O objectivo deste trabalho e vídeo de instruções é descrever como a expor e remover o cérebro de porco e glândula pituitária pós-morte num estado intacto, adequado para análise macroscópica e histológica subsequente.
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Artigo de método
Exposição do SNC porco para análise histológica: A manual por decapitação, crânio de abertura, e Cérebro Remoção
Neste artigo
Resumo
Resumo
Os porcos têm se tornado cada vez mais popular em grande animal investigação translacional neurociência como um substituto economicamente e eticamente viável para primatas não-humanos. O tamanho grande do cérebro do porco permite o uso de geradores de imagens cerebrais clínica convencionais e a utilização directa e testes de procedimentos e equipamentos neurocirúrgicos de clínica humana. Uma análise mais aprofundada macroscópico e histológico, no entanto, requer exposição post-mortem do sistema de porco nervoso central (SNC) e subsequente remoção do cérebro. Esta não é uma tarefa fácil, como o porco SNC é encapsulado por uma cabeça dura, ósseo e da coluna vertebral. O objectivo deste trabalho e vídeo de instruções é descrever como a expor e remover o cérebro de porco post-mortem e a glândula pituitária num estado intacto, adequado para análise macroscópica e histológica subsequente.
Introdução
estudos de neurociência de translação em suínos têm se tornado cada vez mais popular durante as últimas duas décadas. O grande tamanho do cérebro de porco permite o uso de geradores de imagens cerebrais clínica convencionais e a utilização directa e os ensaios de procedimentos neurocirúrgicos e equipamento de clínica humana 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8. Nos últimos 20 anos, porcos, especialmente porcos ....
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Protocolo
A anestesia dos animais e euthanesia foi realizada em conformidade com o "Princípios de cuidados de animais de laboratório" (publicação NIH No. 86-23, revista 1985) e aprovado pelo Conselho dinamarquês para animal de Ética.
1. Instrumentos
- Recolher os instrumentos apresentados no vídeo e listadas na Tabela de Materiais.
2. decapitação
NOTA: A anestesia foi induzida através de uma injecção intramuscular de 5 ml de midazolam (5 mg / ml) e 5 ml de cetamina (25 mg / mL). 5-10 minutos mais tarde, quando o animal foi profundamente sedados, uma veia da orel....
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Resultados
Para evitar que o material tecido de secar, recomenda-se a armazenar o cérebro removido e pituitária em um frasco cheio com o fixador ou solução salina isotónica imediatamente após análise macroscópica foi realizada. O material de tecido pode ser armazenado no fixador por ano, ao passo que o armazenamento em solução salina isotónica, mesmo no frigorífico, irá conduzir à deterioração do tecido com o tempo.
A pituitária removida.......
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Discussão
A maior parte dos estudos experimentais neuroscience são realizados em espécies animais pequenos, tais como ratinhos e ratos, em que o acesso ao SNC é facilitado por um de espessura da dura-máter e o crânio fina. No entanto, em animais experimentais maiores, como porcos 1, 4, 8, ovinos 32, e primatas não-humanos, a espessura considerável destas estruturas que requer a utilização de instrumentos robustos .......
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Divulgações
Os autores não têm nada a revelar.
Agradecimentos
Os autores reconhecem com gratidão a ajuda hábil de Sra Trine W. Mikkelsen, Sra Lise M. Fitting, e os funcionários da Påskehøjgaard. O Medical Conselho Dinamarquês de Pesquisas, a Fundação Lundbeck, ea Nordisk Fundação Novo suportado financeiramente o estudo.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Cabo de Bisturi Pesado #4 | FST (Ferramentas de Ciência Fina) | 10008-13 | Bom para incisão na pele e remoção de tecidos |
| moles Lâminas de bisturi não estéreis #23 | FST | 10023-00 | |
| #7 | FST | 10007-12 | Ideal para incisão dural e trabalho de precisão |
| Lâminas de bisturi não estéreis #11 | FST | 10011-00 | |
| Fórceps Cirúrgico | FST | 11024-18 | A ponta da pinça cirúrgica garante uma pegada firme |
| Kerrison Bone Punch | Aesculap Neurosurgery | FF713R | Deve ser robusto, tamanho da mordida 3-5 mm |
| Bone Rongeur | Aesculap Neurosurgery | MD615 | Deve ser robusto, tamanho da mordida 15 x 5 mm |
| Bone Rongeur | Aesculap Neurosurgery | FO551R | Deve ser robusto, tamanho da mordida 25 x 15 mm |
| Cinzel de Osso | Lawton | 67-0335 | O tamanho da cabeça do cinzel não deve exceder 20 mm |
| Martelo (Martelo) | Millarco | 5624108 | Peso 300 g, comprimento 30 cm, tamanho da área de impacto da cabeça 2 x 2 cm |
| Micro-Scissor | FST | 14002-14 | |
| Dissector | Aesculap Neurocirurgia | OL165R | |
| Gö ttingen minipigs | Ellegaard Gö ttingen Minipigs A/S, Dinamarca | ||
| Euthanimal | pentobarbital | ||
| Cetamina | Pfizer | ||
| Midazolam | Hameln Farmacêutica |
Referências
- Lind, M. N., Moustgaard, A., Jelsing, J., Vajta, G., Cumming, P., Hansen, A. K. The use of pigs in neuroscience: Modeling brain disorders. Neurosci Biobehav Rev. 31, 728-751 (2007).
- Bjarkam, C. R., et al. Neuromodulation in a minipig model of Parkinson disease. British ....
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Reimpressões e permissões
