Este artigo de vídeo fornece uma demonstração detalhada das formalidades necessárias para remover com êxito o pâncreas de um rato por dissecação para análise histológica e perfis metabólicos.
Artigo de método
Este artigo de vídeo fornece uma demonstração detalhada das formalidades necessárias para remover com êxito o pâncreas de um rato por dissecação para análise histológica e perfis metabólicos.
Nós temos investigado o fator de transcrição específico do pâncreas, 1a cre-recombinase; sarcoma de rato LOX-paragem-lox-Kristen, glicina, ácido aspártico no codão 12 (Ptf1acre / +; LSL-KrasG12D / +) cepa de rato como modelo de câncer no pâncreas humano. O objetivo dos nossos estudos atuais é identificar biomarcadores metabólicos romance de progressão do câncer pancreático. Efetuamos a criação de perfil metabólico de urina, fezes, sangue e extratos de tecido do pâncreas, bem como a análise histológica do pâncreas para encenar a progressão do câncer. O pâncreas de rato não é um órgão sólido bem definido como nos seres humanos, mas pelo contrário, é um tecido mole difusamente distribuído que não é facilmente identificado por indivíduos que não estão familiarizados com a anatomia interna do mouse ou por indivíduos que têm pouca ou nenhuma experiência realizando dissecções de órgão do rato. O objetivo deste artigo é fornecer uma detalhada step-wise demonstração visual para orientar noviços na remoção do pâncreas rato por dissecação. Este artigo deve ser especialmente valioso para estudantes e investigadores de novo à investigação que requer a colheita do pâncreas de rato por dissecação para criação de perfil metabólico ou análise histológica.
O mouse tem emergido como um importante modelo animal de câncer no pâncreas humano1,2. No Ptf1acre / +; LSL-KrasG12D / + modelo do rato, a Kristen oncogene de sarcoma (K-Ras) de rato é ativado exclusivamente no pâncreas, resultando em iniciação de lesões pré-cancerosas no pâncreas, conhecido como neoplasias intra-epitelial pancreáticas (PanINs), que o progresso para adenocarcinoma ductal do pâncreas, comumente referido como PDACs3. Este sistema de modelo do mouse fornece dentre os melhores modelos animais disponíveis para4,câncer ....
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
os procedimentos realizados no vídeo e descritos a seguir foram aprovados pelo Comitê de uso (IACUC) na Universidade de Miami e institucional Cuidado Animal.
1. preparação e estímulo teste
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
A Figura 1 mostra uma visão geral da área de ambiente operacional e a Figura 2 mostra a área de operação do post. Enquanto essa configuração fornece a quantidade mínima de equipamentos e preparo, os indivíduos podem optar por alterar isto para melhor atender as necessidades individuais. O protocolo deve ser otimizado de acordo com as necessidades específicas da experiência. Este procedimento é realizado de uma forma que termina a.......
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Importância no que diz respeito a métodos existentes
Enquanto existem outros vídeos informais de dissecções de rato, este artigo de vídeo fornece a primeira qualidade profissional, par-revistos, demonstração visual de todas as etapas detalhadas necessárias para extração e colheita do pâncreas rato por dissecação10 . Com o pâncreas é um órgão principal para a atividade metabólica e insulina produção, dissecção e colheita do pâncreas permite a preservação das características fisi.......
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Os autores não têm nada para divulgar.
MAK reconhece apoio para este trabalho a partir do National Institutes of Health / número - 1R15CA152985-01A1 de concessão do National Cancer Institute. Este projeto também foi apoiado pela Miami University graduação prêmio programa de pesquisa, as oportunidades de doutorado-graduação de Universidade de Miami para programa de bolsas e o programa de estudiosos de Verão de Universidade de Miami.
....Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Jarra de Vidro | Corning | 3140-150 | O frasco de vidro usado no vídeo foi descontinuado. Este é o seu substituto. |
| Tampa do Frasco de Vidro | Corning | 9985-150 | A tampa do frasco de vidro usada no vídeo foi descontinuada. Este é o seu substituto. |
| Tubos Falcon de 15 mL | Tesoura Cirúrgica Fisher Scientific | 339650 | |
| Fisher Scientific | 9201 | ||
| Fisher Scientific | 03-409-10DD | ||
| 100% Etanol | Fisher Scientific | 22-032-103 | |
| Formalina | Fisher Scientific | 245-684 | |
| Placas de Espuma | Therapak | 562908 | |
| Fórceps | Fisher Scientific | 200205SHN | |
| 1 mL 21G Seringas | BD Biosciences | 309624 | |
| Tubos Falcon de 50 mL | Fisher Scientific | 339652 | |
| Tubos de Microcentrífuga de 2.0 mL | Fisher Scientific | 02-681-258 | |
| Almofadas Cirúrgicas | Fisher Scientific | S67011 | |
| T-Pins Comprimento: 2" | Produtos da Loja Advance | X32T-05 | |
| Toalhetes Esterilizantes | Descartáveis Profissionais Internacional Inc. | Q85084 | |
| Recipiente para Objetos Cortantes | Fisher Scientific | 14-827-122 | |
| Balança Analítica | Marshall Scientific | ME-AE200 | |
| 4L Dewar | Taylor-Wharton | 4LD | |
| Larga Rasa Dewar | Fisher Scientific | F3087-V | |
| Rack de Microtubo Flutuante | VWR | 60986-100 | |
| Frasco Criogênico 1.2 mL, Estéril | Fisher Scientific | 10-500-25 | |
| Isothesia (Isoflurano) | Henry Schein Saúde Animal | 050033 | |
| Nitrogênio Líquido | Wright Brothers | NIT-60-XX | |
| Cepa Kras de Camundongo | The Jackson Laboratory | OO8179 | |
| Cepa Cre de Camundongo | MMRRC | OOO435-UNC |
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Solicitar permissão para reutilizar o texto ou as figuras deste artigo JoVE
Solicitar permissão