É necessária uma assinatura do JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou inicie seu teste gratuito.

Artigo de método

In Vivo Tracking of Edema Development and Microvascular Pathology em um Modelo de Malária Cerebral Experimental Usando Ressonância Magnética

6.1K visualizações

DOI:

10.3791/55334

8 de junho de 2017

Neste artigo

Resumo

Descrevemos um modelo de camundongo de malária cerebral experimental e mostramos como a patologia inflamatória e microvascular pode ser rastreada in vivo usando ressonância magnética.

Resumo

A malária cerebral é um sinal de doença grave da malária e muitas vezes é um prenúncio da morte. Embora o tratamento agressivo possa salvar vidas, a detecção da malária cerebral pode ser difícil. Apresentamos um modelo experimental de camundongo de malária cerebral que compartilha múltiplas características da doença humana, incluindo edema e patologia microvascular. Usando ressonância magnética (MRI), podemos detectar e rastrear a ruptura da barreira hematoencefálica, o desenvolvimento de edema e o subsequente inchaço cerebral. Descrevemos várias técnicas de ressonância magnética que podem visualizar essas alterações patológicas pertinentes. Assim, mostramos que a ressonância magnética representa uma ferramenta valiosa para visualizar e rastrear alterações patológicas, como edema, inchaço cerebral e patologia microvascular, in vivo.

Introdução

A malária é um problema de saúde global significativo. 1 A malária grave caracteriza-se, em parte, por envolvimento cerebral e muitas vezes é um fraco fator prognóstico. O envolvimento cerebral é comum em crianças menores de cinco anos nas áreas de alta transmissão da malária e representa a principal causa de morte relacionada à malária naquela faixa etária. 1 Embora o tratamento agressivo possa salvar a vida, a detecção da malária cerebral, especialmente nos estágios iniciais, pode ser difícil. Os processos patológicos envolvidos na malária cerebral incluem interrupção microvascular e edema cerebral, o que pode levar a....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Protocolo

Todos os experimentos com animais relatados neste artigo foram conduzidos de acordo com as diretrizes padrão da Federação para Associações de Ciência Animal de Laboratório (FELASA) e as diretrizes padrão da Sociedade de Ciência Animal de Laboratório (GV-SOLAS) e foram aprovadas pelas autoridades alemãs locais em Karlsruhe (Regierungspräsidium Karlsruhe , Alemanha). Por favor, note que o nível de biossegurança 2 aplica-se ao trabalho de esporozoítas de mosquito e Plasmodium berghei ANKA.

1. Infecção

  1. Infecte Anopheles stephensi mosquitos com Plasmodium berghei ANKA alimentando -os por 15 minutos em um m....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Resultados

Em ratinhos C57BL / 6, os primeiros sintomas clínicos de ECM podem ser observados entre os dias 6 e 10 após a infecção com esporozoítos de P. berghei ANKA . ECM desenvolve em 60 a 80% dos camundongos infectados e progride rapidamente para coma e morte dentro de 24 a 48 h. Em contraste, os ratos que não desenvolvem ECM morrem após a segunda semana após a infecção por anemia grave por hiperparasitemia. 12

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Discussão

Neste artigo, descrevemos um protocolo de MRI em todo o cérebro para delinear mudanças na malária cerebral experimental. Acreditamos que a ressonância magnética foi subutilizada na pesquisa de malária até o momento e espero que nossos protocolos ajudem outros pesquisadores. Gostaríamos de descrever alguns pontos adicionais que podem ser úteis.

Se os camundongos gravemente doentes forem fotografados, o posicionamento é crucial. Devido ao aumento da pressão intracraniana, os camundongos são su.......

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Divulgações

Os autores declaram não ter conflitos de interesse.

Agradecimentos

A assistência técnica especializada de Miriam Reinig é reconhecida com gratidão. AH recebeu financiamento de um salário pós-doutorado da Faculdade de Medicina da Universidade de Heidelberg. O MP é apoiado por um salário memorável da Fundação Else-Kröner-Fresenius. A AKM é destinatária de um salário de licença de maternidade pela Academia DZIF do Centro Alemão de Pesquisa de Infecções (DZIF). JP é o destinatário de um Centro de Pesquisa Heidelberg para Medicina Molecular (HRCMM) Career Development Fellowship. Além disso, agradecemos a Julia M. Sattler e Friedrich Frischknecht pelo fornecimento de um filme exemplar de movimento esporozoítico.

....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
IsofluranoBaxter1001747para anestesia
DotaremGuebert1086923Gd-DTPA agente de contraste; 0,5 mmol/mL
Amira (Programa de Processamento de Imagem)FEI GroupVersion Amira 5.3.2
MATLAB The MathWorks, Inc.,Lançamento 2012b
Caixa de ferramentas FDT Biblioteca de software doFMRIBhttp://www.fmrib.ox.ac.uk/fsl/fdt/index.html

Referências

  1. World Health Organization. World Malaria Report. , (2014).
  2. Seydel, K. B., et al. Brain swelling and death in children with cerebral malaria. N Engl J Med. 372 (12), 1126-1137 (2015).
  3. Penet, M. F., et al.

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Reimpressões e permissões

Etiquetas

Barreira HematoencefálicaEdema VasogênicoImagem Ponderada em T2Imagem Ponderada em DifusãoAngiografia Time-of-FlightContraste Gd DTPAModelo Experimental em Camundongos