Symmetric Bihemispheric Postmortem Cérebro de corte para o Estudo de Saúde e Condições Patológicas cerebral em humanos

Resumo

procedimentos de corte do cérebro organizados são necessários para correlacionar fenômenos neuropsiquiátricos específicos com diagnósticos neuropatológicos definitivas. estacas cerebrais são realizados de forma diferente com base em diversas contingências clínico-acadêmico. Este protocolo descreve um procedimento de corte cérebro bihemispheric simétrica para investigar diferenças hemisféricas de patologias do cérebro humano e maximizar as técnicas biomolecular / neuroimagem atuais e futuras.

Resumo

Neuropathologists, às vezes, se sentem intimidados pela quantidade de conhecimento necessário para gerar diagnósticos definitivos para os fenômenos neuropsiquiátricos complexas descritas nesses pacientes para os quais foi pedida uma autópsia cerebral. Embora os avanços das ciências biomédicas e de neuroimagem revolucionaram o campo neuropsiquiátrica, também têm gerado a idéia enganosa de que autópsias cerebrais têm apenas um valor de confirmação. Esta falsa idéia criada uma redução drástica das taxas de autópsia e, consequentemente, uma possibilidade reduzida de realizar investigações neuropatológicos mais detalhadas e extensas, que são necessários para compreender vários aspectos normais e patológicos ainda desconhecidas do cérebro humano. O método inferencial tradicional de correlação entre fenômenos neuropsiquiátricos observados e correspondente localização / caracterização de suas possíveis correlações neuro-histológicos continua a ter um valor inegável. No contexto da neuropsychidoenças atric, o método clínico-patológico tradicional ainda é a melhor metodologia possível (e muitas vezes o único disponível) para vincular recursos neuropsiquiátricos únicas para os seus substratos neuropatológicos correspondentes, uma vez que se baseia especificamente sobre a avaliação física direta de tecidos cerebrais. A avaliação dos cérebros post-mortem é baseado no cérebro procedimentos que variam entre os diferentes centros de neuropatologia corte. estacas do cérebro são realizadas de forma relativamente extensa e sistemática com base nas diversas contingências clínicos e acadêmicos presentes em cada instituição. A metodologia de corte cerebral bi-hemisférica anatomicamente mais inclusiva e simétrica deve pelo menos ser usada para fins de investigação na neuropatologia humana para investigar de forma coerente, em profundidade, as condições normais e patológicas com as peculiaridades do cérebro humano (ou seja, a especialização hemisférica e lateralização para específica funções). Um tal processo proporcionaria uma Colle mais abrangentecção de cérebros neurologicamente bem caracterizados disponíveis para técnicas biotecnológicas e de neuroimagem atuais e futuras. Nós descrevemos um procedimento de corte cerebral bi-hemisférica simétrica para a investigação das diferenças hemisféricas de patologias do cérebro humano e para uso com corrente, bem como técnicas biomolecular / neuroimagem futuras.

Introdução

Neuropathologists ter o privilégio científica, honra intelectual, e a obrigação de diagnóstico para avaliar os cérebros humanos. Por muitas décadas, descrições clínicas detalhadas de doenças cerebrais e grandes esforços para individualizar suas possíveis correlações neuro-histológicos em cérebros post-mortem humanos têm sido realizadas. Historicamente, esses esforços representou a modalidade mais produtiva através da qual as ciências médicas, e neurologia em particular, avançou na era moderna. Graças a neuropathologists anteriores eminentes e sua dedicação, determinação, bolsa de estudos, e espantosa capacidade de discriminar entre tecidos cerebrais normais e anormai....

Protocolo

Procedimentos envolvendo tecidos humanos pós-morte foram revistos pelo conselho de revisão institucional e isentos ao abrigo do 45 CFR (Code of Federal Regulations).

NOTA: O protocolo descreve um procedimento de corte cérebro bihemispheric simétrica para a avaliação postmortem cérebro finalizado para estudos neuropatológicos em seres humanos. As descrições detalhadas dos aparelhos, instrumentos, materiais e suprimentos necessários para executar o corte cérebro humano serão excluídos. Os materiais e suprimentos para dissecções cérebro são selecionados a critério do único investigador e são baseadas em ferramentas de autópsia permitidos ou autorizados em cada instituição de pesquis....

Resultados

Protocolo Comprimento

O tempo gasto para um único procedimento de corte simétrica bihemispheric fixo cérebro é estimado em 1 h (excluindo o tempo gasto a criação de mesa de dissecação, ferramentas e cortar superfícies; rotulagem;. Etc). O tempo requerido para um único bi-alternada simétrica hemisférica cerebral congelado e fixado procedimento de corte é estimada em 2 h. Pode demorar pelo menos entre 4-6 semanas para obte.......

Discussão

Este método de corte cerebral pode ser adaptada às necessidades específicas de cada laboratório neuropatologia (por exemplo, por redução do número de regiões cerebrais para avaliar, para cada hemisfério), mantendo o procedimento de corte simétricas bihemispheric como uma das suas características principais. Este protocolo proposto pode ser utilizado para procedimentos de rotina (centros neuropatológicos orientados para a pesquisa) ou apenas quando necessárias (estudos orientados clinicamente específicos). Ele pode ser u.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Cópia do consentimento informado assinado permitindo autópsia e doação de cérebro para uso em pesquisa.
História clínica detalhada do sujeito, que deve incluir uma descrição detalhada de quaisquer sintomas e sinais neurológicos e psiquiátricos.
Gravações de vídeo médicas ou não médicas, quando disponíveis (especialmente úteis no campo dos distúrbios do movimento). Parente mais próximo s consentimento necessário.
Neuroimagem, neurofisiologia, neuropsiquiátrica e escalas de avaliação ou clínico-métricas.
Dados genéticos e de história familiar. Revisão de relatórios genéticos, se doenças neurogenéticas foram diagnosticadas.
Recipiente de histologia	ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES	64233-24
de histologia	VWR	18000-142 (laranja)
de histologia	VWR	18000-132 (navy)
Cabos de faca e lâminas descartáveis	ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES	62560-04
Lâminas longas	MICROSCOPIA ELETRÓNICA SCIENCES	62561-20
Lâminas de Faca Descartáveis	MICROSCOPIA ELETRÔNICA SCIENCES	72040-08
Lâminas de bisturi	MICROSCOPIA ELETRÔNICA SCIENCES	72049-22
Accu-Punch 2 mm	MICROSCOPIA ELETRÔNICA SCIENCES	69038-02;
Recipientes de Poliestireno - Estéril	ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES	64240-12
Placa de Dissecção	ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES	63307-30
Solução de formalina, tamponada neutra, 10%	Sigma-Aldrich	HT501128 SIGMA
Hematoxylin Solution, Gill No. 2	Sigma-Aldrich	GHS280  SIGMA
Eosin Y solução, aquosa	Sigma-Aldrich	HT1102128  SIGMA
anti-beta-amilóide	Covance, Princeton, NJ	SIG-39220	1:500
anti-tau	Thermo Fisher Scientific	MN1020	1:500
anti-alfa-sinucleína	Abcam	ab27766	1:500
anti-fosfo-TDP43	Cosmo Bio Co.	TIP-PTD-P02	1:2000
Câmera Digital	Qualquer
Máquina de Selagem por Impulso de Cabeça	Grainger	5ZZ35