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Artigo de método

Manipulação neurofarmacologia de contido e vôo livre abelhas do mel,

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DOI:

10.3791/54695

⸱

26 de novembro de 2016

 ,  ,  , 

* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

Este manuscrito descreve vários protocolos para a administração de agentes farmacológicos para as abelhas, incluindo métodos não invasivos simples para abelhas de vôo livre, bem como variantes mais invasivos que permitem que o tratamento localizado precisa de abelhas dispositivos de retenção.

Resumo

As abelhas do mel demonstrar capacidades de aprendizagem surpreendentes e comportamento social avançada e comunicação. Além disso, o seu cérebro é pequeno, fácil de visualizar e estudar. Portanto, as abelhas têm sido um modelo preferido entre os neurobiólogos e neuroethologists para estudar as bases neurais do comportamento social e natural. É importante, no entanto, que as técnicas experimentais usadas para estudar abelhas não interferir com o comportamento a ser estudada. Devido a isto, tem sido necessário o desenvolvimento de uma variedade de técnicas para a manipulação farmacológica de abelhas de mel. Neste artigo é demonstrar os métodos para o tratamento de abelhas produtoras de mel contido ou livre de voar com uma vasta gama de agentes farmacológicos. Estes incluem ambos os métodos não invasivos, tais como tratamentos orais e tópicos, assim como métodos mais invasivos que permitem a entrega da droga precisa em qualquer forma sistémica ou localizada. Finalmente, discutimos as vantagens e desvantagens de cada método e descreverobstáculos comuns e como melhor superá-los. Concluímos com uma discussão sobre a importância de adaptar o método experimental para as questões biológicas, em vez do contrário.

Introdução

Desde Karl von Frisch elucidado sua linguagem de dança 1, as abelhas têm permanecido uma espécie de estudo populares para pesquisadores em comportamento animal e neurobiologia. Nos últimos anos uma miríade de novas disciplinas surgiram na interseção desses dois campos, e várias outras disciplinas (por exemplo, biologia molecular, genômica e ciência da computação) surgiram ao lado deles. Isto levou a um rápido desenvolvimento de novas teorias e modelos para a compreensão de como o comportamento resulta de atividade dentro do sistema nervoso. Por causa do estilo de vida único, rico repertório comportamental, e facilidade de manipulação experimental ....

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Protocolo

1. Drug Administration para as abelhas aproveitou

  1. O tratamento oral
    1. Preparar uma solução 1,5 M de sacarose através da mistura de 257 g de sacarose com 500 ml de água (que é mais fácil de dissolver esta quantidade de sacarose em água a ferver). Armazenamento da solução de sacarose a 4 ° C até à sua utilização.
      NOTA: Solução de sacarose fornece um ambiente muito hospitaleiro para certos microorganismos e, portanto, facilmente torna-se contaminado e intragável para as abelhas. solução de sacarose em massa pode ser dividido em alíquotas e armazenado a -20 ° C até à sua utilização.
    2. Decidir sobre uma dose droga apropria....

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Resultados

Uma selecção de resultados representativos para os métodos acima descritos são representados, principalmente para demonstrar que os métodos de permitir que os agentes farmacológicos para chegar ao cérebro e afectar o comportamento das abelhas de mel.

efeitos específicos sobre processos cerebrais podem ser facilmente obtidos após a injecção tórax.

Como os agentes farmac.......

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Discussão

Os métodos descritos acima permitir um tratamento simples, eficaz e robusto de qualquer vôo livre ou abelhas aproveitado. Estes métodos são compatíveis com diversos paradigmas experimentais e questões biológicas (Tabela 1). Todos os métodos livre de vôo pode ser facilmente aplicado para as abelhas aproveitado. O inverso é menos bem sucedido, no entanto, uma vez restrição temporária e métodos invasivos de tratamento muitas vezes pode comprometer a capacidade de vôo das abelhas.

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Divulgações

Os autores não têm nada a divulgar.

Agradecimentos

Este projeto foi financiado pela DP0986021 de concessão ARC e pela 585442 de concessão do NHMRC. A ABB é apoiada por uma ARC Future Fellowship (FT140100452). O JAP é apoiado por uma bolsa iMQRES concedida pela Macquarie University e por um DAAD-Doktorandenstipendium concedido pelo Serviço Alemão de Intercâmbio Acadêmico. O JMD é apoiado pelo CNRS e pela Universidade Paul Sabatier.

....

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
SucroseSigma-AldrichS8501Qualquer fornecedor fará
Cloreto de SódioSigma-AldrichS7653
Cloreto de PotássioSigma-AldrichP9333 
Cloreto de magnésio hexahidratadoSigma-AldrichM2670
Cloreto de cálcio di-hidratadoSigma-AldrichC8106
Dextrose monohidratadaSigma-Aldrich49159
Tampão fosfato salino (PBS)Sigma-AldrichP4417
Cera de proteçãoDentaurum124-305-00
HEPESSigma-AldrichH3375
dimetilformamidaSigma-AldrichD4551
95% EtanolSigma-Aldrich493511
Capilar de vidroWPI1B100F-3
23 G Agulha NanoFilWPINF33BV-2
Forsceps muito finoDumont0208-55-PO
Eletrodo extratorSRI2001
Microinjetor FemtoJetEppendorf5247 000.01
EicosaneSigma-Aldrich219274
micromanipulador manualBrinkmann InstrumentenbauMM-33
micromanipulador eletrônicoLuigs & Neumann Feinmechanik + ElektortechnikUnidade júnior XYZ
estereomicroscópioLeicaM80
ferro de soldaWellerWESD51
Dextran, Alexa Fluor 546, 10.000 MWThermoFisher ScientificD-22911
Dextran, Alexa Fluor 568, 10.000 MWThermoFisher ScientificD-22912
placa de Petri pequenaÓleo mineral Sigma-AldrichP5481
Sigma-AldrichM5904
50 mlde 339652científica ThermoFisher
Suprimentos
Suporte e disjuntor da lâminaSuprimentos entomológicos australianosE130
Lâminade barbear de dois gumes de penasThermoFisher Scientific50-949-135
de nicromoQualquer fornecedor fará
FiosQualquer fornecedor fará
Tinta modeloTamiya USADepende da cor
Dispensador de repetiçãoEmpresa HamiltonPB-600-1
Seringa de vidroWPINANOFIL
sistema de visualização de fluorescênciaNightseaSFR-GR
gratículaProSciTechS8014-24
microcapilar com suporteDrummond1-000-0010
SiliconeQualquer fornecedor fará
TermoparDigitechQM-1324
MicropipetaEppendorf
Tubo de centrífuga Pinça entomológicos australianosFio elétricos líquido

Referências

  1. Frisch, K. . von B. ees Their Vision, Chemical Senses, and Language. , Cornell University Press. Itacha, NY. (1971).
  2. Giurfa, M. The amazing mini-brain: lessons from a honey bee. Bee World. 84 (1), 5-18 (2003).
  3. Giurfa, M.

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Reimpressões e permissões

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