25 ul de solução de etiquetagem e 45 ul de solução de hidróxido de sódio (0,1 M) para elevar o pH para 7,4. Homogeneizar.
    2. Retirar uma alíquota de 1-5 ul para realizar a análise TLC ( 'ponto de partida'). armazenar imediatamente a solução em uma incuBator a 37 ° C e remover aliquotas para realizar a análise de TLC em pontos temporais representativos ao longo de 3 h.

5. Determinação do coeficiente de distribuição LoGD

  1. Executar procedimentos de marcação, tal como descrito na secção 2. 50 ul de solução de etiquetagem adicionar 20 ul de solução de reserva de PBS e 170 ul de uma solução de hidróxido de sódio (0,1 M) para elevar o pH para 7,4.
  2. Retirar 200 ul a partir dessa solução e colocá-la em um plástico V-frasco. Adicionar 200 ul de n-octanol. Fechar o frasco e agitar com vortex durante 2 min. Em seguida centrifugar a amostra a 1600 xg durante 5 min.
  3. Remover triplicatas de 40 ul da fase n -octanol e a fase aquosa cada um e colocá-los em V-frascos separados. Tenha cuidado para não misturar as camadas.
  4. Medir a actividade de cada uma das amostras num contador gama bem durante 30 segundos. Para cada amostra imediatamente repetir a medição e duas vezes da mesma calcular a actividade Ᾱ t significativo em contagens por minuto (cpm). Listar o, assim, ganhou Ᾱ t, W1, Ᾱ t, W2 e Ᾱ t, W3 (atividades em amostras aquosas) e Ᾱ t, O1, Ᾱ t, O2, Ᾱ t, O3 (atividades em n- octanol), juntamente com o respectivo ponto de tempo t de sua determinação.
  5. Definir o ponto de tempo da medição da última amostra, tal como t 0. Determinar e listar Dt em min calculando Dt = tt 0. Realizar correcção de decaimento Ᾱ t, usando a seguinte fórmula:
    Ᾱ 0 = Ᾱ T · 2 (Dt / 68 min).
  6. Calcular Ᾱ 0, W como a média de Ᾱ 0, W1, Ᾱ 0, W2 e Ᾱ 0, W3, bem como Ᾱ 0, O como a média de Ᾱ 0, O1, Ᾱ 0, O2 e Ᾱ 0, O3. Calcular logD usando a seguinte fórmula:
    logD = log [(Ᾱ 0, S · 40 ug) / (Ᾱ 0, W · 33 ug)].
  7. Executar toda a experiência em triplicado e calcular a média de logD, juntamente com o seu desvio padrão.

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Resultados

O ligando EOB-DTPA e o Ga não radioactivo (III) foram analisados ​​por meio de 1 H e 13 C {1 H} espectroscopia de RMN, espectrometria de massa e análise elementar. Os resultados listados na Tabela 1 e ilustrados nas Figuras 1-6 verificar a pureza das substâncias.

A eluição da Ga gerador de 68 Ge / 68 produziu soluções de 400-600 M...

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Discussão

EOB-DTPA é acessível através de uma síntese de múltiplos passos 33, mas pode muito bem ser isolado a partir de agentes de contraste que contêm ácido disponíveis gadoxético. Para este propósito, o ião central, Gd (III) pode ser precipitado com um excesso de ácido oxálico. Depois de remover o oxalato Gd (III) e ácido oxálico o ligando pode ser isolado por precipitação em água fria a um pH de 1,5. No entanto, a fim de aumentar os rendimentos de cromatografia em coluna do filtrado pode ser realizada em vez disso,...

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Divulgações

Os autores não têm nada a divulgar.

Agradecimentos

Os autores não têm agradecimentos.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
primovistaBayer-0,25 M
cloreto de gálio (III)Sigma-Aldrich Co.
450898 água (desionizada)-dedeionização de água da torneira da Auma-Tec GmbH
ácido clorídrico 12 MVWR20252.29
hidróxido de sódioPolskie Odczynniki Chemiczne S.A.
ácido oxálicoSigma-Aldrich Co.75688
acetato de etilaBrenntag GmbH10010447
gel de sílicaMerck KGaA1.10832.9025Geduran Si 60 0.063-0.2  mm
TLC gel de sílica 60 F254Merck KGaA1.16834.0001
metanolVWR20903.55
etanolBrenntag GmbH10018366
éter eietilVWR23807.468armazenado sobre placas KOH
solução de amoníaco (25%)VWR1133.1
eléctrodo de pHVWR662-1657
unidade de agitação e aquecimentoHeidolph505-20000-00
bombaIlmvac GmbH322002
espectrômetro de RMN
-
analisador elementarHekatech GmbH Analysentechnik-EuroVectorEA 3000 CHNS
água deuterada D2Oeuriso-topD21499,90% D
Material/Equipamento necessário para os procedimentos de rotulagem
68Ge/68Ga geradorITG Isotope Technologies Garching GmbHA150
sistema de bomba e dispensadorScintomicsGmbH-Variosystem
ácido clorídrico 30% (suprapur)Merck KGaA1.00318.1000
água (ultrapur)Merck KGaA1.01262.1000
cloreto de sódio (suprapur)Merck KGaA1.06406.0500
acetato de sódio (suprapur)Merck KGaA1.06264.0050
ácido acético glacial (suprapur)Merck KGaA1.00066.0250
citrato de sódio di-hidratadoVEB Laborchemie Apolda10782>98.5%
PS-H+ Cartucho (S)Macherey-Nagel731867Chromafix
apo-TransferrinSigma-Aldrich Co.T2036
PBS buffer (comprimidos)Sigma-Aldrich Co.79382
soro humanoSigma-Aldrich Co.H4522de plasma AB macho humano
, colunas, etc.eletrodo de pH de design
Knick Elektronische Messgerä te GmbH & Co. KG765-Set
bomba binária (HPLC)Hewlett-PackardG1312A (HP 1100)
Detector UV Vis (HPLC)Hewlett-PackardG1315A (HP 1100)
detector radioativo (HPLC)EGRC Berthold
HPLC C-18-PFP colunaAdvanced Chromatography Technologies Ltd.ACE-1110-1503/A100528
Frascos de vidro HPLCGTG Glastechnik Graefenroda GmbH8004-HP-H/i3µ
pipetaEppendorf-frascosde
plásticoSarstedt AG & Co.6542.007
frascos de plásticoGreiner Bio-One International GmbH717201
activímetroMED Nuklear-Medizintechnik DresdenGmbH-Isomed2010
pinçasdesign
incubadoraHeraeus Instruments GmbHmisturador de vórtice 51008815
Fisons-Whirlimixer
centrífugaHeraeus Instruments GmbH75003360
contador de poços gamaMED Nuklear-Medizintechnik DresdenGmbH-Isomed2100
água para cromatografiaMerck KGaA1.15333.2500
acetonitrila para cromatografiaMerck KGaA1.00030.2500
ácido trifluoroacéticoSigma-Aldrich91707
Scanner de radioatividade TLCraytest Isotopenmessgerä te GmbHB00003875equipada com detector de plástico beta
equipamento 810925429 de design personalizado Bruker Coorporation-Ultra Shield 400 espectrômetro de massa Thermo Fisher Scientific Inc. de frascos personalizado de personalizado

Referências

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  4. Zech, C. J., Herrmann, K. A., Reiser, M. F., Schoenberg, S. O. MR Imaging in Patients with Suspected Liver Metastases: Value of Liver-specific Contrast Agent Gd-EOB-DTPA. Magn. Reson. Med. Sci. 6, 43-52 (2007).
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