modelagem tradicional de obstrução da saída da bexiga parcial em roedores é cheio com a mortalidade dos animais. Uma lesão desnervação de dissecção em torno da uretra proximal e do colo da bexiga também é de grande preocupação. Nós desenvolvido e avaliado um modelo de obstrução mid-uretral segura e confiável, evitando as deficiências do modelo tradicional.
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Artigo de método
-Nervo poupadores Mid-obstrução uretral (Nemo) em fêmeas pequenos roedores
Neste artigo
Resumo
Resumo
obstrução da saída da bexiga parcial (pBOO) tem alta prevalência, causas carga paciente significativa, e os custos de saúde imensos. O modelo animal mais comum para investigar remodelação da bexiga em pBOO são roedores do sexo feminino submetidos a obstrução parcial na uretra proximal. Variabilidade no grau de obstrução e a mortalidade dos animais são os principais preocupações com obstrução proximal. Além disso, dissecando em torno da uretra proximal e do colo da bexiga compromete inervação da bexiga.
Nós desenvolvemos um modelo de obstrução mid-uretral poupadores de nervo (Nemo) para pBOO evitando as desvantagens do modelo tradicional. Nós nos aproximamos da uretra apenas inferior à sínfise púbica, o que evitou a necessidade de laparotomia, bem como para dissecção nesta área; Também, o esfíncter uretral estriado permaneceu intacta. Foi realizada nemo em ratos Sprague-Dawley do sexo feminino (12 obstruções, 6 animais sham), bem como em ratinhos fêmea C57 / BL6 (20 obstruçãos, 18 animais sham). Depois de duas semanas, avaliamos a função da bexiga, a massa da bexiga, e massa corporal.
Nós não tivemos mortalidade entre ratas obstructed- ou operados por simulação; tal como descrito para o proximal tradicional pBOO-método, que amarrado a sutura em torno da uretra proximal e uma haste de metal colocado temporariamente 0,9 milímetros. Nemo induziu um aumento de 85% em massa da bexiga após duas semanas, o volume médio de urina residual foi de 0,4 mL em ratos parcialmente obstruída enquanto apenas 0,03 ml em animais sham. Em ratinhos, foram testados 3 tamanhos de cânulas que colocados ao longo da uretra quando atar o fio de sutura. Descobrimos que a utilização de uma cânula de calibre 27 resultou em mais de mortalidade dos animais 50%; colocação da cânula de calibre 25 não deu a resposta desejada no aumento da massa da bexiga; utilizando uma cânula de calibre 26, produziu resultados favoráveis com a mortalidade mínima dos animais (1/8) ainda um aumento significativo de 2 vezes em massa da bexiga.
Introdução
Parcial obstrução da saída da bexiga (pBOO) tem uma prevalência elevada e pode resultar em disfunção da bexiga grave 1; o espectro varia de malformações congénitas, tais como válvulas de uretra posterior ou hypospadias, mais de estreitamento uretral adquiridos a hiperplasia benigna da próstata. O último que afecta mais de 30% dos homens de sessenta anos e mais velhos 2. Grande fardo paciente e os custos de saúde associados com imensas pBOO justificar o esforço de investigação considerável colocar em estudar a remodelação da bexiga em resposta à resistência aumentada saída 3. De 2006 até 2015, mai....
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Protocolo
O protocolo experimental seguinte foi aprovado pelo comitê de cuidados com os animais da instituição.
1. Nemo em ratas
- Preparação
- Colocar um rato fêmea Sprague-Dawley pesando cerca de 200 g sob anestesia de isoflurano a 3%, peso do animal, e barbear e desinfectar a área pré-púbica 3 vezes utilizando uma limpeza cirúrgica iodo.
- Em uma almofada de aquecimento, fita membros posteriores e cauda para baixo e cateterização da bexiga com um angiocateter de calibre 20, que também é delicadamente gravada para baixo para evitar o deslizamento.
- dissecação
- Us....
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Resultados
-Nervo poupadores Mid-obstrução uretral (Nemo) em ratas
Mortalidade
Foi realizada uma obstrução mid-uretral em mais de 40 ratas tão longe e não tinha mortalidades.
massa da bexiga
Média massa bexiga relativa (bexi.......
