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Microplásticos amostragem na superfície do mar pela rede manta é um método amplamente utilizado para a amostragem de microplásticos na superfície do mar, mas até agora não houve nenhuma metodologia unificada. Um grande volume de água pode ser filtrada através da rede manta, assim, a possibilidade de prender um número relevante de microplásticos é alta e os resultados são percebidos para ser confiável. Comparabilidade dos resultados entre diferentes amostras é assegurada pela normalização. No nosso caso, as concentrações foram relacionados com a área de amostragem multiplicando distância de arrasto por a largura horizontal da abertura da rede. Outra opção é a utilização de um medidor de fluxo, fixada na abertura líquido. O uso de um medidor de fluxo é possível, uma vez que o líquido de manta com as suas abas laterais é muito estável sobre a superfície do mar e, por conseguinte, movimentada sobre as ondas é mínima. Um medidor de fluxo regista o volume de água filtrada e, portanto, permite a normalização de resultados por volume de água de amostragem 16.
As redes de manta utilizadas com mais frequência tem em torno de 300 mm de tamanho de malha e são 3-4,5 m de comprimento. Estas dimensões foram optimizadas para evitar o entupimento da rede e para permitir que a amostragem de um volume de água tão grande quanto possível. velocidade de pesca de arrasto é recomendado para ser entre 2-3 nós, mas é dependente da altura de onda, velocidade do vento e correntes marítimas. É muito importante que a rede manta está sob supervisão o tempo todo durante a amostragem e se ele começa hopping, a velocidade de arrasto deve ser reduzida. O tempo de arrasto é recomendado para ser de cerca de 30 minutos, mas depende concentrações seston. Pode acontecer que, por vezes, seston entope a rede manta. Neste caso, a pesca de arrasto deve ser interrompido imediatamente, caso contrário, as partículas de microplástico pode ser perdido ea rede pode ficar danificado. Manta líquido é o mais frequentemente fixo a partir do lado do navio. Esta é também a opção mais adequado, enquanto o líquido de manta é certamente fora da zona de passagem. Em algumas pesquisas net manta foi fixado a partir da popa da embarcação17, 18, mas, nesse caso, você tem que ter certeza de que a rede está fora da zona de esteira. A distância, em que a rede de arrasto é ajustado para amostragem, deve ser determinada individualmente, uma vez que a zona de turbulência causada pelo recipiente varia entre o tamanho do recipiente e da velocidade da embarcação 19, 20.
Separação de partículas microplástico das amostras da superfície do mar é mais frequentemente feito apenas por identificação visual 21. As partículas com mais de 1 mm, podem ser identificados facilmente a olho nu, enquanto as partículas mais pequenas do que 1 mm de exigir a utilização de um estereomicroscópio. Para reduzir a possibilidade de confundir as partículas não-plástico com as de plástico, utilizando a luz de polarização em oculares é recomendado. A possibilidade de erro de identificação de partículas de plástico fica maior com partículas menores. Assim, as partículas> 0,5 milímetros só pode ser identificada visualmente 21, pela utilização de microscópio estereoscópico. Para partículas mais pequenas do que 0,5 milímetrosum método adicional, mais preciso é necessário, por exemplo micro espectroscopia de ATR-FTIR 21.
Durante o processo de separação microplásticos a partir da amostra a possibilidade de contaminação da amostra com os filamentos no ar é muito alta. Por esta razão, controlar placas de Petri deixada em aberto na mesa de trabalho são fortemente recomendados para a identificação de potenciais contaminantes partículas transportadas pelo ar. Nomeadamente, a qualidade dos dados depende fortemente: 1) a precisão da pessoa que trabalha com a amostra, 2) a qualidade e ampliação do microscópio estereoscópico, e 3) a quantidade de matéria orgânica na amostra 16. Após a identificação visual é fortemente recomendada para analisar as partículas classificadas com uma das técnicas disponíveis para a identificação química do material 8.
Existem vários métodos para a identificação de polímero, entre os quais a espectroscopia de infravermelho e espectroscopia Raman são os mais frequenqüentemente utilizado 22. espectroscopia FTIR e Raman são técnicas complementares e sua precisão é semelhante. No nosso protocolo, o FTIR e espectroscopia de FTIR com micro "reflectância total atenuada" (ATR) são apresentados. Eles são simples de usar e permitem resultados rápidos e precisos. Polímeros plásticos possuem espectros altamente específica de infravermelhos (IR), com padrões de bandas distintas, tornando assim espectroscopia de IV uma técnica ideal para a identificação de microplásticos 21. A energia de radiação IV excita uma vibração molecular específico quando interagindo com uma amostra, que permite a medição dos espectros de infravermelho característico 22. Espectroscopia FTIR também pode fornecer informações adicionais sobre as partículas, tais como intensidade da oxidação 23 e nível de degradação 24. Enquanto ATR-FTIR é adequado para a identificação química das partículas de maior dimensão (> 0,5 mm), micro espectroscopia de ATR-FTIR pode fornecer informações sobre a estrutura química de partículas & #60; 0,5 mm, uma vez que combina a função de um microscópio e um espectrómetro de infravermelhos.
Antes de utilizar FTIR e espectroscopia FTIR micro, partículas microplástico tem que ser previamente seca, uma vez que a água absorve fortemente a radiação IR 22, e purificada, caso em que são cobertos com biofilmes e / ou outros aderentes orgânicos e inorgânicos, que podem influenciar os espectros de IV. A maneira mais não-invasiva para purificar amostras é de agitação e lavagem com água fresca 25. Se isso não for suficiente, então recomenda-se a utilização de peróxido de hidrogénio a 30%. Todos os outros métodos podem ter efeitos negativos sobre as partículas de microplástico (por exemplo, limpeza ultra-sônica pode ainda quebrar partículas, fortes de soluções ácidas ou alcalinas podem danificar vários polímeros plásticos, etc.) e, portanto, seu uso não é recomendado. Mais promissora é a utilização de uma digestão enzimática sequencial como um passo de purificação amigável plástico. A purificação utilizando enzimas diferentes técnicas (por exemplo lipase, umamylase, proteinase, quitinase, celulase, proteinase-K) tem sido aplicada com sucesso para a redução de uma matriz biológica do plâncton e assim provou ser uma técnica valiosa para minimizar artefactos de matriz durante FTIR medições de espectroscopia 22.
Separação de microplásticos por identificação visual e identificação química das partículas seleccionadas são processos extremamente demorados. Este trabalho tem de ser feito por uma pessoa precisa e paciente que tem experiência com oculares, não apenas no reconhecimento das partículas de plástico, mas também no reconhecimento de matéria biológica. Mesmo uma pessoa experiente não pode discriminar todas as partículas de microplástico potenciais de forma inequívoca a partir de quitina ou diatomáceas fragmentos 22. Portanto, a taxa de erro de classificação visual varia de 20% 26 a 70% 21 e aumenta com a diminuição do tamanho de partícula.