Viabilidade imagens de células em Scaffolds não-transparentes - usando o exemplo de um Titanium Implant Novel malha

Gauri Tendulkar; Phillip Grau; Patrick Ziegler; Alfred Buck, Sr.; Alfred Buck, Jr.; Andreas Badke; Hans-Peter Kaps; Sabrina Ehnert; Andreas K. Nussler

doi:10.3791/54537

É necessária uma assinatura do JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou inicie seu teste gratuito.

Artigo de método

Viabilidade imagens de células em Scaffolds não-transparentes - usando o exemplo de um Titanium Implant Novel malha

10.2K visualizações

⸱

DOI:

10.3791/54537

⸱

7 de setembro de 2016

Gauri Tendulkar¹ , Phillip Grau¹ , Patrick Ziegler¹^,² , Alfred Buck, Sr.³ , Alfred Buck, Jr.³ , Andreas Badke¹^,² , Hans-Peter Kaps¹^,² , Sabrina Ehnert¹ , Andreas K. Nussler¹

¹Siegfried Weller Institute for Trauma Research at the BG Trauma Center, Eberhard Karls Universität Tübingen, ²Department of Orthopaedics, BG Trauma-Center, ³Buck GmbH and Co.KG

Neste artigo

Resumo

Aqui nós apresentamos uma técnica de imagem fluoróforo base para detectar a viabilidade celular em um andaime de titânio não-transparente, bem como para detectar vislumbres das impurezas de andaime. Este protocolo soluciona o problema de imagiologia de interacções célula-célula ou célula-metal em andaimes não transparentes.

Resumo

A degeneração do disco intervertebral e a hérnia de disco são uma das principais causas de dor lombar. A depleção da matriz extracelular, culminando na extrusão do núcleo pulposo (NP), leva à destruição do disco intervertebral. Os tratamentos cirúrgicos atualmente disponíveis reduzem a dor, mas não restauram a funcionalidade mecânica da coluna. A fim de preservar as características mecânicas da coluna vertebral, a substituição total do disco ou núcleo tornou-se um grande interesse. No entanto, essa era da artroplastia ainda está em um estado imaturo, uma vez que nenhum dos produtos existentes foi avaliado clinicamente.

Este estudo pretende testar a biocompatibilidade de um novo implante de núcleo feito de fios de titânio tricotados. Apesar de todas as vantagens mecânicas, o material tem seus limites para a análise óptica convencional, pois o implante resultante não é transparente. Aqui apresentamos uma estratégia que descreve a visualização in vitro, rastreamento e teste de viabilidade de células osteocondro-progenitoras no andaime. Este protocolo pode ser usado para visualizar a eficiência do protocolo de limpeza, bem como para investigar a biocompatibilidade desses e de outros andaimes não transparentes. Além disso, este protocolo pode ser usado para mostrar o padrão de adesão das células, bem como a viabilidade celular e as taxas de proliferação no andaime. Este ensaio de teste de biocompatibilidade in vitro fornece uma ferramenta propícia para analisar a interação célula-material em scaffolds não transparentes e opacos.

Introdução

dor lombar crônica é uma doença multifatorial. O interesse em uma opção de tratamento minimamente invasivo para a doença degenerativa do disco tem crescido desde a década de 1950. Até hoje, a fusão de múltiplos segmentos da coluna vertebral é o tratamento mais amplamente utilizado. Desde então, este método muitas vezes leva a limitações na mobilidade do segmento acometido ^1,2, exploração da era artroplastia tornou-se um grande interesse. Avanços significativos em substituição total substituição do disco e do núcleo tornou-se uma boa alternativa para o tratamento da dor lombar crônica ^1. Apesar do enorme progresso, nenhum dos métodos foi clinicam....