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Discussão
A mortalidade dos animais é uma das principais preocupações do modelo tradicional de pBOO na uretra proximal, em 15% ou mais em muitos relatórios 10, 11, 13. Nemo parece ter mortalidade mínima quando aplicado em ratos fêmeas. obstrução uretral proximal em murganhos é tecnicamente mais exigente do que em ratos e, portanto, ainda mais propensos a complicações. Utilizando uma cânula de calibre 26 como um espaço re.......
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Divulgações
Os autores não têm nada a divulgar.
Agradecimentos
O trabalho foi financiado por uma bolsa operacional do CHIR (DJB).
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Rato fêmea | Rato de Dawley Charles-River Canada | (Crl:SD); Código da cepa: 400 | cerca de 200 g |
| Vaporizador de isoflorano | Benson medical industries inc. | Isoflurano TEC III; código do produto: 53-T3ISO | |
| Isoflorano | Fresenius Kabi Saúde Animal | Isoflorano; código do produto CP0406V2 | Frasco de 250 mL |
| Bisturi descartável | Ted Pella, Inc. | # 15 Bisturis estéreis de aço inoxidável; número de catálogo 549-9-15S | |
| Pinça de microscopia | Ted Pella, Inc. | Pinça de Microscopia Aesculap, Finepoint, 115mm; número do produto 5443 | |
| Pinça Adson | Ted Pella, Inc. | Pinça de Dissecção Aesculap Adson, Curva, 120mm; número do produto 5002-9 | |
| Tesoura cirúrgica curva | Ted Pella, Inc. | Tesoura Cirúrgica, Curva, S/S, 105mm; número de catálogo 1376 | |
| 0,9 mm haste de metal inox | goodfellow.com | Aço Inoxidável - AISI 316L Diâmetro do fio:0,9mm; código de encomenda 911-684-65 | |
| Ganchos de pele - auto-fabricados em aço inox | goodfellow.com | Aço Inoxidável - AISI 316L Diâmetro do fio:0,9mm; código de encomenda 911-684-65 | |
| 4-0 Sutura de seda | esutures.com | 4-0 Sofsilk preto 98" fio; número do produto LS640 | |
| 5-0 Vicry sutura | esutures.com | 5-0 Vicryl não tingido 27" RB-1 taper; número do produto J213H | |
| Porta-agulha | Medsupplier.com | Integra Miltex Carb-N-Sert Baumgartner Porta-agulhas - 5 1/2"; código do produto SKU NEE4484-8-40TC SKU NEE4484-8-40TC SKU NEE4484-8-40TC | |
| Temgesic (Buprenorfina) | primeiro suprimento veterinário | Buprenex 0.3MG/ml em amperes; item #075701 | |
| Seringa de 1 mL com agulha de 27 G | Fisher Scientific | BD Seringa Tuberculina, BD 309623 | |
| 20 G Angiocath | Fisher Scientific | Andwin Scientific ANGIOCATH 20 GA; Nº de catálogo. | |
| Dieta de recuperação | clearh2o | DietGel 31M; 72-08-5022 | |
| C57Bl / 6 camundongos fêmeas | Charles-River Canada | C57BL / 6 Mouse (C57BL / 6NCrI); Código da cepa: 027 | cerca de 18 g |
| 24 G angiocath | Fisher Scientific | Hanna Pharmaceutical Supply Co., Inc. IV CATH ANGIOCATH 24GX3/4IN; Nº de catálogo. | |
| 5-0 Ethibond | esutures.com | 5-0 Ethibond verde 30" RB-1 cone; número do produto X550H | |
| 26 G agulha de seringa | Sigma-Aldrich | BD Precisionglide, Calibre 26; z192392 | |
| Solução salina normal | Baxter | 0,9% Cloreto de sódio injetável, USP, 100 mL MINI-BAG; código do produto 2B0043 |
Referências
- Andersson, K. E. Storage and voiding symptoms: pathophysiologic aspects. Urology. 62 (5), 3-10 (2003).
- Boyle, P., et al. The prevalence of lower urinary tract symptoms in men and women in four centres. The UrEpik study. BJU Int. 92 (4)....
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Reimpressões e permissões
