Artigo de método
Este protocolo descreve um método para expor roedores ao vapor de cigarro eletrônico (vapor E) e fumaça de cigarro. As câmaras de exposição são construídas modificando câmaras de anestesia com um sistema de bombeamento automatizado que fornece vapor E ou fumaça de cigarro a roedores. Este sistema pode ser facilmente modificado para acomodar muitos endpoints experimentais.
Cigarros eletrônicos (E- cigarros ) estão sendo amplamente utilizados , e cresce em popularidade. Estima-se que mais de 9 milhões de adultos os usem regularmente. Os potenciais efeitos adversos para a saúde da exposição ao vapor de cigarro eletrônico (vapor E) são mal definidos. Enquanto vários modelos animais de exposição a vapor foram desenvolvidos, poucos modelos expõem roedores a quantidades clinicamente relevantes de nicotina e fazem comparações diretas com a fumaça de cigarro dentro do mesmo sistema de exposição. Aqui, apresentamos um método para construir e operar uma câmara de vapor E e câmara de fumo de cigarro. As câmaras são construídas por equipar câmaras de anestesia com um sistema de bombeamento controlado por computador que fornece quantidades consistentes de EA exposição à nicotina é medida indiretamente pela quantificação dos níveis séricos de cotinina pré e pós-exposição, que podem ser modificados para acomodar vários tipos de cigarros E e cigarros de tabaco e podem Ser utilizados para comparar os efeitos do vapor E e do fumo do cigarro in vivo .
Desde que entraram no mercado norte-americano em 2004, os cigarros eletrônicos (cigarros eletrônicos) se expandiram para uma indústria de bilhões de dólares, e estima-se que quase 9 milhões de adultos os usam regularmente. Em 2014 e 2015, mais estudantes do ensino médio usaram cigarros eletrônicos do que cigarros convencionais 2 . O crescente número de usuários de cigarros eletrônicos gerou um esforço de pesquisa para avaliar seus efeitos adversos potenciais na saúde.
Os cigarros eletrônicos geram um vapor (denominado "vapor E") por aquecimento de uma solução viscosa que tipicamente contém uma mistura de água, poli....
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O protocolo seguinte foi realizado sob a orientação e aprovação do Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Universidade de Michigan (IACUC).
1. Conjunto eletrônico da câmara do vapor do cigarro
NOTA: A câmara completa deve ser colocada numa exaustão durante o uso. A câmara aqui foi alojada num ambiente de laboratório controlado por temperatura e filtrado. Os investigadores podem optar por monitorar tais aspectos do sistema para garantir a consistência da qualidade do ar ambiente. Como uma opção, cobrindo os monitores com uma gaiola de metal pode impedir a manipulação de roedores, permitindo que os m....
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Monitoramento de monóxido de carbono e oxigênio
As concentrações de oxigênio não caíram abaixo de 20% durante a exposição ao vapor e as concentrações de CO permaneceram indetectáveis ao longo da exposição. Os monitores de gás durante a exposição à fumaça de cigarro indicaram que a concentração de oxigênio permaneceu acima de 20%. As concentrações de monóxido de carbono não excederam 1000 ppm ( Figura 4 ).
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Aqui descrevemos um método para construir câmaras que expõem os roedores ao vapor E e ao fumo do cigarro de uma forma controlada ( Figura 6 ). A construção da câmara de cigarros electrónicos é relativamente simples e barata em comparação com os sistemas de exposição comercial 14 , 15 , 16 . As peças e ferramentas necessárias para construir a câmara estão prontamente disponíveis a partir de fornecedores comercia.......
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Os autores não têm nada a revelar.
Esta pesquisa foi tornada possível pelo Aortic Research Grant (University of Michigan) ao Dr. Eliason. Os autores também gostariam de reconhecer Nick Scott no Departamento de Operações e Sinais de Operações de Planta da Universidade de Michigan para ajudar no projeto e montagem do dispositivo de iluminação de cigarros.
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| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Kit Recarregável blu PLUS | blu eCigs | N/A | |
| 1R6F Centro de Referência | para Tob Ref Câmara de Anestesia Lexan Prod | UK N/A | |
| 20 L | Jorgensen Laboratories | JOR265 | |
| Arduino UNO | Arduino | 2877 | |
| Retificador de Diodo - 1 A; 50 V | Resistor | Spark Fun COM-08589 | |
| 10 KOhm 1/6th W PTH - pacote com 20 | Capacitores de | Fun COM-11508 | |
| - 100 uF/25 V | Spark Fun | COM-00096 | |
| Placa de Ensaio Plug-in Sem Solda | Sistemas de Protótipo BusBoard | BB400 | |
| Fios de Clipe de Jacaré | de Ônibus | CA-M-20 | |
| ZipWire | de Protótipo de Placa de Ônibus | ZW-MM-10 | |
| Ventilador Padrão 80 ST2 | Cooler Master | R4-S8R-20AK-GP | |
| ARIC 4" ventilação ajustável | Bestlouver | N/A | |
| ToxiPro Monitor de Monóxido de Carbono (CO) | Honeywell Analytics | 54-00-10316 | |
| Monitor ToxiPro de Oxigênio (O2) | Honeywell Analytics | 54-45-90-VD | |
| Estação de Acoplamento ToxiPro IQ Express | Honeywell/Sperian Biosystems | 54-46-9100 | |
| Gancho de Parede de Comando Fio Pequeno 6-Pack | 3M | N/A | |
| Micro Bomba de Água/Ar | Xiamen Conjoin Electronics | CJWP40-A12A1 | |
| 1/4" Tubulação de Silicone | Conector NewAge | 2801470-100 | |
| T | Bel-Art Scienceware | F196060000 | |
| Tubo de Sangue Total de Plástico com K2EDTA Becton revestido a spray, | Dickinson and Company | 367841 | |
| Kit ELISA de cotinina | Calbiotech | CO096D |
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