Método confiável para avaliar a germinação de sementes, dormência, e Mortalidade em condições de campo

Summary

Aqui apresentamos um protocolo para avaliar a sobrevivência de sementes, germinação e dormência em condições de campo, utilizando enterrado, tiras de sementes rotuladas e testes de viabilidade cloreto de tetrazólio (TZ).

Abstract

Descrevemos técnicas para aproximar a dinâmica do banco de sementes ao longo do tempo usando Helianthus annuus como exemplo de espécie de estudo. Tiras de tecido de poliéster permeável e cola podem ser dobradas e coladas para construir uma faixa de compartimentos que abrigam sementes e informações de identificação, permitindo o contato com lixiviado do solo, água, microorganismos e temperatura ambiente. As tiras podem ser construídas com uma ampla gama de números e tamanhos de compartimentos e permitem que o pesquisador abrigue uma variedade de genótipos dentro de uma única espécie, espécies diferentes ou sementes que passaram por tratamentos diferentes. Ao contrário dos pacotes de sementes individuais, as tiras são mais facilmente recuperadas como uma unidade. Embora os pacotes replicados possam ser incluídos em uma faixa, diferentes faixas podem atuar como blocos ou podem ser recuperadas em momentos diferentes para observação do comportamento da semente ao longo do tempo. Usamos uma pistola de cola de alta temperatura para delinear os compartimentos e selamos as tiras assim que a semente e as etiquetas identificando os tempos de bloqueio e remoção foram inseridas. As tiras de sementes foram então enterradas no campo na profundidade desejada, com o local marcado para posterior remoção. Predadores de animais escavadores foram efetivamente excluídos pelo uso de uma cobertura de tecido de malha metálica na superfície do solo. Após o intervalo de tempo selecionado para o enterro, as tiras foram desenterradas e as sementes foram avaliadas quanto à germinação, dormência e mortalidade. Embora as sementes claramente mortas possam ser distinguidas das vivas não germinadas a olho nu, as sementes dormentes foram identificadas de forma conclusiva usando um teste colorimétrico padrão de cloreto de tetrazólio para viabilidade das sementes.

Introduction

O objetivo geral deste método é avaliar de forma confiável sobrevivência de sementes ao longo do tempo em condições de campo.

Bancos de sementes do solo são uma reserva de sementes dispersas e viáveis ainda não germinadas distribuídas tanto na superfície do solo, dentro da maca superfície ou dentro do perfil do solo, que podem persistir transitoriamente ou por muitos anos ^1,2. Quando os métodos de enterro de sementes semelhantes aos aqui apresentados foram aplicados a um estudo de 17 anos usando várias dezenas de espécies, sementes viáveis foram encontradas em muitas das espécies testadas ^3. Dormência das sementes é ....

Protocol

1. Reunir Semente de múltiplas espécies ou cruzamentos controlados de uma única espécie

Nota: Este exemplo de sementes utilizado, a partir de 15 tipos cruzadas no âmbito da annuus Helianthus espécies (girassol), utilizando selvagem, híbrido, e tipos de culturas como o maternal (produtoras de sementes) pai.

1. No final da estação de crescimento, recolher cabeças de sementes maduras em sacos etiquetados. Sementes limpas do joio e local de sementes em envelopes etiquetados com o tipo de cruz parental no formato padrão (ou seja, maternal x paterna).
2. sementes a granel juntos em grandes envelopes utilizando quantidades iguais de ....

Results

Tipos cruzadas com variada percentual de parentesco e cultura alelo materno (Tabela 1) diferiu através datas de remoção em percentagem germinadas, não germinadas, e semente morta (Fig. 2 e 3). Usando testes TZ das sementes não germinadas, encontramos algumas sementes verdadeiramente dormentes na segunda remoção (início da primavera) (Tabela 2), enquanto que todas as sementes não germinadas pela terceira remoção (primaver.......

Discussion

Aqui nós apresentamos métodos para usar tiras de enterro de sementes para observar a germinação das sementes, dormência e mortalidade de diversos stocks de sementes em períodos de tempo pré-selecionados no campo. As vantagens da utilização de tiras, em vez de pacotes individuais se encontram em (1) a velocidade da tira e a construção do compartimento sobre a criação de pacotes individuais; e (2) a facilidade e a velocidade de remoção de vários compartimentos em um movimento sem o perigo de omitir um pacote ou removendo .......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Envelopes de moedas pequenas	Qualquer
envelope de moedas grandes	Qualquer
mosquiteiro de poliéster de malha fina	Qualquer
pistola de cola de alta temperatura	Qualquer
cola em bastão de alta temperatura recargas	Qualquer
marcador permanente industrial	Qualquer
etiquetas de jardim de plástico	Qualquer
tesoura	Qualquer
	Qualquer
malha de metal pano rígido	Qualquer
bandeiras de agrimensor, várias cores	Qualquer
jornal molhado	Qualquer
refrigerador	Qualquer
papel mata-borrão	Qualquer
placa de Petri	Qualquer
câmara de crescimento controlada por temperatura	Qualquer
lâmina de barbear	Qualquer
placa de Petri	Qualquer
cloreto de tetrazólio	Qualquer
água	Qualquer
calor incubadora	Qualquer